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一種用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201510552734.5

申請日:

2015.09.02

公開號:

CN105063761A

公開日:

2015.11.18

當前法律狀態:

撤回

有效性:

無權

法律詳情: 發明專利申請公布后的視為撤回IPC(主分類):C40B 50/06申請公布日:20151118|||實質審查的生效IPC(主分類):C40B 50/06申請日:20150902|||公開
IPC分類號: C40B50/06; G06F19/24(2011.01)I 主分類號: C40B50/06
申請人: 云南大學
發明人: 張穎; 張克勤; 張云潤; 董建勇; 和曉霞; 徐建平
地址: 650091云南省昆明市翠湖北路2號
優先權:
專利代理機構: 昆明今威專利商標代理有限公司53115 代理人: 楊宏珍
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201510552734.5

授權公告號:

||||||

法律狀態公告日:

2017.12.05|||2015.12.16|||2015.11.18

法律狀態類型:

發明專利申請公布后的視為撤回|||實質審查的生效|||公開

摘要

一種用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法,屬真菌物種鑒定領域。該方法使用RPB2基因作為捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬鑒定的目標DNA條形碼基因,采用合并節叢孢屬樣本實驗數據和目標真菌數據的策略構建高容量數據庫,同時使用待鑒別真菌的RPB2基因與基因庫進行比較,基于Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法和聚類分析的系統發生樹法設立鑒定的規則鑒別物種。有益效果在于:RPB2基因作為最適合鑒別捕食線蟲絲孢菌的DNA條形碼,具有通用、易擴增、易比對的特點;該鑒別方法的鑒定效率及其鑒定的可靠性和準確性也大大優于常規的DNA條形碼方法,彌補了捕食線蟲絲孢菌DNA條形碼分子標記的空白,為捕食線蟲絲孢菌的種質資源挖掘、生防應用和遺傳多樣性研究提供有力的研究工具。

權利要求書

1.一種用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法,其特征在于該方法包
括RPB2基因序列片段的基因庫的建立和新樣品的鑒別步驟;其中:
(1)RPB2基因序列片段的基因庫的建立:收集《中國真菌志》第三十三卷《節叢
孢及相關屬》中記載的節叢孢屬概念清晰的種為材料,然后提取其基因組DNA,以其
為模板,優選SEQIDNO.55和SEQIDNO.56引物序列擴增樣品的RPB2基因序列片段,
由此建立包括捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬菌株的基因庫;所述基因庫包括下述序列編號所
示的RPB2基因序列片段:SEQIDNO.1-54;
(2)新樣品的鑒別:通過將待鑒別真菌的序列與基因庫內已有的序列之間的進行比
對,基于Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法和基于聚類分析的系統發生樹法設立鑒
定規則來鑒別物種,獲得多個序列間的相似性,相似度最高或匹配度最高或遺傳距離最
小的對應物種即為待鑒別真菌的物種;具體如下:
a.基于Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法設立鑒定規則來鑒別物種
將新的待鑒別樣品與此基因庫的基因片段進行比對,使用Mega6.0軟件計算未鑒定
樣品DNA條形碼序列與數據庫中每一個序列的Kimura-2-parameter遺傳距離,計算種
內種間變異值,鑒別物種;對于基因庫內的捕食線蟲絲孢菌序列,已經計算出捕食線蟲
絲孢菌節叢孢屬的種內最大變異值,當新的待鑒別樣品與此基因庫的基因片段進行比對
后,得到多個序列間最小變異值即種間最小變異值,這些值等于或小于已計算出的某物
種的種內最大變異值,視為與其同一物種;
b.基于聚類分析的系統發生樹法設立鑒定規則來鑒別物種
應用MEGA或PAUP軟件構建NJ、ML、MP系統發育樹,檢驗未鑒定樣品的DNA
條形碼序列與數據庫中序列聚類在一起的物種,若未知樣品與數據庫中的物種構成單支
系,則鑒定為該物種。

說明書

一種用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法

技術領域:

本發明屬于真菌物種鑒定領域,具體而言,本發明涉及一種用DNA條形碼鑒別捕
食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法。

背景技術:

植物寄生線蟲病是一類在世界范圍內普遍發生的植物病害,目前已知的根結線蟲種
類就有70多種,危害3000多種植物,全球每年因線蟲病造成的損失高達1580多億美
元。在我國,線蟲危害蔬菜、煙草、花卉、林木、中藥材、棉花、大豆等幾乎所有的作
物,松材線蟲被稱為無煙森林火災,在國內多個省區廣泛發生,成為農林業生產的重要
限制因子之一。面臨如此嚴重的線蟲侵害現象,目前已開發多種殺線蟲試劑,但長期使
用化學農藥除了造成環境污染、殘留、破壞生態平衡等弊端外,更加劇了線蟲的抗藥性,
開發對環境安全的生物農藥已經越來越受到關注。捕食線蟲絲孢菌作為病原線蟲的重要
天敵,是自然界中控制、平衡和調節線蟲種群數量的重要生物因子,也是研究開發生物
殺線蟲劑的寶貴資源,保護和評估具有潛在經濟價值的捕食線蟲絲孢菌具有重要的科學
和應用價值。目前國內外開發的線蟲生防制劑已達6個,其中有兩個Royal300和
Royal350均是利用節叢孢屬真菌開發的生防產品,節叢孢屬真菌資源在線蟲生防產品開
發中具有舉足輕重的地位。

目前全世界共報道捕食線蟲絲孢菌96種,包含節叢孢屬Arthrobotrys、亞隔指孢屬
Dactylellina和德氏霉屬Drechslerella等重要屬,其中節叢孢屬54種。盡管目前已經有
比較清晰的屬級水平上的分類概念,但由于不同的研究者對種的概念有不同的理解,故
捕食線蟲絲孢菌在物種水平上的爭議依然存在。物種的劃分還是依賴于傳統的形態結
構,即分生孢子和分生孢子梗的形態,導致捕食線蟲絲孢菌種間、種內分類同名異物、
同物異名的問題普遍存在,至今還沒有形成一個公認的分類系統和種間清晰的分類界
限,嚴重阻礙了該類重要菌種資源的挖掘和開發。

由于依靠形態學結構的傳統分類在真菌分類中有很大的局限性,近年來分子數據受
到了真菌分類學家們的青睞,基于DNA序列并加以形態結構特征輔佐的物種鑒定方法將
快速取代早期僅依靠形態結構特征的物種鑒定方式。DNA條形碼是一種基于DNA序列進
行生物物種鑒定的技術,即利用標準化的一個或幾個DNA片段進行序列分析,根據核苷
酸序列差異,實現快速和準確地鑒定物種。通常,DNA條形碼篩選有以下標準:(1)標準
的短片段;(2)要有足夠的變異能將物種分開來,種間差異比較大,便于進行種與種的
區分,種內序列變異盡量小,從而使種間和種內變異有一個明晰的界定;(3)序列兩段
相對保守,以方便引物的設計。目前,還未報道有某條特定DNA條形碼能夠適用于所
有真菌的鑒別,因此針對具體的真菌類群,仍需要進行實驗來尋找到合適的基因序列作
為DNA條形碼使用。利用DNA條形碼技術來對捕食線蟲絲孢菌物種進行便捷準確地
鑒定,對于擴大該類重要真菌種質資源,挖掘生物防治應用菌株,揭示重要捕食線蟲絲
孢菌的物種多樣性和遺傳多樣性都具有十分重要的意義。

發明內容:

本發明的目的在于提供一種準確、快捷的用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢
孢屬的方法。

本發明的技術方案如下:

一種用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法,包括RPB2基因序列片
段的基因庫的建立和新樣品的鑒別步驟;其中:

(1)RPB2基因序列片段的基因庫的建立:收集《中國真菌志》第三十三卷《節叢
孢及相關屬》中記載的節叢孢屬概念清晰的種為材料,然后提取其基因組DNA,以其
為模板,優選SEQIDNO.55和SEQIDNO.56引物序列擴增樣品的RPB2基因序列片段,
由此建立包括捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬菌株的基因庫;所述基因庫包括下述序列編號所
示的RPB2基因序列片段:SEQIDNO.1-54;

(2)新樣品的鑒別:通過將待鑒別真菌的序列與基因庫內已有的序列之間的進行比
對,基于Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法和基于聚類分析的系統發生樹法設立鑒
定規則來鑒別物種,獲得多個序列間的相似性,相似度最高或匹配度最高或遺傳距離最
小的對應物種即為待鑒別真菌的物種;具體如下:

a.基于Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法設立鑒定規則來鑒別物種

將新的待鑒別樣品與此基因庫的基因片段進行比對,使用Mega6.0軟件計算未鑒定
樣品DNA條形碼序列與數據庫中每一個序列的Kimura-2-parameter遺傳距離,計算種
內種間變異值,鑒別物種;對于基因庫內的捕食線蟲絲孢菌序列,已經計算出捕食線蟲
絲孢菌節叢孢屬的種內最大變異值,當新的待鑒別樣品與此基因庫的基因片段進行比對
后,得到多個序列間最小變異值即種間最小變異值,這些值等于或小于已計算出的某物
種的種內最大變異值,視為與其同一物種;

b.基于聚類分析的系統發生樹法設立鑒定規則來鑒別物種

應用MEGA或PAUP軟件構建NJ、ML、MP系統發育樹,檢驗未鑒定樣品的DNA
條形碼序列與數據庫中序列聚類在一起的物種,若未知樣品與數據庫中的物種構成單支
系,則鑒定為該物種。

本發明的有益效果在于:

1、優選RPB2基因作為最適合鑒別捕食線蟲絲孢菌的DNA條形碼,相比于其他基
因,RPB2序列具有通用、易擴增、易比對的特點。

2、建立了包括捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬菌株的基因庫和新樣品的鑒別方法,相比
于傳統的形態顯微觀察進行鑒定的方法,鑒定效率大大提高,對于樣品的完整程度要求
低,鑒別指標能夠量化,加之同時使用Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法和基于聚
類分析的系統發生樹法設立鑒定規則進行鑒定,其鑒定的可靠性和準確性也大大優于常
規的DNA條形碼方法,彌補了捕食線蟲絲孢菌DNA條形碼分子標記的空白,為捕食
線蟲絲孢菌的種質資源挖掘、生防應用和遺傳多樣性研究提供有力的研究工具。

附圖說明:

圖1是基于RPB2基因庫中菌株和待鑒定菌株SP1的遺傳距離構建的NJ樹。

具體實施方式:

實施例1:捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬DNA條形碼即RPB2基因序列片段的基因庫
的建立

(1)所選菌株捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬共計有32個種,54個菌株,均是《中國真
菌志》第三十三卷《節叢孢及相關屬》中記載的節叢孢屬概念清晰的種,且每個常見種
至少包含3個菌株,以滿足后續計算種內最大遺傳變異值的需要。詳細信息見表1。

表1樣品信息表




(2)將表1中所列樣品純培養菌株接種于CMA平板[玉米粉培養基:玉米粉30g,
瓊脂16g,水1000ml,自然pH,玉米粉加水適量煮沸30分鐘,四層紗布過濾,濾液加
水至1000ml,混勻,分裝。121℃滅菌20-30分鐘]和PDA平板[土豆培養基:去皮土豆
200g,葡萄糖20g,瓊脂16g,水1000ml,自然pH,將土豆削皮后,切成小塊,加水適
量煮沸30分鐘,四層紗布過濾,濾液加水至1000ml,混勻,分裝。121℃滅菌20-30分
鐘]。CMA平板轉接的菌株待菌絲長滿后保藏于4℃,以便后續使用。而PDA平板則用
于富集營養菌絲,用于提取總DNA用。

(3)基因組DNA采用改進過的CTAB法提取:往步驟(2)中收集好菌絲的離心管
中加入0.3g的石英砂(Sigma),再加入850μL的CTAB裂解液[2%CTAB(w/v);100mM
Tris-HCl;1.4MNaCl;20mMEDTA,pH8.0],用研磨棒充分研磨,直至呈勻漿狀;
置于65℃水浴鍋水浴90min,,然后用酚∶氯仿(1:1)反復抽提,離心,直至獲得澄清
透亮的液體提取物且上下兩相液面交界處沒有白色沉積物;收集上清液并加入等體積的
異丙醇(或2倍體積的無水乙醇)沉淀DNA,加入1mL75%的乙醇(4℃保存)洗滌
DNA,待DNA沉淀完全干燥,加入50μL無菌水室溫溶解沉淀;取5μLDNA溶液在1.5%
瓊脂糖凝膠上電泳檢測基因組DNA的純度和完整性;最后,所得DNA樣品置-20℃保
存備用。

(4)以步驟(3)獲得的基因組DNA為模板,采用下述序列作為引物從所述待鑒別
真菌的基因組DNA中擴增RPB2基因序列片段,(正向:5
‘-TGGGGKWTGGTYTGYCCTGC-3’,反向:5‘-CCCATWGCYTGCTTMCCCAT-3’);
PCR反應在EppendorfPCR儀上進行,用常規方法擴增的片段,反應程序如下:95℃預
變性3min,95℃變性30s,60℃-56℃退火,每個溫度梯度一個循環,1min,55℃-54℃
退火,每度4個循環,1min,最后的退火溫度為50℃,1min,20個循環,每次退火之
后緊接72℃延伸1min,一共33個循環,最后72℃延伸10min,結束以4℃保存;PCR
反應體系為25μL,內含10×擴增緩沖液2.5μL,200μMdNTP0.5μL,MgCl22.5μL,正反
向引物各0.5μL,模板1μL,TagDNA聚合酶0.2μL,去離子無菌水17.8μL。其中10×
擴增緩沖液、TagDNA聚合酶和dNTP均由生工生物工程(上海)有限公司生產;對檢
測到有清晰明亮條帶的PCR產物,保存于-20℃或直接送華大基因進行測序,測序引物
與擴增引物一致。

(5)測序后得到的序列首先在軟件Chromas中檢查峰圖質量,確定峰圖質量達到數
據分析的要求之后,用DNASTAR軟件包(DNASTARInc.,USA)中的SeqMan進行正
反向序列的拼接;將測序序列合并GenBank數據庫中已發表的同種序列,建立包括捕
食線蟲絲孢菌節叢孢屬菌株的基因庫。所述基因庫包括下述序列編號所示的RPB2基因
序列片段:SEQIDNO.1-54。數據庫中的RPB2基因序列片段用軟件MAFFTv7.149b
自動比對,并借助Gblocks0.91b軟件優化比對結果。同時,將比對結果導入使用Mega6.0
軟件計算出捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的種內最大變異值為0.041。

實施例2:節叢孢屬真菌未知物種的鑒定

(1)選疑似但未經鑒定的,節叢孢屬純培養菌株SP1分為兩份,一份用傳統分類學
方法鑒定,另一份用本發明中所用方法鑒定。

(2)采用實施例1中所述步驟提取菌株中的基因組DNA,以SEQIDNO.55和SEQ
IDNO.56作為引物擴增RPB2基因序列片段。如實施例1所示,進行PCR產物檢測、
測序、DNA條形碼序列獲得,然后進行下述結果判定。

(3)通過將待鑒別真菌的序列與基因庫內已有的序列之間的進行比對,基于
Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法和基于聚類分析的系統發生樹法設立鑒定規則來
鑒別物種,獲得多個序列間的相似性,相似度最高或匹配度最高或遺傳距離最小的對應
物種即為待鑒別真菌的物種。具體如下:

a.基于Kimura-2-parameter概率的遺傳距離法設立鑒定規則來鑒別物種

使用Mega6.0軟件計算未鑒定樣品DNA條形碼序列與數據庫中每一個序列的
Kimura-2-parameter遺傳距離,得到多個序列間最小變異值(即“種間最小變異值”),這些
值等于或小于已計算出的種內最大變異值0.041,視為節叢孢屬真菌,而未知樣品與基
因庫中的物種少孢節叢孢(Arthrobotrysoligospora)的遺傳距離最小,與其三個菌株
YMF1.03036、YMF1.03037和YMF1.03255的遺傳距離分別為0.001、0和0.006,初步
鑒定為少孢節叢孢。

b.基于聚類分析的系統發生樹法設立鑒定規則來鑒別物種

先應用CLUSTAL軟件進行序列比對,應用MEGA或PAUP等軟件構建NJ、ML、
MP等系統發育樹,檢驗未鑒定樣品SP1的DNA條形碼序列與數據庫中少孢節叢孢菌
株YMF1.03036和YMF1.03037序列聚類在一起,且構成單支系,如圖1所示,鑒定為
該物種。

經本方法鑒別后的,得到的結論與傳統分類學方法對比,結果一致,但經過比較,
本方法對樣品的要求比傳統方法的要求易得。

SEQUENCELISTING

<110>云南大學

<120>一種用DNA條形碼鑒別捕食線蟲絲孢菌節叢孢屬的方法

<130>2015

<160>56

<170>PatentInversion3.3

<210>1

<211>717

<212>DNA

<213>葉狀枝節叢孢(Arthrobotryscladodes)

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<213>秀麗節叢孢(Arthrobotryelegans)

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<213>秀麗節叢孢(Arthrobotryelegans)

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<213>秀麗節叢孢(Arthrobotryelegans)

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<213>厚皮節叢孢(Arthrobotryeudermata)

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<213>厚皮節叢孢(Arthrobotryeudermata)

<400>13

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<213>鞭式節叢孢(Arthrobotryflagrans)

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<213>紡錘形節叢孢(Arthrobotryfusiformis)

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<213>球狀節叢孢(Arthrobotryglobospora)

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<213>貴州節叢孢(Arthrobotryguizhouensis)

<400>17

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<213>兩棲節叢孢(Arthrobotryjanus)

<400>18

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<213>爪哇節叢孢(Arthrobotryjavanica)

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<213>爪哇節叢孢(Arthrobotryjavanica)

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<213>長梗節叢孢(Arthrobotrylongiphora)

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<213>小舟節叢孢(Arthrobotrymicroscaphoides)

<400>22

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<213>小舟節叢孢(Arthrobotrymicroscaphoides)

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<213>小舟節叢孢(Arthrobotrymicroscaphoides)

<400>24

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<210>25

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<213>彎孢節叢孢(Arthrobotrymusiformis)

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<210>26

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<213>彎孢節叢孢(Arthrobotrymusiformis)

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<211>734

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<213>彎孢節叢孢(Arthrobotrymusiformis)

<400>27

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<210>28

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<213>無膈節叢孢(Arthrobotrynonsepte)

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<210>29

<211>735

<212>DNA

<213>倒卵形節叢孢(Arthrobotryobovata)

<400>29

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<213>少孢節叢孢(Arthrobotryoligospora)

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<210>31

<211>735

<212>DNA

<213>少孢節叢孢(Arthrobotryoligospora)

<400>31

ggtcaaaaacttgcccatcatacatcactgtcggatctcctacggaacctatccaagcgt60

ttatggaacagcggaatttggagccgttggaaaccttcgaaccaggcagatcacccaacg120

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<210>32

<211>735

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<213>少孢節叢孢(Arthrobotryoligospora)

<400>32

ggtcaaaaacttgcccatcatacatcactgtcggatctcctacggaacctatccaagcgt60

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<210>33

<211>735

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<213>卵形節叢孢(Arthrobotryoviformis)

<400>33

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<213>多頭節叢孢(Arthrobotrypolycephala)

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<210>35

<211>735

<212>DNA

<213>多頭節叢孢(Arthrobotrypolycephala)

<400>35

ggtcaaaaacttgctcatcctacatcactgtcggttctccaaccgaacccatccaggcct60

tcatggaacagaggaacctggaacccttggaaacctttgagcccggtagatctccgaacg120

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accgaacagttctcagtcttcgccgaacgaacgttatcagtcacgaagttagtgttatcc240

gtgatatccgtgacagagagttcaagatcttcagcgacgctggacgtgtgactcgcccgc300

tctatgttattgacaatgatccgggcagtctgcgcaagggtgagcttgttttgcagaagt360

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tgggtatttgcgccagcattatccccttcccagatcacaaccaggtatgcatttatttac720

ttaatctcatagtcc735

<210>36

<211>735

<212>DNA

<213>多頭節叢孢(Arthrobotrypolycephala)

<400>36

ggtcaaaaacttgctcatcctacatcactgtcggttctccaaccgaacccatccaggcct60

tcatggaacagaggaacctggaacccttggaaacctttgagcccggtagatctccgaacg120

tcacaaaagtctttattaacggctcttgggttggtgttcaccgtgacgccgcgtctcttt180

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tctatgttattgacaatgatccgggcagtytgcgcaagggtgagcttgttttgcagaagt360

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tgggtatttgcgccagcattatccccttcccagatcacaaccaggtatgcatttatttac720

ttaatctcatagtcc735

<210>37

<211>735

<212>DNA

<213>霜簇節叢孢(Arthrobotrypsychrophila)

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<213>梨形節叢孢(Arthrobotrypyriformis)

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<213>梨形節叢孢(Arthrobotrypyriformis)

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ctgactcagtagtcc735

<210>40

<211>735

<212>DNA

<213>梨形節叢孢(Arthrobotrypyriformis)

<400>40

ggtcaaaaatttgcttatcatacattaccgtcggatctcccaccgaacctatccaggctt60

ttatggaacagagaaatcttgaaccattagaaacctttgaacctggccgatctcccaatg120

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aagagaagtatggttggaacgggcttctaaacgatggctgtgttgagtacgttgacgccg480

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ttcaagccggctacgagattccagttgacgacagcggtgatatggcgaagagggtcaagg600

cgaaagtcaatccttacgcccatacatggacccactgtgaaattcaccccagtatgattc660

tgggtatctgtgccagtatcattcctttccctgatcacaaccaggtacgtatcaattttt720

ctgactcagtagtcc735

<210>41

<211>735

<212>DNA

<213>狂帶節叢孢(Arthrobotryrutgeriense)

<400>41

ggtcaaaaacttgcgcatcatacattaccgtcggatcccctaccgagcctatccaggcct60

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ttacaaaggtcttcatcaacggctcgtgggtcggtgttcaccgtgatgccgcgtctctct180

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aagagaagtatggttggaatgggcttttgaacgacggctgcgttgaatacgtggatgctg480

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tgcaagcgggttacgaaattccagttgatgacagcggtgatatggccaagagggtcaagg600

cgaaggtcaacccttacgctcacacctggactcactgtgaaattcacccgagtatgattc660

tgggtatctgtgccagcattattcctttccctgatcacaaccaggtacgttgcctccttt720

ctaacttagcagtcc735

<210>42

<211>735

<212>DNA

<213>舟狀節叢孢(Arthrobotryscaphoides)

<400>42

ggtcaaaaacttactcatcatacattactgtcggatctcccaccgaacccatccaggctt60

ttatggagcagagaaatttggagccattagaaaccttcgagcctggccgatcccccaacg120

tcacaaaggtattcatcaacgggtcttgggttggtgttcaccgtgatgccgcatctctct180

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tctacgttattgacaatgatccgggcagtctgcgcaagggcgagctggtcttgcaaaaat360

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tgggtatctgtgccagcattattcccttccctgatcacaaccaggtacgtacactctttt720

ctaacttaatagtcc735

<210>43

<211>735

<212>DNA

<213>獅子山節叢孢(Arthrobotryshizishanna)

<400>43

ggtcaaaaacttacttatcatacattactgtcggatctccaaccgaacctatccaggctt60

tcatggagcagaggaatctggagccattggaaacttttgagcccggcagatcccccaacg120

tcacaaaggtcttcatcaacgggtcctgggttggtgttcaccgtgatgctgcttctctct180

accgaacagtcctcagtttgcgccgaaccaatgttataagtcacgaggtcagcgtcattc240

gcgatattcgtgaccgagagtttaagattttcagtgatgctggacgtgtgactcgcccgc300

tctatgttattgacaatgatccgggcagtctacgcaagggcgagctggttttgcagaaat360

atcacattgagaagctcgaaaatgcaaagttccaaaccgcggaagatcttgcgccgggtg420

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<213>中華節叢孢(Arthrobotrysinensis)

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<213>球形節叢孢(Arthrobotrysphaeroides)

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<213>球形節叢孢(Arthrobotrysphaeroides)

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<213>多孢節叢孢(Arthrobotrysuperba)

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<213>奇妙節叢孢(Arthrobotrythaumasia)

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<213>奇妙節叢孢(Arthrobotrythaumasia)

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<213>奇妙節叢孢(Arthrobotrythaumasia)

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<213>蠕蟲狀節叢孢(Arthrobotryvermicola)

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<213>蠕蟲狀節叢孢(Arthrobotryvermicola)

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<213>云南節叢孢(Arthrobotryyunnanensis)

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關 鍵 詞:
一種 DNA 條形碼 鑒別 捕食 線蟲 絲孢菌節叢孢屬 方法
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