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一種小鼠灌注固定裝置.pdf

摘要
申請專利號:

CN201820899544.X

申請日:

2018.06.11

公開號:

CN208989232U

公開日:

2019.06.18

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權
IPC分類號: A61D3/00; A61D7/00 主分類號: A61D3/00; A61D7/00
申請人: 新鄉醫學院
發明人: 林俊堂; 喬梁; 宋瑩; 楊記超; 劉彥禮; 管麗紅; 李小英; 楊慈清; 仝曼; 李高舉; 李巖巖
地址: 453003 河南省新鄉市紅旗區金穗大道601號
優先權:
專利代理機構: 廣州駿思知識產權代理有限公司 44425 代理人: 潘雯瑛
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201820899544.X

授權公告號:

法律狀態公告日:

2019.06.18

法律狀態類型:

授權

摘要

本實用新型公開了一種小鼠灌注固定裝置,其包括:一固定裝置和一輸液裝置;所述的固定裝置為有機玻璃制成的透明長方狀盒體,并設有操作臺、器械盒和收集盒;所述的輸液裝置設有輸液瓶、輸液泵、輸液管和輸液針。本實用新型所述的小鼠灌注固定裝置,集操作臺、器械盒和廢液收集盒為一體,具有功能多樣、安全、高效、便捷等優點。

權利要求書

1.一種小鼠灌注固定裝置,其特征在于:包括一固定裝置和一輸液裝置;所述的固定裝置為有機玻璃制成的透明長方狀盒體,并設有操作臺、器械盒和收集盒;所述的輸液裝置設有輸液瓶、輸液泵、轉換閥、輸液管和輸液針。

2.根據權利要求1所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述的操作臺和器械盒并排設置,并置放在所述收集盒的頂部;所述的操作臺設有收集孔、固定孔、固定繩和固定扣,所述收集孔與所述收集盒相連通,所述固定繩纏繞安裝在所述固定孔上,所述固定扣安裝在所述固定繩上;所述的收集盒設有進水孔、出水孔以及兩個密封塞,所述兩個密封塞分別過盈配合安裝在所述進水孔、出水孔中。

3.根據權利要求2所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述的操作臺與器械盒均呈凹字形,且兩者之間通過一側壁相隔,所述的側壁上設有卡槽;所述的輸液管可拆卸地安裝在所述的卡槽上。

4.根據權利要求2所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述收集孔、固定孔均設置在所述操作臺的底側,并與所述收集盒相連通;所述進水孔位于所述收集盒一端的上表面,所述出水孔位于所述收集盒另一端的側面。

5.根據權利要求4所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述的操作臺設有兩組收集孔、四組固定孔、四組固定繩和四組固定扣;每組固定孔均設有兩個以上的固定孔,每組固定孔分別安裝有一組固定繩和一組固定扣;所述四組固定孔的分布位置分別與小鼠四肢的展開位置相對應,所述兩組收集孔的位置分別位于小鼠軀干固定位置的兩側。

6.根據權利要求2所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述的操作臺包括并排設置的第一操作臺和第二操作臺,所述的器械盒包括并排設置的第一器械盒、第二器械盒和第三器械盒。

7.根據權利要求6所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述的第一操作臺與第一器械盒通過第一側壁相隔并排設置,所述的第二操作臺與第三器械盒通過第二側壁相隔并排設置;所述的第一側壁上設有第一卡槽,所述的第二側壁上設有第二卡槽。

8.根據權利要求1所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述輸液管的一端安裝有與之相連通的輸液針,另一端通過所述輸液泵、轉換閥與所述輸液瓶相連通。

9.根據權利要求8所述的小鼠灌注固定裝置,其特征在于:所述的輸液裝置設有若干個輸液瓶,所述若干個輸液瓶的液體通過所述轉換閥輪流輸送至所述輸液管。

說明書

一種小鼠灌注固定裝置

技術領域

本實用新型屬于醫學技術領域,特別是涉及一種小鼠灌注固定裝置。

背景技術

組織化學技術被廣泛應用于生物醫藥的基礎和臨床研究的各個領域,通過相應的組織化學方法,在組織細胞內原位顯示其中的各種化學成分,并對其進行定性、定位和定量研究,從而分析生理或病理狀態下生物體的代謝、機能及形態變化規律。一般而言,組織樣品需要經過取材、固定、包埋和切片等步驟,才能進行相應的組織化學染色。為了更好地保持組織和細胞的固有形態結構、化學成分的分布和反應性等,組織樣品經過取材后要迅速固定,這樣能夠有效抑制自溶、阻止溶解、防止腐敗、減少損傷、硬化組織、改變折光率和增強染色等。因此,在制備切片的過程中,固定是非常重要的步驟。對于不同類型的組織應選擇合適的固定劑和固定方法,針對中樞神經系統和肝臟等器官的取材,通常選用多聚甲醛作為固定劑,配合灌注固定法,通過心血管途徑將固定劑迅速灌注到全身各組織,使細胞在原位被快速均勻固定,從而有效保存酶的活性及組織細胞的細微結構。同時,灌注沖洗還能排除血液中紅細胞內假過氧化物酶的干擾。

多聚甲醛是甲醛以聚合物形式存在的一種白色固體試劑,多作為固定劑替代甲醛使用,可以減少甲醛溶液中的穩定劑甲醇對酶反應的影響。由于多聚甲醛具有組織穿透力強、組織收縮小、固定均勻、能保存脂肪和類脂質及價格低廉等優點,常用于動物灌注固定及灌注后固定。雖然多聚甲醛是良好的固定劑,但它易揮發、有刺激性氣味、有腐蝕性、可致癌。如果在灌注過程中無法有效回收多聚甲醛,其在室內達到一定濃度時,會刺激實驗人員產生眼癢、流淚、咳嗽及頭痛等不適反應,并且長期接觸多聚甲醛對呼吸道有致敏作用(MSDS)。因此,如何在灌注固定過程中最大程度的回收多聚甲醛并進行后續處理,對于保護實驗人員人體健康和環境安全至關重要。

目前,小鼠灌注固定裝置多為手工自制,缺乏有效的操作、收集和儲存裝置。同時,灌注固定過程中無法有效回收多聚甲醛,灌注固定后的廢液通常直接倒入下水道,直接危害人體健康和環境安全。另外,實驗操作需要至少兩人同時配合,且每次只能灌注一只小鼠,整個過程耗時耗力。

實用新型內容

基于此,本實用新型的目的在于,提供一種簡易、安全、高效的小鼠灌注固定裝置。

本實用新型的技術方案如下:

一種小鼠灌注固定裝置,其包括一固定裝置和一輸液裝置;所述的固定裝置為有機玻璃制成的透明長方狀盒體,并設有操作臺、器械盒和收集盒;所述的輸液裝置設有輸液瓶、輸液泵、轉換閥、輸液管和輸液針。

進一步地,所述的操作臺和器械盒并排設置,并置放在所述收集盒的頂部;所述的操作臺設有收集孔、固定孔、固定繩和固定扣,所述收集孔與所述收集盒相連通,所述固定繩纏繞安裝在所述固定孔上,所述固定扣安裝在所述固定繩上;所述的收集盒設有進水孔、出水孔以及兩個密封塞,所述兩個密封塞分別過盈配合安裝在所述進水孔、出水孔中。

進一步地,所述的操作臺與器械盒均呈凹字形,且兩者之間通過一側壁相隔,所述的側壁上設有卡槽;所述的輸液管可拆卸地安裝在所述的卡槽上。

進一步地,所述收集孔、固定孔均設置在所述操作臺的底側,并與所述收集盒相連通;所述進水孔位于所述收集盒一端的上表面,所述出水孔位于所述收集盒另一端的側面。

進一步地,所述的操作臺設有兩組收集孔、四組固定孔、四組固定繩和四組固定扣;每組固定孔均設有兩個以上的固定孔,每組固定孔分別安裝有一組固定繩和一組固定扣;所述四組固定孔的分布位置分別與小鼠四肢的展開位置相對應,所述兩組收集孔的位置分別位于小鼠軀干固定位置的兩側。

進一步地,所述的操作臺包括并排設置的第一操作臺和第二操作臺,所述的器械盒包括并排設置的第一器械盒、第二器械盒和第三器械盒。

進一步地,所述的第一操作臺與第一器械盒通過第一側壁相隔并排設置,所述的第二操作臺與第三器械盒通過第二側壁相隔并排設置;所述的第一側壁上設有第一卡槽,所述的第二側壁上設有第二卡槽。

進一步地,所述輸液管的一端安裝有與之相連通的輸液針,另一端通過所述輸液泵、轉換閥與所述輸液瓶相連通。

進一步地,所述的輸液裝置設有若干個輸液瓶,所述若干個輸液瓶的液體通過所述轉換閥輪流輸送至所述輸液管。

本實用新型所述的小鼠灌注固定裝置,集操作臺、器械盒和廢液收集盒為一體,具有功能多樣、安全、高效、便捷等優點。本小鼠灌注固定裝置只需放置在實驗平臺即可操作,也可放置在通風櫥等環境中操作,可移動性強,可滿足教學和科研的各種條件使用。灌注操作后的廢液,能夠快速收集至收集盒中,能有效避免多聚甲醛等固定劑的揮發,避免多聚甲醛等固定劑對實驗人員的身體和環境造成危害。通過并排設置兩個操作臺,能夠交替進行實驗小鼠的灌注固定,有效提高實驗效率。通過配置若干個輸液瓶,并與轉換閥、輸液泵配合使用,能夠有效減少灌注固定的時間和耗液量,從而有效提高灌注固定的效果。

附圖說明

圖1為本實用新型所述小鼠灌注固定裝置的固定裝置結構示意圖;

圖2為本實用新型所述小鼠灌注固定裝置的輸液裝置結構示意圖;

圖3為本實用新型所述小鼠灌注固定裝置的操作臺結構示意圖;

圖4為本實用新型所述小鼠固定灌注裝置的固定繩結構示意圖。

具體實施方式

實施例一:小鼠灌注固定裝置

如圖1至圖4所示,本實用新型所述的小鼠灌注固定裝置,包括一固定裝置和一輸液裝置。該固定裝置為一有機玻璃制成的透明長方狀盒體,其設有第一操作臺11、第二操作臺12、第一器械盒21、第二器械盒22、第三器械盒23和收集盒30。該輸液裝置設有第一輸液瓶41、第二輸液瓶42、轉換閥43、輸液泵44、輸液管45和輸液針46。

收集盒30位于長方狀盒體的底部,第一操作臺11、第二操作臺12、第一器械盒21、第二器械盒22、第三器械盒23均位于收集盒30的頂部,且均呈凹字形。第一器械盒21和第三器械盒23可用于存放手術器械,第二器械盒22可用于存放動脈夾。

收集盒30的一端上表面設有進水孔31,另一端側面設有出水孔32,進水孔31和出水孔32上分別過盈配合安裝有密封塞33,密封塞33為一彈性橡膠塞。

第一操作臺11和第二操作臺12橫向并排設置,第一器械盒21、第二器械盒22和第三器械盒23依次橫向并排設置。第一操作臺11和第一器械盒21縱向并排設置,兩者之間通過第一側壁13相隔;第二操作臺12和第三器械盒23縱向并排設置,兩者之間通過第二側壁14相隔。第一側壁13和第二側壁14上分別設有一個用于安裝輸液管45的卡槽15。

第一操作臺11和第二操作臺12各設有兩組收集孔51、四組固定孔52、四組固定繩53以及四組固定扣54。收集孔51和固定孔52分別設置在第一操作臺11和第二操作臺12的底側,并分別與收集盒30相連通。兩組收集孔51的位置分別位于小鼠軀干固定位置的兩側,四組固定孔52的分布位置分別與小鼠四肢的展開位置相對應。每組固定孔52均設有兩個固定孔,固定繩53纏繞安裝在同一組的兩個固定孔52上,固定扣54安裝在固定繩53上。

輸液管45的一端安裝有與之相連通的輸液針46,另一端通過轉換閥43、輸液泵44分別與第一輸液瓶41、第二輸液瓶42相連通,第一輸液瓶41、第二輸液瓶42的液體通過轉換閥43輪流輸送至輸液管45中。

實施例二:小鼠灌注固定方法

1、配制溶液

磷酸鹽緩沖液:先分別配制1mol/L的K2HPO4溶液和1mol/L的KH2PO4溶液,然后取80.2mL的K2HPO4溶液和19.8mL的KH2PO4溶液,混合均勻,得到0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液,pH=7.4,于4℃保存備用。

多聚甲醛溶液:稱取4g多聚甲醛,溶解于100mL 0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液中,于磁力攪拌器上攪拌加熱,滴加1mol/L的NaOH溶液至澄清,調整pH值至7.4,定性濾紙過濾,得到質量濃度為4%的多聚甲醛溶液,于4℃避光保存備用。

水合氯醛溶液:稱取4.3g水合氯醛,溶解于100mL 0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液中,攪拌均勻,得到質量濃度為4.3%的多聚甲醛溶液,于4℃避光保存備用。

2、麻醉

采用SPF級體重為20~30g的BALB/c小鼠作為采集體,雌雄不限。

取水合氯醛溶液,以0.01mL/g體重的劑量,對小鼠進行腹腔注射麻醉,2~3分鐘后夾捏小鼠后肢,如無反應,說明麻醉程度合適,如有肢體抽動反應,追加少許麻醉劑,以避免手術疼痛引起肌肉痙攣壓迫血管,影響灌注效果。

3、固定

取實施例一的小鼠灌注固定裝置,分別將磷酸鹽緩沖液、多聚甲醛溶液裝入實施例一所述的小鼠灌注固定裝置的第一輸液瓶41、第二輸液瓶42中,并將輸液管45安裝在第一卡槽15中。將手術器械、動脈夾等分別放置在第一器械盒21、第二器械盒22中。

將麻醉后的小鼠放置在第一操作臺11的兩組收集孔51中間,小鼠腹面朝上,分別將小鼠的前肢和后肢分別穿入四組固定繩53內,對應拉緊固定扣54,進而將小鼠的四肢固定在第一操作臺11上。然后,將小鼠的舌頭拉出,防止舌頭后縮阻塞呼吸道。

4、穿刺

從小鼠的后肢中線剪開腹部皮膚,分離皮下組織至兩側腋前線,剪開肌肉層及膈肌,沿左右肋緣橫向剪開兩胸側壁,用止血鉗夾住劍突將胸壁翻向頭部,切勿橫斷。打開胸腔,剪開心包膜,暴露心臟,將輸液針46插入左心室中,用動脈夾固定心尖及輸液針46,操作時間控制在60秒以內,避免輸液針46刺破心室壁,避免動脈夾夾閉輸液針46的針尖。

5、灌注

開啟輸液泵44,設定輸液程序(20mL,5分鐘),先將磷酸鹽緩沖液注入心臟內,右心耳充盈后用眼科剪剪開,開放體循環通道。調整轉換閥43,將多聚甲醛溶液注入心臟,設定輸液程序(20mL,5分鐘;30mL,15分鐘)。此時,小鼠出現強烈反應,尾巴向上翹起抖動。灌注固定的廢液通過位于小鼠身體兩側的收集孔51流入收集盒30內進行暫存。

當第一操作臺11的小鼠進行灌注固定后,可以在第二操作臺12進行第二只小鼠的灌注固定。通過兩個操作臺的交替灌注,可以有效提高灌注效率,節約實驗操作時間。

6、取樣

沿小鼠兩耳中線剪開頭部皮膚,在枕骨大孔后方剪斷頸椎,分離除去后頸部肌肉,用手術刀刀尖沿頭骨中縫劃開頭骨,注意避免損傷大腦,用尖鑷子從枕骨大孔處開始,逐步剔除顱骨,注意清理腦表面的腦膜和兩側的斷骨,用眼科剪于兩側剪斷視神經并探到顱底,可將整個腦組織取出。灌注固定成功的腦組織具有相當的硬度和彈性,呈白色,且無血色。

將完整取下的腦組織置于含有多聚甲醛溶液的離心管中,于4℃繼續固定4~6小時,然后將離心管內的多聚甲醛溶液置換成質量濃度為30%的蔗糖溶液,于4℃脫水至腦組織沉入離心管底部。最后,將脫水后的腦組織放入凍存管中,在液氮中迅速冰凍20秒以上,于-80℃保存。

7、清洗

待灌注固定結束后,打開收集盒30的出水孔32,將灌注固定后的廢液倒入貯液桶中進行回收處理,然后打開進水孔31,通入自來水清洗灌注固定裝置的內部和表面。

以上所述實施例僅表達了本實用新型的幾種實施方式,其描述較為具體和詳細,但并不能因此而理解為對實用新型專利范圍的限制。應當指出的是,對于本領域的普通技術人員來說,在不脫離本實用新型構思的前提下,還可以做出若干變形和改進,這些都屬于本實用新型的保護范圍。

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一種 小鼠 灌注 固定 裝置
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