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小柴胡顆粒的檢測方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201410174576.X

申請日:

2014.04.28

公開號:

CN103954723A

公開日:

2014.07.30

當前法律狀態:

撤回

有效性:

無權

法律詳情: 發明專利申請公布后的視為撤回IPC(主分類):G01N 30/90申請公布日:20140730|||實質審查的生效IPC(主分類):G01N 30/90申請日:20140428|||公開
IPC分類號: G01N30/90; G01N30/02 主分類號: G01N30/90
申請人: 四川逢春制藥有限公司
發明人: 鐘茂團; 黎勇; 何德中; 古莉
地址: 618100 四川省德陽市中江縣南華鎮迎賓路9號
優先權:
專利代理機構: 成都蓉信三星專利事務所(普通合伙) 51106 代理人: 劉克勤
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201410174576.X

授權公告號:

||||||

法律狀態公告日:

2015.12.16|||2014.08.27|||2014.07.30

法律狀態類型:

發明專利申請公布后的視為撤回|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明涉及一種小柴胡顆粒的檢測方法,包括性狀、鑒別、含量測定、檢查項目,其中,鑒別包括黃芩的鑒別、甘草的鑒別、柴胡的鑒別、大葉柴胡的鑒別,含量測定是黃芩苷的含量測定,本發明針對目前還沒有一套完善的檢測方法對其有效成份進行相應的檢測,導致無法監測不法廠商少投或不投相應原料和監測偽品大葉柴胡的混入,本發明制定了科學合理、切實可行的成分鑒別和含量測定方法,保證了小柴胡顆粒的臨床療效,讓幾種藥材有了明確的質量指標,確保了小柴胡顆粒中各藥材的使用,從而保證了藥品的療效;另一方面,柴胡的偽品大葉柴胡也能有效的檢測,避免了大葉柴胡中含有的柴胡毒素和乙酰柴胡毒素這兩種有毒成份危害患者的健康。

權利要求書

權利要求書
1.  一種小柴胡顆粒的檢測方法,包括性狀、鑒別、含量測定、檢查項目,其特征在于:所述鑒別方法包括黃芩的鑒別、甘草的鑒別、柴胡的鑒別、大葉柴胡的鑒別、黨參的鑒別,所述含量測定是黃芩苷的含量測定,檢測方法如下:
(1)黃芩的鑒別
取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調PH值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點;
(2)甘草的鑒別
取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調PH值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,取甘草對照藥材1g,加水適量,煎煮30分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至20ml,用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷:甲醇:水=40:10:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)柴胡的鑒別
取本品6g,加水20ml,攪拌使溶解,離心,取上清液,加在聚酰胺柱a上,分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100ml洗脫,收集50%乙醇洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取柴胡對照藥材1g,加水適量,煎煮1.5小時,濾過,濾液濃縮至10ml,加在聚酰胺柱b上,分別用水100ml和50%乙醇150ml洗脫,收集50%乙醇洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液2~10ul和對照藥材溶液2ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1為展開 劑,展開,取出,晾干,噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,熱風吹至斑點顯色清晰,置波長為365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點;
(4)大葉柴胡的鑒別
取本品10g,加石油醚20~40ml,浸泡5~20分鐘,超聲處理10~30分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=7~9:0.7~1.3為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(5)黨參的鑒別
取本品20g,研細,再加正丁醇30~70ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液用10~30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇30~70ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液用10~30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=13~17:3~5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點;
(6)黃芩苷的含量測定:
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以甲醇:水:磷酸=47:53:0.2為流動相,檢測波長為315nm,理論板數按黃芩苷峰計算應不低于3000,取黃芩苷對照品適量,加70%乙醇制成每1ml含60ug溶液,即得對照品溶液,取裝量差異項下的本品,混勻,研細,取3g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,稱定重量,超聲處理30分鐘,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液,即得供試品溶液,分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。

2.  根據權利要求1所述的小柴胡顆粒的檢測方法,其特征在于:
(1)大葉柴胡更具體的鑒別
取本品10g,加60~90℃石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理15分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=8:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(2)黨參更具體的鑒別
取本品20g,研細,再加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=15∶4為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。

3.  根據權利要求1所述的小柴胡顆粒的檢測方法,其特征在于:步驟(3)所述聚酰胺柱a為聚酰胺過100~200目篩,稱取過篩后的聚酰胺8g,選擇內徑為2.5~3cm的層析柱,濕法裝柱。

4.  根據權利要求1所述的小柴胡顆粒的檢測方法,其特征在于:步驟(3)所述聚酰胺柱b為聚酰胺過100~200目,稱取過篩后的聚酰胺4g,選擇內徑為2cm的層析柱,濕法裝柱。

說明書

說明書小柴胡顆粒的檢測方法
技術領域
本發明涉及一種小柴胡顆粒的檢測方法。
背景技術
小柴胡顆粒是《中國藥典》2010年版一部收載的品種,處方為柴胡、姜半夏、黃芩、黨參、甘草、生姜、大棗,是純中藥的顆粒劑,具有解表散熱,疏肝和胃的作用,目前市場上用于治療寒熱往來、胸脅苦滿、食欲不振、心煩喜嘔、口苦咽干的常用藥品。但是到目前為止,還沒有一套完善的檢測方法對其有效成份進行相應的檢測,不法廠商就可能在生產藥品時不嚴格按照處方的劑量配料,肆意減少價格高的原料,致使藥品的療效明顯下降,影響藥品的安全有效,嚴重損害患者的利益。另一方面,本藥品的處方來源于《傷寒雜病論》中的名方小柴胡湯,方中用量最大的是柴胡,占整個處方量的三分之一,其功效主要是和解少陽,和胃降逆,扶正祛邪,但是因為柴胡屬于常用藥且使用量較大,而柴胡的產量有限,所以其偽品大葉柴胡也被有意或者無意混入使用,大葉柴胡中含有柴胡毒素和乙酰柴胡毒素,這兩種成份均為有毒物質,此前已多次發生因服用混有大葉柴胡的藥品而中毒的藥害事件,所以控制大葉柴胡很有必要。《山東醫藥工業》于2003年第二十二卷第5期發表了《對中國藥典2000年版柴胡檢驗方法的補充》一文,探討過藥典上大葉柴胡藥材的鑒別控制問題,但是其方法有明顯的不足:放置24小時,檢測時間太長,不利于藥品生產過程控制和藥品質量監督檢查;因柴胡毒素和乙酰柴胡毒素含量相對較低,點樣僅2μl,點樣量過少,影響檢驗的準確性;因柴胡毒素和乙酰柴胡毒素含量相對較低,在紫外燈下檢視,不用顯色劑顯色來觀察,觀察效果不好,更重要的是小柴胡顆粒處方藥味多、所含成份復雜,其它成份會產生混淆和干擾,所以,尋找一種更好的辦法來控制大葉柴胡已是當務之急。
發明內容
本發明的目的,是提供一種小柴胡顆粒的檢測方法,一方面,可有效地監測不法廠商少投或不投相應原料,致使藥品的療效下降的問題;另一方面,控制偽品大葉柴胡的混入,防止了服用后中毒的藥害事件的發生,保證該藥品安全有效。
本發明的技術方案是這樣的:
本小柴胡顆粒的處方是:柴胡150g、姜半夏56g、黃芩56g、黨參56g、甘草56g、生姜56g、大棗56g。
本發明所述的小柴胡顆粒的檢測方法,包括性狀、鑒別、含量測定、檢查項目;其中,鑒別包括對顆粒中柴胡的鑒別、黃芩的鑒別、黨參的鑒別、甘草的鑒別、大葉柴胡的鑒別;含量測定是對顆粒中黃 芩苷的含量測定。
性狀:本品為黃色至棕褐色的顆粒;味甜。
檢查:應符合顆粒劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2010年版一部附錄ⅠC)。
所述檢測方法包括以下:
(1)黃芩的鑒別
取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調PH值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
(2)甘草的鑒別
取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調PH值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。取甘草對照藥材1g,加水適量,煎煮30分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至20ml,用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷:甲醇:水=40:10:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
(3)柴胡的鑒別
取本品6g,加水20ml,攪拌使溶解,離心,取上清液,加在聚酰胺柱(100~200目,8g,內徑為2.5~3cm,濕法裝柱)上,分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100ml洗脫,收集50%乙醇洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材1g,加水適量,煎煮1.5小時,濾過,濾液濃縮至約10ml,加在聚酰胺柱(100~200目,4g,內徑為2cm,濕法裝柱)上,分別用水100ml和50%乙醇150ml洗脫,收集50%乙醇洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液2~10ul和對照藥材溶液2ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,熱風吹至斑點顯色清晰,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。
(4)大葉柴胡的鑒別
取本品10g,加石油醚20~40ml,浸泡5~20分鐘,超聲處理10~30分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=7~9:0.7~1.3為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(5)黨參的鑒別
取本品20g,研細,再加正丁醇30~70ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液用10~30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇30~70ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液用10~30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=13~17:3~5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
其中,大葉柴胡更具體的鑒別方法如下:
取本品10g,加60~90℃石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理15分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=8:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
丹參更具體的鑒別方法如下:
取本品20g,研細,再加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=15∶4為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯 色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
黃芩苷的含量測定:
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇:水:磷酸=47:53:0.2為流動相,檢測波長為315nm,理論板數按黃芩苷峰計算應不低于3000。
對照品溶液的制備取黃芩苷對照品適量,精密稱定,加70%乙醇制成每1ml含60ug溶液,即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品,混勻,取適量,研細,取約3g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率50KHZ)30分鐘,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液,即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。
本品每袋含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)計,不得少于20.0mg。
本發明所述的展開劑之比和流動相之比均以體積比計。
本發明的技術效果:
本發明通過對小柴胡顆粒中黃芩的鑒別、甘草的鑒別、柴胡的鑒別、大葉柴胡的鑒別、黨參的鑒別、黃芩苷的含量測定,讓幾種藥材有了明確的質量指標,確保了小柴胡顆粒中各味藥材的使用,從而保證了藥品的療效,另一方面,柴胡的偽品大葉柴胡也能有效的檢測,避免了大葉柴胡中含有的柴胡毒素和乙酰柴胡毒素這兩種有毒成份危害患者的健康。本發明能更好更全面地反映小柴胡顆粒的質量,而且能有效地控制不法廠商生產偽劣小柴胡顆粒,從而保證了藥品的療效和安全,保證了患者的利益,本發明科學合理、切實可行。
具體實施方式
實施例1:
【處方】柴胡150g姜半夏56g黃芩56g黨參56g甘草56g生姜56g大棗56g
【制法】以上七味,柴胡、黃芩、黨參、甘草及大棗加水煎煮二次,每次1.5小時,合并煎液,濾過,濾液濃縮至適量。姜半夏、生姜用70%乙醇作溶劑,浸漬24小時后進行滲漉,收集滲漉液600ml,回收乙醇,與上述濃縮液合并,濃縮至適量,加入適量的蔗糖,制成顆粒,干燥,制成1000g,即得。
【性狀】本品為黃色至棕褐色的顆粒;味甜。
【鑒別】(1)黃芩的鑒別
取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調PH值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照 品溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
(2)甘草的鑒別
取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調PH值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。取甘草對照藥材1g,加水適量,煎煮30分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至20ml,用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷:甲醇:水=40:10:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
(3)柴胡的鑒別
取本品6g,加水20ml,攪拌使溶解,離心,取上清液,加在聚酰胺柱(100~200目,8g,內徑為2.5~3cm,濕法裝柱)上,分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100ml洗脫,收集50%乙醇洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材1g,加水適量,煎煮1.5小時,濾過,濾液濃縮至約10ml,加在聚酰胺柱(100~200目,4g,內徑為2cm,濕法裝柱)上,分別用水100ml和50%乙醇150ml洗脫,收集50%乙醇洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液2~10μl和對照藥材溶液2μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,熱風吹至斑點顯色清晰,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。
(4)大葉柴胡的鑒別
取本品10g,加60~90℃石油醚20ml,浸泡5分鐘,超聲處理10分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=7:0.7為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(5)黨參的鑒別
取本品20g,研細,再加正丁醇30ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液用10ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇30ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液用10ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=13:3為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
【檢查】應符合顆粒劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2010年版一部附錄ⅠC)。
【含量測定】黃芩苷的含量測定:
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇:水:磷酸=47:53:0.2為流動相,檢測波長為315nm,理論板數按黃芩苷峰計算應不低于3000。
對照品溶液的制備取黃芩苷對照品適量,精密稱定,加70%乙醇制成每1ml含60ug溶液,即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品,混勻,取適量,研細,取約3g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率50KHZ)30分鐘,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液,即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。
本品每袋含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)計21.9mg,不少于20.0mg。
實施例2:
本實施例中,除大葉柴胡的鑒別和黨參的鑒別方法不同之外,其余檢測方法均與實施例1相同,具體鑒別方法如下:
大葉柴胡的鑒別:
取本品10g,加60~90℃石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理15分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=8:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
丹參的鑒別方法:
取本品20g,研細,再加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液 洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=15∶4為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
實施例3:
本實施例中,除大葉柴胡的鑒別和黨參的鑒別方法不同之外,其余檢測方法均與實施例1相同,具體鑒別方法如下:
大葉柴胡的鑒別
取本品10g,加石油醚40ml,浸泡20分鐘,超聲處理30分鐘,濾過,濾液揮至1ml,作為供試品溶液,另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素對照品,加甲醇制成每1ml含柴胡毒素對照品1mg和乙酰柴胡毒素對照品1mg的混合溶液,作為對照品溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正已烷:乙酸乙酯=9:1.3為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(5)黨參的鑒別
取本品20g,研細,再加正丁醇70ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液,另取黨參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇70ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液,照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯:乙酸乙酯=17:5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。

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柴胡 顆粒 檢測 方法
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