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新型的特異性細胞免疫應答體外檢測方法及其臨床應用.pdf

摘要
申請專利號:

CN201410122051.1

申請日:

2014.03.29

公開號:

CN103983785A

公開日:

2014.08.13

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):G01N 33/68申請日:20140329|||公開
IPC分類號: G01N33/68 主分類號: G01N33/68
申請人: 陳仁奮
發明人: 陳仁奮; 魏秀妹
地址: 350001 福建省福州市鼓樓區華林路屏東城11棟-302
優先權:
專利代理機構: 福州元創專利商標代理有限公司 35100 代理人: 蔡學俊
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201410122051.1

授權公告號:

||||||

法律狀態公告日:

2015.12.30|||2014.09.10|||2014.08.13

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明公開了一種新型的特異性細胞免疫應答體外檢測方法及其臨床應用,該方法包括Sm合成肽抗原的合成及篩選,待檢血液與Sm混合肽抗原的混合培養,檢測培養血上清液中特定細胞因子的水平。該檢測方法可以應用于系統性紅斑狼瘡臨床的輔助診斷和治療監控。本發明具備多種臨床應用功能,而且簡便快速,容易操作,可靈活運用等特點,具有很好的應用前景。

權利要求書

權利要求書
1.  一種新型的細胞免疫應答體外檢測方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)篩選并混合能被T細胞特異識別的Smith(Sm)合成肽,作為刺激待檢外周血白細胞的抗原,同時設立絲裂原PHA作陽性對照;
(2)將待檢血液與抗原混合,37℃培養20-24小時;
(3)檢測培養血上清液中特定細胞因子的水平,以判斷機體對特異性抗原Sm混合肽和非特異性免疫原絲裂原PHA的細胞免疫應答水平。

2.  如權利要求1所述的細胞免疫應答體外檢測方法,其特征在于:所述的Sm混合肽抗原包含五條合成肽, 分別為Sm1、Sm2、Sm3、Sm4、Sm5 ,具體氨基酸序列如下:
Sm1: RGNNIRYFILPDSLPLDTLL;         
Sm2 :SHETVTIELKNGTQVHGTIT;   
Sm3:GVDVSMNTHLKAVKMT;           
Sm4:TVGKSSKMLQHIDYRMRCI;   
Sm5: PMGIPPGRGTPMGMPPPGM。

3.   如權利要求1、2所述的細胞免疫應答體外檢測方法,其特征在于:所述的Sm合成肽抗原由FMOC固相合成方法自動或人工合成,經HPLC分析和純化,抗原純度90%以上。

4.  一種如權利要求1、2、3所述的細胞免疫應答體外檢測方法的臨床應用,其特征在于包括:
(1)通過測定待檢血經Sm 混合肽刺激產生IL-6的含量,判斷患者對Sm混合肽抗原的刺激是否存在高水平的細胞免疫應答,以實驗診斷SLE;
(2)通過分析SLE患者經Sm混合肽抗原特異刺激后產生的細胞因子譜,為病人選擇細胞因子拮抗劑進行個體化治療提供實驗參考;
(3)通過觀察SLE患者外周血對絲裂原刺激所釋放的細胞因子的能力,既可以評估病人的整體細胞免疫功能狀態, 也可用來判定該實驗結果的可靠性,以排除假陰性結果。

關 鍵 詞:
新型 特異性 細胞 免疫 應答 體外 檢測 方法 及其 臨床 應用
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本文標題:新型的特異性細胞免疫應答體外檢測方法及其臨床應用.pdf
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