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復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝.pdf

摘要
申請專利號:

CN201510506491.1

申請日:

2015.08.18

公開號:

CN105152809A

公開日:

2015.12.16

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 專利實施許可合同備案的生效IPC(主分類):C05G 3/04合同備案號:2018370000035讓與人:濟南航晨生物科技有限公司受讓人:山東金沂蒙生態肥業有限公司發明名稱:復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝申請日:20150818申請公布日:20151216授權公告日:20180824許可種類:獨占許可備案日期:20180831|||授權|||實質審查的生效IPC(主分類):C05G 3/04申請日:20150818|||公開
IPC分類號: C05G3/04; C05F11/02 主分類號: C05G3/04
申請人: 濟南航晨生物科技有限公司
發明人: 趙林; 李昆侖; 孫欣; 晉以杰
地址: 250002山東省濟南市市中區濟大路7號
優先權:
專利代理機構: 濟南舜源專利事務所有限公司37205 代理人: 江莉莉
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201510506491.1

授權公告號:

|||||||||

法律狀態公告日:

2018.09.28|||2018.08.24|||2016.01.13|||2015.12.16

法律狀態類型:

專利實施許可合同備案的生效、變更及注銷|||授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明屬于微生物應用技術領域,具體涉及一種復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝。該工藝,包括下述的步驟:將褐煤加入到緩沖液中;再加入復合微生物菌液、復合酶制劑得混合溶液;將混合溶液升溫,攪拌;加入離子交換劑,調節pH,并升溫,離子交換;離心分離。本發明采用復合微生物分解活化腐殖酸,其溫度、pH、時間均低于傳統化學提取工藝,且黃棕腐殖酸得率在35%以上,遠高于相同生產成本條件下的酸堿活化法,且具有明顯的成本優勢,可以顯著提高生產企業的經濟效益。

權利要求書

權利要求書
1.  復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將5-40份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入30-60份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將0.1-5份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液溫度調節控制在20-120℃的范圍內,攪拌0.2-12小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入1-10份離子交換劑,調節pH至2-14,并升溫至60-120℃,離子交換0.2-12小時;
(6)離心分離,得復合微生物活化腐殖酸,上述的份均指重量份數。

2.  如權利要求1所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的緩沖液為:甘氨酸-鹽酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液、磷酸氫二鉀-磷酸二氫鉀緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、硼砂-鹽酸緩沖液、氯化鉀-鹽酸緩沖液中的至少一種,所述的緩沖液的濃度為0.01mol/L-1mol/L。

3.  如權利要求2所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的緩沖液的濃度為0.05mol/L-0.5mol/L。

4.  如權利要求1所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的復合微生物菌液中的菌種為Bacillussubtilis,bacilluspumilus,bacilluscereus,arthrobactersp.,pseudomonascepacia,Streptomycesviridosporus,Streptomycessetonii,Streptomycesbadius,Streptomycesflavovirens,actinosynnemasp.,nocardiasp.擔子菌phanerochaetechrysosporium,trametesversicolor,polyporusversicolor,poriaplacenta,coriolusversicolor,絲狀真菌paecilomycestli,penicillium,mucor,aspergillusterricola,aspergillusochaceus,cunninghamellasp.,pleurotusflorida,pleurotusostreatus,pleurotuscaju,pleurotuseryngii,trichodermaviride,strophariasp.,canadidasp.中的至少兩種。

5.  如權利要求4所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述復合酶制劑為酸性α-淀粉酶、酸性β-淀粉酶、酸性纖維素酶、酸性半纖維素酶、酸性木聚糖酶、酸性漆酶、酸性阿魏酸酯酶、酸性羧酸酯酶、酸性糊精水解酶、酸性幾丁質酶、酸性殼聚糖酶、酸性果膠酶、酸性脂肪酶、酸性胃蛋白酶、酸性胰蛋白酶、酸性木瓜蛋白酶、酸性彈性蛋白酶、酸性核酸外切酶、酸性核酸內切酶、堿性α-淀粉酶、堿性β-淀粉酶、堿性纖維素酶、堿性半纖維素酶、堿性木聚糖酶、堿性漆酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性羧酸酯酶、糊精水解酶、堿性幾丁質酶、堿性殼聚糖酶、堿性果膠酶、堿性脂肪酶、堿性磷酸酶、堿性胃蛋白酶、堿性胰蛋白酶、堿性木瓜蛋白酶、堿性彈性蛋白酶、堿性核酸外切酶、堿性核酸內切酶中的至少兩種。

6.  如權利要求4所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的步驟(4)中將混合溶液升溫至30-90℃,攪拌1-12小時。

7.  如權利要求4所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的離子交換劑為十二烷基磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、乙二胺四乙酸鈉、肌醇六磷酸鈉、硼氫化鈉、對甲苯磺酸鈉、酒石酸鉀鈉、苯酚鈉、甲酸鈉、乙酸鈉、丙酸鈉、丙二酸鈉、草酸鈉、元明粉、亞硫酸鈉、硝酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、氯化鈉、碘化鈉、磷酸鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、硅酸鈉、次氯酸鈉、硫化鈉、甲酸鉀、乙酸鉀、氟硼酸鉀、草酸鉀、檸檬酸鉀、亞甲基二磺酸鉀、十二烷基苯磺酸鉀、硫酸鉀、亞硫酸鉀、氯化鉀、碘化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鉀、磷酸鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硝酸鉀、硫化鉀、十二烷基三甲基溴化銨、甲酸銨、乙酸銨、硫酸銨、亞硫酸銨、碳酸銨、碳酸氫銨、硝酸銨、氯化銨、磷酸一銨、磷酸二銨中的至少一種。

8.  如權利要求4所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的步驟(5)中,升溫至65-90℃,離子交換0.5-12小時。

9.  如權利要求1所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的離心機為碟片式離心機,離心轉速為3000-6000rpm。

10.  如權利要求4所述的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,其特征在于,所述的離心轉速為3500-5500rpm。

說明書

說明書復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝
技術領域
本發明屬于微生物應用技術領域,具體涉及一種復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝。
背景技術
褐煤屬于低階煤,含水量高、易風化、易自燃,難以洗選儲存,且熱效率低,因此其工業應用價值較低,開采和利用均受到很大限制。我國褐煤儲量超過1千億噸,占煤炭儲量的近13%、主要分布在內蒙、云南和東北等地。腐殖酸是褐煤的主要成分,在褐煤中占主體地位,經動植物遺骸經微生物分解、轉化及地球億萬年地質變動而形成的一大類有機物。腐殖酸主要有碳、氫、氧、氮、硫幾種元素組成,含有羥基、羧基、醌基、羰基、甲氧基等多種功能性基團,呈弱酸性、陽離子交換性、螯合性、吸附性以及膠體特性。根據腐殖酸在水溶液中的溶解性可以將其分為三大類:黃腐酸(Fulvicacid,FA),可以溶于任何pH的水溶液;棕腐酸(Humicacid,HA),僅溶于堿性溶液而不溶于酸性;黑腐酸(Humin)不溶于任何pH的水。三者之間的主要差別在于分子量分布范圍,黑腐酸最大,棕腐酸次之,黃腐酸最小。非活化的褐煤腐殖酸中黑腐酸占絕對優勢,棕腐酸、黃腐酸占比很小,然而正是后兩者,尤其黃腐酸,在農業方面具有非常顯著的功效,如改良土壤、促進作物生長、提高作物抗旱/抗病能力、緩釋增效農藥、提高肥料養分利用率等。因此腐殖酸活化在其農業應用方面具有非常重要的社會和經濟效益。
褐煤腐殖酸分子由大量的芳香環,如苯環、稠苯環及其他雜環,各環之間由鍵橋相連,同時含有大量的羥基、羧基、羰基、酚羥基、酮基、磺酸基等功能性基團,具有較強的離子交換能力和吸附能力。目前褐煤腐殖酸活化通常采用化學法,包括苛性堿干法/濕法生產工藝、氨水/碳銨活化工藝、強酸氧化水解工藝、硫酸丙酮抽提工藝等,但上述方法均存在耗能巨大、污染嚴重、提取率低等問題(傳統苛化法用堿量達到15%-40%;溫度90-120℃,提取時間8-10小時;強酸氧化法用算量達到15%-40%;溫度85-95℃,提取時間4-8小時),導致其生產受環保、成本等因素難以產業化推廣。微生物可以通過自身分泌到細胞外的各種生物活性物質對褐煤腐殖酸進行降解,達到活化的目的,此過程也稱為褐煤的生物轉化,其作用機理主要由酶的分解作用、堿性代謝產物溶解、螯合型代謝產物溶解及表面活性劑促溶等幾大因素組成。基于此我們開發了一種利用復合微生物分解活化褐煤腐殖酸新工藝,在更為溫和的條件下對褐煤腐殖酸進行活化處理,顯著提升黃棕腐殖酸得率,并誘導微生物產生促進作物生長、抗病的功能因子,顯著提升所活化腐殖酸的肥效,節能減排,因此具有廣闊的市場前景。
發明內容
為了解決上述的技術問題,本發明提供了一種腐殖酸得率高,且生產成本低、廢水排放量少、生產條件溫和的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝。
本發明的復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將5-40份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入30-60份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將0.1-5份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至20-90℃,攪拌0.2-12小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入1-10份離子交換劑,調節pH至2-14,并升溫至60-120℃,離子交換0.2-12小時;
(6)離心分離,得復合微生物活化腐殖酸,上述的份均指重量份數。
上述的緩沖液為:甘氨酸-鹽酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液、磷酸氫二鉀-磷酸二氫鉀緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、硼砂-鹽酸緩沖液、氯化鉀-鹽酸緩沖液中的至少一種;
上述的緩沖液的濃度為0.01mol/L-1mol/L。
優選的,上述的緩沖液的濃度為0.05mol/L-0.5mol/L。
上述的復合微生物菌液中的菌種包括Bacillussubtilis,bacilluspumilus,bacilluscereus,arthrobactersp.,pseudomonascepacia,Streptomycesviridosporus,Streptomycessetonii,Streptomycesbadius,Streptomycesflavovirens,actinosynnemasp.,nocardiasp.擔子菌phanerochaetechrysosporium,trametesversicolor,polyporusversicolor,poriaplacenta,coriolusversicolor,絲狀真菌paecilomycestli,penicillium,mucor,aspergillusterricola,aspergillusochaceus,cunninghamellasp.,pleurotusflorida,pleurotusostreatus,pleurotuscaju,pleurotuseryngii,trichodermaviride,strophariasp.,canadidasp.中的至少兩種。
復合微生物菌液優選的為40-50份。
復合酶制劑為酸性α-淀粉酶、酸性β-淀粉酶、酸性纖維素酶、酸性半纖維素酶、酸性木聚糖酶、酸性漆酶、酸性阿魏酸酯酶、酸性羧酸酯酶、酸性糊精水解酶、酸性幾丁質酶、酸性殼聚糖酶、酸性果膠酶、酸性脂肪酶、酸性胃蛋白酶、酸性胰蛋白酶、酸性木瓜蛋白酶、酸性彈性蛋白酶、酸性核酸外切酶、酸性核酸內切酶、堿性α-淀粉酶、堿性β-淀粉酶、堿性纖維素酶、堿性半纖維素酶、堿性木聚糖酶、堿性漆酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性羧酸酯酶、糊精水解酶、堿性幾丁質酶、堿性殼聚糖酶、堿性果膠酶、堿性脂肪酶、堿性磷酸酶、堿性胃蛋白酶、堿性胰蛋白酶、堿性木瓜蛋白酶、堿性彈性蛋白酶、堿性核酸外切酶、堿性核酸內切酶中的至少兩種。
步驟(4)中將混合溶液升溫至30-90℃,攪拌1-12小時。
離子交換劑為十二烷基磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、乙二胺四乙酸鈉、肌醇六磷酸鈉、硼氫化鈉、對甲苯磺酸鈉、酒石酸鉀鈉、苯酚鈉、甲酸鈉、乙酸鈉、丙酸鈉、丙二酸鈉、草酸鈉、元明粉、亞硫酸鈉、硝酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、氯化鈉、碘化鈉、磷酸鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、硅酸鈉、次氯酸鈉、硫化鈉、甲酸鉀、乙酸鉀、氟硼酸鉀、草酸鉀、檸檬酸鉀、亞甲基二磺酸鉀、十二烷基苯磺酸鉀、硫酸鉀、亞硫酸鉀、氯化鉀、碘化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鉀、磷酸鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硝酸鉀、硫化鉀、十二烷基三甲基溴化銨、甲酸銨、乙酸銨、硫酸銨、亞硫酸銨、碳酸銨、碳酸氫銨、硝酸銨、氯化銨、磷酸一銨、磷酸二銨中的至少一種。
步驟(5)中,升溫至65-90℃,離子交換0.5-12小時;pH優選的調至3-13。
離心機為碟片式離心機,離心轉速為3000-6000rpm。
更優選的,離心轉速為3500-5500rpm。
本發明的有益效果在于,采用復合微生物分解活化腐殖酸,所采用菌種均為農用益生菌,在其分解活化腐殖酸時會分泌多種生物活性成分,顯著提升肥效,其活化腐殖酸效果遠優于傳統活化工藝;
本發明采用復合微生物分解活化腐殖酸,其溫度、pH、時間均低于傳統化學提取工藝,遠高于相同生產成本條件下的酸堿活化法,且具有明顯的成本優勢,可以顯著提高生產企業的經濟效益;
與大量使用強酸、強堿的工藝相比,本發明的方法所產生的廢水、廢棄排放量顯著降低,對周圍環境基本零污染,符合我國環保政策和可持續發展方針;
本發明所采用復合微生物分解活化腐殖酸,最終產品中含有超過30-50億/克的活性益生菌,可直接用于生產生物有機肥或液體生物肥,其效果遠優于僅采用普通益生菌劑或腐殖酸為原料的相應產品。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作更進一步的說明,以便本領域的技術人員更了解本發明,但并不因此限制本發明。
實施例1
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將24份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入45份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將1.2份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至45℃,攪拌2小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入6份離子交換劑,調節pH至9,并升溫至75℃,離子交換1.5小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為4500rpm,得復合微生物活化腐殖酸,如無特殊說明,本申請中的份均指重量份數。
緩沖液為:甘氨酸-鹽酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液按比例1:1復配而成,緩沖液的濃度為0.25mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為actinosynnemasp.,nocardiasp.、pleurotusflorida,pleurotusostreatus
actinosynnemasp.,nocardiasp.、pleurotusflorida,pleurotusostreatus的菌液重量比為2:1:1:1;
復合酶制劑為酸性α-淀粉酶、堿性漆酶、堿性果膠酶,
酸性α-淀粉酶、堿性漆酶、堿性果膠酶重量比是1:1:4。
離子交換劑為十二烷基磺酸鈉、苯酚鈉、十二烷基苯磺酸鉀,
十二烷基磺酸鈉、苯酚鈉、十二烷基苯磺酸鉀的重量比是5:1:4。
最終微生物活化腐殖酸得率為38.4%。這個得率通過HG/T3278-2011標準中的方法測得的。以下實施例中的提率均是采用此方法測得。
實施例2
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將20份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入36份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將1份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至35℃,攪拌2小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入3份離子交換劑,調節pH至8,并升溫至60℃,離子交換0.5小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為4000rpm,得復合微生物活化腐殖酸。
上述的緩沖液為:Tris-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液按1:1復配而成,緩沖液的濃度為0.08mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為pseudomonascepacia、polyporusversicolor、pleurotusflorida這三種菌種組成的復合菌液;
pseudomonascepacia、polyporusversicolor、pleurotusflorida的重量比為8:1:1;
上述的復合酶制劑為酸性幾丁質酶、酸性核酸外切酶、酸性殼聚糖酶,
酸性幾丁質酶、酸性核酸外切酶、酸性殼聚糖酶的重量比是5:3:2。
離子交換劑為十二烷基磺酸鈉、苯酚鈉、十二烷基苯磺酸鉀,
十二烷基磺酸鈉、苯酚鈉、十二烷基苯磺酸鉀的重量比是4:3:3。
最終微生物活化腐殖酸得率為41.3%。
實施例3
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將5份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入30份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將0.1份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至20℃,攪拌0.2小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入1份離子交換劑,調節pH至8,并升溫至60℃,離子交換0.2小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為3000rpm,得復合微生物活化腐殖酸。
上述的緩沖液為:Tris-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液按2:1比例復配而成,緩沖液的濃度為0.08mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為pseudomonascepacia、pleurotusostreatus、trichodermaviride、canadidasp.這四種菌種組成的復合菌液,
pseudomonascepacia、pleurotusostreatus、trichodermaviride、canadidasp.的重量比為5:3:2:2;
上述的復合酶制劑為堿性漆酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性木瓜蛋白酶,
堿性漆酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性木瓜蛋白酶的重量比是1:4:5。
離子交換劑為次氯酸鈉、碳酸氫鉀、磷酸一銨,
次氯酸鈉、碳酸氫鉀、磷酸一銨的重量比是2:2:6。
最終微生物活化腐殖酸得率為35.5%。
實施例4
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將40份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入60份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將5份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至60℃,攪拌6小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入10份離子交換劑,調節pH至10,并升溫至60℃,離子交換0.8小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為6000rpm,得復合微生物活化腐殖酸。
上述的緩沖液為:硼砂-鹽酸緩沖液、氯化鉀-鹽酸緩沖液按比例2:1復配而成,緩沖液的濃度為0.08mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為pseudomonascepacia、pleurotusostreatus、trichodermaviride、canadidasp.這四種菌種組成的復合菌液,pseudomonascepacia、pleurotusostreatus、trichodermaviride、canadidasp.的重量比為7:2:1:2;
上述的復合酶制劑為堿性木聚糖酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性彈性蛋白酶,
堿性木聚糖酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性彈性蛋白酶的重量比是5:4:1;
離子交換劑為次碘化鈉、磷酸鈉、碳酸氫銨、硫酸銨,
次碘化鈉、磷酸鈉、碳酸氫銨、硫酸銨的重量比是1:3:4:2;
最終微生物活化腐殖酸得率為45.7%。
實施例5
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將35份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入55份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將4份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至55℃,攪拌4小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入8份離子交換劑,調節pH至10,并升溫至80℃,離子交換2小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為5500rpm,得復合微生物活化腐殖酸。
上述的緩沖液為:Tris-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液按比例2:1復配而成,緩沖液的濃度為0.08mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為pseudomonascepacia、pleurotusostreatus、trichodermaviride、Streptomycesflavovirens這四種菌種組成的復合菌液,
pseudomonascepacia、pleurotusostreatus、trichodermaviride、Streptomycesflavovirens的重量比為7:2:1:3;
上述的復合酶制劑為堿性漆酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性木瓜蛋白酶,
堿性漆酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性木瓜蛋白酶的重量比例關系是2:3:5;
離子交換劑為次氯酸鈉、碳酸氫鉀、磷酸一銨,
次氯酸鈉、碳酸氫鉀、磷酸一銨的重量比是1:4:5;
最終微生物活化腐殖酸得率為38.1%。
實施例6
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將20份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入40份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將1.5份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至42℃,攪拌2小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入5份離子交換劑,調節pH至9,并升溫至75℃,離子交換1.5小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為4000rpm,得復合微生物活化腐殖酸,如無特殊說明,本申請中的份均指重量份數。
緩沖液為:甘氨酸-鹽酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液按比例3:1復配而成,緩沖液的濃度為0.25mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為polyporusversicolor、coriolusversicolor、pleurotusflorida,trichodermaviride
polyporusversicolor、coriolusversicolor、pleurotusflorida,trichodermaviride的重量比為4:4:2:1;
復合酶制劑為堿性α-淀粉酶、堿性纖維素酶、堿性果膠酶,
堿性α-淀粉酶、堿性纖維素酶、堿性果膠酶的重量比是6:3:1;
離子交換劑為十二烷基磺酸鈉、苯酚鈉、十二烷基苯磺酸鉀,
十二烷基磺酸鈉、苯酚鈉、十二烷基苯磺酸鉀的重量比是4:3:3。
最終微生物活化腐殖酸得率為39.6%。
實施例7
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將25份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入45份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將1.5份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至47℃,攪拌1.5小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入5份離子交換劑,調節pH至10.5,并升溫至80℃,離子交換1.5小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為4000rpm,得復合微生物活化腐殖酸,如無特殊說明,本申請中的份均指重量份數。
緩沖液為:磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、硼砂-鹽酸緩沖液按比例1:1復配而成,緩沖液的濃度為0.5mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為Streptomycesviridosporu,Streptomycesflavovirens,pleurotusflorida;
Streptomycesviridosporu,Streptomycesflavovirens,pleurotusflorida的重量比為5:3:2;
復合酶制劑為堿性α-淀粉酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性磷酸酶,
堿性α-淀粉酶、堿性阿魏酸酯酶、堿性磷酸酶的重量比是4:4:2;
離子交換劑為十二烷基磺酸鈉、硫酸鉀、硝酸銨,
十二烷基磺酸鈉、硫酸鉀、硝酸銨的重量比是6:2:2。
最終微生物活化腐殖酸得率為41.7%。
實施例8
復合微生物分解活化褐煤腐殖酸的工藝,包括下述的步驟:
(1)將33份褐煤加入到緩沖液中;
(2)向緩沖液中加入42份復合微生物菌液,得提取體系;
(3)將1.0份復合酶制劑加入到步驟(2)中的提取體系中,得混合溶液;
(4)將混合溶液升溫至40℃,攪拌2.0小時;
(5)在步驟(4)中的混合溶液中加入5份離子交換劑,調節pH至8.5,并升溫至75℃,離子交換2小時;
(6)采用碟片式離心機離心分離,離心轉速為4000rpm,得復合微生物活化腐殖酸,如無特殊說明,本申請中的份均指重量份數。
緩沖液為:磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、甘氨酸-鹽酸緩沖液按比例1:1復配而成,緩沖液的濃度為0.3mol/L。
復合微生物菌液中的菌種為Streptomycessetonii,pseudomonascepacia,trichodermaviride,Streptomycessetonii,pseudomonascepacia,trichodermaviride的重量比為4:4:2;
復合酶制劑為堿性半纖維素酶、堿性幾丁質酶、堿性彈性蛋白酶,
堿性半纖維素酶、堿性幾丁質酶、堿性彈性蛋白酶的重量比是5:3:2;
離子交換劑為碳酸氫鈉、檸檬酸鉀、草酸鉀、氯化鉀,
碳酸氫鈉、檸檬酸鉀、草酸鉀、氯化鉀的重量比是4:4:2。
最終微生物活化腐殖酸得率為43.8%。

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復合 微生物 分解 活化 褐煤 腐殖 工藝
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