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一種番茄花粉活力的測定方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201410084015.0

申請日:

2014.03.10

公開號:

CN103983644A

公開日:

2014.08.13

當前法律狀態:

撤回

有效性:

無權

法律詳情: 發明專利申請公布后的視為撤回IPC(主分類):G01N 21/84申請公布日:20140813|||實質審查的生效IPC(主分類):G01N 21/84申請日:20140310|||公開
IPC分類號: G01N21/84 主分類號: G01N21/84
申請人: 云南農業大學
發明人: 朱海山; 趙凱; 張宏; 楊正安; 鄧明華; 王梓然; 左志梅
地址: 650201 云南省昆明市盤龍區金黑路落索坡132號云南農業大學
優先權:
專利代理機構: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115 代理人: 楊宏珍
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201410084015.0

授權公告號:

||||||

法律狀態公告日:

2016.11.09|||2014.09.10|||2014.08.13

法律狀態類型:

發明專利申請公布后的視為撤回|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明涉及一種番茄花粉活力的測定方法,屬于植物花粉活力研究技術領域。本發明是在現有番茄花粉培養基離體檢驗法基礎上的改進。本發明方法包括培養基的處理、培養基分裝、番茄花朵合理采集時期的確定、花藥筒的剝離、花粉的播種、及花粉活力的測定法。本發明方法的有益效果在于:方法步驟簡易,試驗所需為實驗室常規的藥品和工具,而且能夠有效避免因取花時機不科學和未能全面考察整朵花粉對番茄花粉真正萌發率造成的影響;參考多種肉眼可以識別的番茄花的表型來判斷花粉是否已經生理成熟,避免了因采集的花粉成熟度不同而造成的誤差,測定結果科學、準確、快速。

權利要求書

權利要求書
1.  一種番茄花粉活力的測定方法,其特征在于該方法的步驟如下:
a.培養基的處理:將配置好的培養基用電爐或微波爐加熱使之完全溶解,調節pH為5.5,分裝培養基至50ml組培瓶中,121℃、20min高壓蒸汽滅菌備用;
b.培養基分裝:將經a步驟處理的培養基按每個60mm培養皿分裝4ml培養基,一個培養皿用于測定一朵花的花粉活力;
c.番茄花朵合理采集時期的確定:番茄花的采收時間為晴天早上或陰天中午、番茄花上的露水已干時;采收番茄花的條件為:當天開放,花瓣展開角度180°,花瓣顏色鮮黃,藥筒頂端淡黃色,藥筒金黃且飽滿、膨大;
d.花藥筒的剝離:用左手拇指、食指和中指夾住藥筒,右手食指和拇指捏住花瓣和萼片,將它們一一摘除;之后右手食指和拇指夾持花柄,左手將藥筒從花柄上拔出;
e.花粉的播種:右手捏住一把尖頭鑷子,將鑷子的尖端插入藥筒基部,放松對鑷子挾持力,把藥筒從一側撐開,然后換一把圓頭鑷子,右手食指和拇指夾住展開藥筒的基部,左手捏住藥筒頂部,將花藥向上下折翻幾下,之后換左手食指和拇指握住圓頭鑷子,夾住展開的藥筒的基部,將藥筒放在裝有培養基的培養皿上方,右手食指和拇指夾住尖頭鑷子,敲打夾有花藥的鑷子,同時在培養皿上方勻速平移,使花粉粒均勻的鋪滿培養基表面;
f.花粉活力的測定:將播種過花粉的培養皿放入28℃培養箱,2h后放在光學顯微鏡下觀察,統計花粉萌發率,每個培養皿隨機選取5個視野,計算花粉萌發率的平均值及標準偏差。

說明書

說明書一種番茄花粉活力的測定方法
技術領域:
本發明涉及一種番茄花粉活力的測定方法,屬于植物花粉活力研究技術領域。
技術背景:
番茄作為世界上重要的園藝作物,在我國蔬菜生產和供應中占有舉足輕重的地位。番茄營養豐富,用處廣泛,既可炒食做蔬菜,也可生食做水果,另外,番茄還是一種保健食品。因此,番茄對改善人們的生活質量,提高健康水平,促進農民增收,增加社會經濟效益及調整農業產業結構具有重要意義。番茄具有明顯的雜種優勢,生產中使用的番茄種子絕大多數為雜種一代。番茄為兩性花,屬自花授粉作物,花粉活力易受內部和外界多種因素的影響。如何鑒定、收集高純度和高生活力的花粉對保證雜交種子的產量和質量具有至關重要的作用。植物花粉活力的檢測方法主要有形態檢驗法、染色法、培養基發芽檢驗法等。形態學觀察法簡單省工,但有些花粉形態正常,但是已經失去活力;染色法在染色時也會有誤差,在顯微鏡下不易分辨;培養基花粉離體發芽檢驗法是普遍使用的方法,檢驗效果最為理想。測定番茄花粉活力最常用的方法是培養基離體檢驗法,具體的操作是先在載玻片的平面或凹面滴加液體或固體培養基,之后將番茄的花粉撒播在培養基上,蓋上蓋玻片,保溫保濕一段時間,顯微鏡下觀察花粉萌發情況。由于載玻片上的培養基表面積太小,容易脫水干枯,所以在花粉的培養過程中還要注意保濕,操作較為繁瑣。而且培養基上只能播種一朵花中的部分花粉,不能科學、一致地反應一整朵花中所有花粉粒的活力。
目前,關于番茄花粉活力鑒定方法研究已有報道。但經文獻檢索,未發現與本發明內容相同文獻的公開報道。
發明內容:
本發明的目的在于提供一種科學、準確、快速測定番茄花粉活力的方法。
本發明是在現有番茄花粉培養基離體檢驗法基礎上的改進。本發明的具體步驟如下:
a.培養基的處理:將按常規方法配置的培養基用電爐或微波爐加熱使之完全溶解,調節pH為5.5,分裝培養基至50ml組培瓶中,121℃、20min高壓蒸汽滅菌備用;
b.培養基分裝:將經a步驟處理的培養基按每個60mm培養皿分裝4ml培養基,一個培養皿用于測定一朵花的花粉活力;
c.番茄花朵合理采集時期的確定:番茄花的采收時間為晴天早上或陰天中午、番茄花上的露水已干時;采收番茄花的條件為:當天開放,花瓣展開角度180°,花瓣顏色鮮黃,藥筒頂端淡黃色,藥筒金黃且飽滿、膨大;
d.花藥筒的剝離:用左手拇指、食指和中指夾住藥筒,右手食指和拇指捏住花瓣和萼片,將它們一一摘除;之后右手食指和拇指夾持花柄,左手將藥筒從花柄上拔出;
e.花粉的播種:右手捏住一把尖頭鑷子,將鑷子的尖端插入藥筒基部,放松對鑷子挾持力,把藥筒從一側撐開,然后換一把圓頭鑷子,右手食指和拇指夾住展開藥筒的基部,左手捏住藥筒頂部,將花藥向上下折翻幾下,之后換左手食指和拇指握住圓頭鑷子,夾住展開的藥筒的基部,將藥筒放在裝有培養基的培養皿上方,右手食指和拇指夾住尖頭鑷子,敲打夾有花藥的鑷子,同時在培養皿上方勻速平移,使花粉粒均勻的鋪滿培養基表面;
f.花粉活力的測定:將播種過花粉的培養皿放入28℃培養箱,2h后放在光學顯微鏡下觀察,統計花粉萌發率,每個培養皿隨機選取5個視野,計算花粉萌發率的平均值及標準偏差。
本發明方法所需藥品和工具為常規的市購品。
本發明方法的有益效果在于:方法步驟簡易,試驗所需為實驗室常規的藥品和工具,而且能夠有效避免因取花時機不科學和未能全面考察整朵花粉對番茄花粉真正萌發率造成的影響;參考多種肉眼可以識別的番茄花的表型來判斷花粉是否已經生理成熟,避免了因采集的花粉成熟度不同而造成的誤差,測定結果科學、準確、快速。
具體實施方式:
本發明方法的具體測定步驟同發明內容部分的描述。實施例所需藥品和工具為常規的市購品。
實施例:5#番茄自交系花粉活力的測定
5#番茄自交系為本課題組經多年自交選育的純系。本試驗選取3株生長勢一致,處于盛花期的5#番茄自交系,從2013年10月1日開始取花,每隔一天取花一次,每次每株取花3朵,共取花5次,時間持續到2013年10月9日,被采花朵需滿足c步驟中的各項標準,三株番茄每次共取花9朵,每朵花需4ml培養基,共需準備36ml培養基重新融化,分裝于9個60mm培養皿中。花藥的剝離和花粉的播種同步驟d和步驟e。花粉活力的測定同步驟f,即:將放入28℃培養箱,2h后的培養皿放在10倍光學顯微鏡下觀察,統計花粉萌發率,每個培養皿隨機選取5個視野,計算花粉萌發率的平均值及標準偏差,結果見表1。
表1:5#番茄自交系花粉萌發率的平均值及標準偏差

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一種 番茄 花粉 活力 測定 方法
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