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由純天然原料制備的具有梯度孔結構和性能的人工皮膚.pdf

摘要
申請專利號:

CN200910223206.X

申請日:

2009.11.20

公開號:

CN101716375B

公開日:

2014.10.22

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||專利申請權的轉移IPC(主分類):A61L 27/40變更事項:申請人變更前權利人:深圳蘭度生物材料有限公司變更后權利人:深圳齊康醫療器械有限公司變更事項:地址變更前權利人:518000 廣東省深圳市南山區科技園南區深圳清華大學研究院大樓C區306室變更后權利人:518000 廣東省深圳市光明新區招商局光明科技園B6棟2A登記生效日:20111220|||專利申請權的轉移IPC(主分類):A61L 27/40變更事項:申請人變更前權利人:佘振定變更后權利人:深圳蘭度生物材料有限公司變更事項:地址變更前權利人:518057 廣東省深圳市南山區高新技術產業園南區高新公寓2棟4單元601變更后權利人:518000 廣東省深圳市南山區科技園南區深圳清華大學研究院大樓C區306室登記生效日:20110921|||實質審查的生效IPC(主分類):A61L 27/40申請日:20091120|||公開
IPC分類號: A61L27/40; A61L27/60; A61L27/56; A61F2/10 主分類號: A61L27/40
申請人: 深圳齊康醫療器械有限公司
發明人: 佘振定; 譚榮偉; 王明波
地址: 518000 廣東省深圳市光明新區招商局光明科技園B6棟2A
優先權:
專利代理機構: 深圳市維邦知識產權事務所 44269 代理人: 王昌花
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法律狀態
申請(專利)號:

CN200910223206.X

授權公告號:

101716375B||||||||||||

法律狀態公告日:

2014.10.22|||2012.02.01|||2011.11.09|||2010.07.21|||2010.06.02

法律狀態類型:

授權|||專利申請權、專利權的轉移|||專利申請權、專利權的轉移|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明涉及一種由純天然原料制備的具有梯度孔結構和性能的人工皮膚及其制備方法,該人工皮膚分為表皮層和真皮層兩層,表皮層和真皮層同時具備結構和性能上的梯度性,厚度在0.5~1.5毫米之間,可根據需要調整厚度,表皮層是一層具備防水、透氣、保護真皮的薄膜,其結構比較致密,孔的尺寸小于5微米,表皮層具有可降解性,表皮層的降解周期在4~6月之間,同時還具備良好的彈性和延展性,人工皮膚的真皮層是由膠原蛋白和多糖仿生制備,真皮層呈海綿狀,多孔且相互貫通,孔的尺寸和分布從上到下成梯度分布,孔徑從20微米增加到300微米;真皮層從上到下的降解周期不同,也成梯度分布,從上到下降解速度加快,降解周期從4個月加快到2周,孔的尺寸和分布、以及降解的梯度性是靠成分變化和多層疊加加工工藝來控制的。

權利要求書

1: 一種人工皮膚,由表皮層和真皮層組成,其特征在于,其中表皮層是由薄膜構成,該薄膜是由纖維蛋白,或絲素蛋白,或膠原蛋白等蛋白中的一種與殼聚糖、葡聚糖、透明質酸等多糖中的一種仿生制備的,真皮層是由膠原蛋白和多糖制備的,膠原蛋白是由I型膠原蛋白或III型膠原蛋白中的一種或兩種的混合物,多糖為透明質酸、或殼聚糖、或海藻酸酸,或葡聚糖等中的一種或兩種。
2: 權利要求1所述的人工皮膚,其特征在于,表皮層制備方法如下: 多糖溶液和蛋白溶液的配制 多糖溶液的濃度為0.1%~20%的多糖溶液, 蛋白溶液的濃度為0.5%~50%的蛋白溶液, 配制方法: (1).多糖溶液,取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的多糖,得到多糖粘稠溶液, (2).配制蛋白溶液,取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的蛋白得到蛋白溶液, 將蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%,干燥,制成薄膜,
3: 權利要求1所述的人工皮膚,其特征在于,真皮層制備方法如下: 梯度多糖溶液和膠原蛋白溶液的配制 梯度多糖溶液的濃度為0.1%~20%的多糖溶液, 梯度膠原蛋白溶液的濃度為0.5%~50%的蛋白溶液, 配制方法: (1).多糖溶液,取取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的多糖,得到多糖粘稠溶液, (2).配制膠原蛋白溶液,取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的膠原蛋白得到蛋白溶液, 將蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%,制備成梯度溶液。
4: 權利要求1所述的人工皮膚,其特征在于,其中表皮層是絲素蛋白與殼聚糖制備的,真皮層是由膠原蛋白和透明質酸制備的。
5: 權利要求1所述的人工皮膚的制備方法,其特征在于,表皮層制備步驟具體如下: (1)、配置一定濃度的蛋白/多糖溶液,二者的濃度范圍分別在0.5%~50%和0.1%~20%之間;將蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%, (2)、在模板上噴涂蛋白/多糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的蛋白/多糖薄膜,該層薄膜比較致密,孔的尺寸小于5微米; (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。
6: 權利要求1所述的人工皮膚的制備方法,其特征在于,在表皮層上連續加工制備人工皮膚真皮層的步驟如下: (1)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、多糖的混合液,其中膠原蛋白的濃度為0.5%~30%,多糖的濃度為0.1%~10%,將蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%,若加入生長因子,生長因子的濃度范圍為1~20ug/ml, (2)將梯度混合液噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快,真皮層的厚度由涂覆和冷凍干燥次數決定的,可根據需要進行調整,即制備出梯度孔結構和梯度性能的人工皮膚,此制備工藝適合于小于或等于5層疊加層的該人工皮膚, (3)當上述步驟(2)中的梯度混合液噴涂大于五層后,后續的疊加層采用微小冰晶冷凍干燥法,即將梯度混合液冷凍,加工成微小冰晶,然后將小冰晶均勻的分布已通過溶液噴涂的制備出的5層以上的產品上,最后冷凍干燥,即得人工皮膚。
7: 權利要求1所述的人工皮膚的制備方法,其特征在于, 絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是: (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為4%和0.5%; (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米; (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化; 在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下: (1)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,混合液中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml; (2)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快;每種混合溶液可反復噴涂1~3次;噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米;人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm 2 h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。
8: 權利要求1所述的人工皮膚的制備方法,其特征在于, 絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是: (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為50%和20%, (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米, (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化,制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性。 在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下: (4)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,混合液中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml, (5)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快,每種混合溶液可反復噴涂1~3次,噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米,人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm 2 h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。
9: 權利要求1所述的人工皮膚的制備方法,其特征在于, 絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是: (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為0.5%和0.1%, (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米, (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化,制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性, 在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下: (4)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,其中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml, (5)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快,每種混合溶液可反復噴涂1~3次,噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米,人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm 2 h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。
10: 權利要求1所述的人工皮膚的制備方法,其特征在于, 絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是: (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為10%和5%, (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米, (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化,制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性, 在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下: (4)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,其中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml, (5)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠 原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快,每種混合溶液可反復噴涂1~3次,噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米,人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm 2 h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。

說明書


由純天然原料制備的具有梯度孔結構和性能的人工皮膚

    【技術領域】

    本發明屬于醫療器械領域。更確切地說,本發明涉及一種由純天然原料仿生制備的人工皮膚。

    技術背景

    皮膚被覆于人體表面,與外界環境直接接觸,不僅能使人體不受到污物或細菌的侵襲,也能保持人體內的水分不致逃逸。皮膚作為覆蓋和保護體表的重要組織器官,非常容易受到外界損傷和疾病等因素而造成缺損。當大面積的皮膚受到嚴重的燒傷或損害時,其危害可以是致命的,而且皮膚不能自修復,通常須將身體其他部位的表層皮膚移植到傷口上。

    由于沒有可替代的皮膚來源,治療上多采用自體皮膚移植,即醫生需要從病人身體的其它部位取下一塊完好的皮膚,重新植入創傷部位。盡管能治愈創面,但在取皮部位卻留下了新的創傷,常常導致疤痕增生,甚至因取皮過深,供皮區難以自愈,形成水皰,反復潰瘍,導致新的創傷。遇到大面積嚴重燒傷的病人,如果其正常皮膚所剩無幾,缺乏自體皮膚及時封閉創面的情況下,常常引起創面及全身嚴重的感染等一系列并發癥,有可能危及生命。

    為了修復、替代缺損的皮膚組織,各國科學家都致力于人造皮膚的研究,僅美國等少數國家掌握該項技術并實現了產業化。因此,開發新型的人工皮膚市場前景廣闊,意義重大。人的皮膚是由表皮、真皮和皮下組織組成的,表皮在皮膚的最外層。在外側是角質層,最里面的一層是基底層。基底層的基底細胞逐漸向表層推移和分化,遞變為表皮的各層細胞,最后變成角質層。角質層的細胞逐漸老化脫落。表皮細胞彼此聯接緊密,因此起到防御功能,抵抗外界的刺激,但也很容易受傷和感染。真皮主要由膠原纖維和彈性纖維組成。功能系保持肌膚的彈性和張力。其中尚有豐富的血管、淋巴管及毛發、皮脂腺、汗腺及肌肉。因此,從表皮到真皮,在結構上具備一定的梯度性,在功能上也有一定的梯度性。

    傳統的人工皮膚由聚氨酯、硅橡膠等化學合成原料制成。而本發明采用純天然原料仿生制備的具有梯度孔結構和性能的人工皮膚。

    發明內容:

    本發明涉及一種由純天然原料仿生制備的具有梯度孔結構和性能的人工皮膚。

    本發明的人工皮膚由表皮層和真皮層兩層組成,表皮層和真皮層具有梯度結構和性能上的梯度性,厚度在0.5~1.5毫米之間,可根據需要調整厚度。

    其中的表皮層,是由具備防水、透氣、保護真皮的薄膜構成,該薄膜是由纖維蛋白,或絲素蛋白,或膠原蛋白等蛋白中的一種與殼聚糖、葡聚糖、透明質酸等多糖中的一種制備的。

    表皮層中,

    表皮層的制備方法如下:

    多糖溶液和蛋白溶液的配制

    多糖溶液的濃度為0.1%~20%的多糖溶液,

    蛋白溶液的濃度為0.5%~50%的蛋白溶液。

    配制方法:

    (1).多糖溶液。取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的多糖,得到多糖粘稠溶液。

    (2).配制蛋白溶液。取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的蛋白得到蛋白溶液。

    將蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%。

    將蛋白溶液/多糖溶液混合,裝入模具中,減壓干燥,制成薄膜。

    其中所述蛋白選自:纖維蛋白,或絲素蛋白,或膠原蛋白等蛋白中的一種。

    所述多糖選自:殼聚糖、葡聚糖、透明質酸等多糖中的一種。

    本發明的人工皮膚的真皮層是由膠原蛋白和多糖制備的,真皮層呈海綿狀,多孔且相互貫通,孔的尺寸和分布從上到下(即從表皮層到真皮層)成梯度分布,孔徑從20微米增加到300微米,孔的尺寸和分布是靠成分變化和多層疊加加工工藝來控制的。

    本發明的真皮層使用的膠原蛋白是由I型膠原蛋白或III型膠原蛋白中地一種或兩種的混合物。多糖為透明質酸、或殼聚糖、或海藻酸酸,或葡聚糖等中的一種或兩種。

    真皮層制備方法如下:

    梯度多糖溶液和膠原蛋白溶液的配制

    梯度多糖溶液的濃度為0.1%~20%的多糖溶液,

    梯度膠原蛋白溶液的濃度為0.5%~50%的蛋白溶液。

    將膠原蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,膠原蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%。

    配制方法:

    (1).多糖溶液。取取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的多糖,得到多糖粘稠溶液,根據濃度梯度稀釋不同濃度。

    (2).配制膠原蛋白溶液。取一定量的去離子水或一定濃度的有機溶劑,溶解一定質量的膠原蛋白得到蛋白溶液,根據濃度梯度稀釋不同濃度。

    將蛋白溶液/多糖溶液混合制備成梯度溶液。

    本發明表皮層優選的制備步驟是:

    (1)、配置一定濃度的蛋白/多糖溶液,二者的濃度范圍分別在0.5%~50%和0.1%~20%之間。將蛋白溶液和多糖溶液制備成混合溶液,蛋白和多糖在混合溶液中的濃度范圍分別是0.1%~40%和0.1%-20%。

    (2)、在模板上噴涂蛋白/多糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的蛋白/多糖薄膜,該層薄膜比較致密,孔的尺寸小于5微米。

    (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。制備得到的表皮層具有可降解性,表皮層的降解周期在1~2月,同時具備良好的彈性和延展性。

    優選的真皮層的制備步驟是:

    (1)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、多糖的混合液,其中膠原蛋白的濃度為0.5%~30%,多糖的濃度為0.1%~10%,若加入生長因子,生長因子的濃度范圍為1~20ug/ml。

    (2)將梯度混合液噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快。真皮層的厚度由涂覆和冷凍干燥次數決定的,可根據需要進行調整。即制備出梯度孔結構和梯度性能的人工皮膚,此制備工藝適合于小于或等于5層疊加層的該人工皮膚。

    (3)當上述步驟(2)中的梯度混合液噴涂大于五層后,后續的疊加層采用微小冰晶冷凍干燥法,即將梯度混合液冷凍,加工成微小冰晶,然后將小冰晶均勻的分布已通過溶液噴涂的制備出的5層以上的產品上,最后冷凍干燥,即得人工皮膚。

    其中優選的梯度溶液是梯度濃度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,其中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,透明質酸的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml。

    本發明最優選的制備方法在實施例中。

    本發明中,人工皮膚的真皮層加工條件溫和,適合加載生長因子混合加入,真皮層能起到緩釋的作用;也可作為組織工程皮膚的支架,在上面種植細胞后,可以移植到損傷的皮膚上。

    本發明中,人工皮膚的真皮層從上到下(即從表皮層到真皮層)的降解周期不同,也成梯度分布,從上到下降解速度加快,降解周期從1個月降到2周。即與皮膚傷口接觸的那一層降解速度最快,與表皮層靠近的那一層降解最慢。降解周期靠成份變化和多層疊加加工工藝來控制的。

    本發明的人工皮膚用于大鼠感染的皮膚瘡面的試驗證明該人工皮膚能夠減少瘢痕形成和抑制創面收縮,促進傷口愈合。

    本發明中,人工皮膚的透氣性,用水份的透汽率表示,大小為72~85g/cm2h;吸水率為150~250%;溶脹率50~56%;撕裂強度和拉伸強度分別為30~80kN/m和4.0~10MPa。

    本發明的人工皮膚與現有技術相比,具有防水性好,透氣性好,修復性強,排斥性小,具有緩釋功能,所有的原料為純天然材料,成本低廉,制備方法簡單,適合大規模生產。

    【具體實施方式】

    下面將結合實施例進一步說明本發明的人工皮膚及其制備方法,不作為本發明的限制。

    實施例1、

    絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是:

    (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為4%和0.5%。

    (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米。

    (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性。

    在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下:

    (4)制備具有濃度梯度的膠原蛋白和透明質酸的混合液,混合液中,膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml。

    (5)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快。每種混合溶液可反復噴涂1~3次。噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米。人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm2h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。

    實施例2、

    絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是:

    (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為50%和20%,

    (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米。

    (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性。

    在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下:

    (4)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,混合液中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml。

    (5)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快。每種混合溶液可反復噴涂1~3次。噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米。人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm2h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。

    實施例3、

    絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是:

    (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為0.5%和0.1%,

    (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米。

    (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性。

    在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下:

    (6)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,其中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml。

    (7)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快。每種混合溶液可反復噴涂1~3次。噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米。人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm2h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。

    實施例4、

    絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是:

    (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為10%和5%,

    (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米。

    (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性。

    在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下:

    (8)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,其中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml。

    (9)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快。每種混合溶液可反復噴涂1~3次。噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米。人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm2h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。

    實施例5、

    絲素蛋白/殼聚糖表皮層制備步驟是:

    (1)、配制絲素蛋白/殼聚糖混合溶液,二者在混合溶液中的濃度分別為10%和1%,

    (2)、在模板上噴涂絲素蛋白/殼聚糖溶液,經過梯度干燥,溫度梯度范圍為50~80℃,加壓,制備出均勻的絲素蛋白/殼聚糖薄膜,該層薄膜致密,孔的尺寸小于5微米。

    (3)、將上述薄膜通過在80~100℃條件下適當的施壓,然后迅速冷卻,反復幾次,最后用醇溶液固化。制備得到的表皮層具備可降解性,表皮層的降解周期在1~2月之間,同時還具備良好的彈性和延展性。

    在表面層上連續加工制備真皮層的步驟如下:

    (4)制備具有濃度梯度的膠原蛋白、透明質酸的混合液,其中膠原蛋白的濃度梯度為10%、8%、6%、4%、2%和1%,多糖的濃度梯度為2%、1.5%、1%、0.5%、0.3%和0.1%,若加入生長因子,生長因子濃度恒定為5ug/ml。

    (5)將梯度混合液(10%膠原蛋白+2%透明質酸、8%膠原蛋白+1.5%透明質酸、6%膠原蛋白+1%透明質酸、4%膠原蛋白+0.5%透明質酸、2%膠原蛋白+0.3%透明質酸、1%膠原蛋白+0.1%透明質酸)依次噴涂在表皮層上,然后迅速冷凍干燥,每次噴涂后,冷凍的速度逐步加快。每種混合溶液可反復噴涂1~3次。噴涂和冷凍干燥5次制備得到的人工皮膚的厚度為0.67毫米。人工皮膚的透氣性,用水分的透汽率表示,大小為75g/cm2h;吸水率為180%;溶脹率為55%;撕裂強度和拉伸強度58kN/m和7.0MPa。

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