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一種治療家蠶細菌病的蠶藥及其制備方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201310166840.0

申請日:

2013.05.09

公開號:

CN103263510B

公開日:

2014.10.29

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 專利權的轉移號牌文件類型代碼:1602號牌文件序號:101725643975IPC(主分類):A61K 36/752專利號:ZL2013101668400登記生效日:20151203變更事項:專利權人變更前權利人:廣西南寧英諾知識產權咨詢有限公司變更后權利人:平南縣科學技術情報研究所變更事項:地址變更前權利人:530012 廣西壯族自治區南寧市民族大道1號21時代大廈2116室變更后權利人:537300 廣西壯族自治區貴港市平南縣平南鎮城湖路中段|||專利權的轉移號牌文件類型代碼:1602號牌文件序號:101724809772IPC(主分類):A61K 36/752專利號:ZL2013101668400登記生效日:20151118變更事項:專利權人變更前權利人:廣西百通動物藥業有限公司變更后權利人:廣西南寧英諾知識產權咨詢有限公司變更事項:地址變更前權利人:546400 廣西壯族自治區河池市羅城仫佬族自治縣城東工業園區變更后權利人:530012 廣西壯族自治區南寧市民族大道1號21時代大廈2116室|||授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A61K 36/752申請日:20130509|||公開
IPC分類號: A61K36/752; A61P31/04 主分類號: A61K36/752
申請人: 廣西百通動物藥業有限公司
發明人: 蒙建道
地址: 546400 廣西壯族自治區河池市廣西羅城仫佬族自治縣城東工業園區
優先權:
專利代理機構: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113 代理人: 盧宏
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310166840.0

授權公告號:

||||||103263510B||||||

法律狀態公告日:

2015.12.23|||2015.12.09|||2014.10.29|||2013.09.25|||2013.08.28

法律狀態類型:

專利申請權、專利權的轉移|||專利申請權、專利權的轉移|||授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明公開了一種治療家蠶細菌病的蠶藥及其制備方法,所述的治療家蠶細菌病的蠶藥主要包括以下原料:敗醬草、金銀花、地錦草、黃岑、檸檬皮、穿心蓮,秦皮以及白頭翁等,其通過傳統中藥的制備工藝加工而成。本發明所提供的治療家蠶細菌病的蠶藥療效確切,具有良好抗菌活性,能有效抑制細菌感染,無毒副作用,為家蠶用治療細菌病的藥物提供了一種新的藥用選擇,其制備工藝簡單,適合工業化生產。

權利要求書

權利要求書
1.   一種治療家蠶細菌病的蠶藥,其特征在于,它是由包括以下重量份數的原料制備而成的:
敗醬草5?30份    金銀花8?25份    地錦草5?15份    
黃岑  5?20份     檸檬皮8?35份    穿心蓮 6?30份。

2.   根據權利要求1所述的治療家蠶細菌病的蠶藥,其特征在于,它是由包括以下重量份數的原料制備而成的:
敗醬草10?20份    金銀花10?15份    地錦草8?12份    
黃岑  8?15份      檸檬皮10?20份    穿心蓮15?25份。

3.   根據權利要求2所述的治療家蠶細菌病的蠶藥,其特征在于,它是由包括以下重量份數的原料制備而成的:
敗醬草15份    金銀花12份    地錦草10份    
黃岑  15份     檸檬皮 10份    穿心蓮18份。

4.   根據權利要求3所述的治療家蠶細菌病的蠶藥,其特征在于:還包括秦皮8份和白頭翁12份。

5.   如權利要求1~4中任一項所述的治療家蠶細菌病的蠶藥,其特征在于它的活性成分是通過以下方法制備而成的:
取全部6味原料藥材,按組分取料后,加入料液重量比為1:8~10的去離子水,提取90~150min,過濾,將藥渣再依法提取1~2次,合并濾液,將所得濾液真空蒸發濃縮至0.3~0.5倍體積后進行噴霧干燥,即得所述活性成分。

說明書

說明書一種治療家蠶細菌病的蠶藥及其制備方法
技術領域
本發明涉及獸用醫藥領域,具體涉及一種治療家蠶細菌病的蠶藥及其制備方法。
背景技術
[0002] 蠶在密集群體飼養條件下極易受病原微生物、寄生蟲或其他外界因素的影響而引起各種疾病。蠶病危及蠶繭產量和質量,一旦擴散蔓延,還會導致整個蠶業經營失敗。19世紀中葉,歐洲蠶業因微粒子病而遭受毀滅性打擊。法國L.巴斯德于年創立母蛾檢驗法,控制了該病的蔓延。此后,日本、中國等也相繼開展蠶病的科學研究。
家蠶細菌病是蠶業生產中常見的病害,一般在夏季高溫多濕季節發病較多,根據發病類型,可分為細菌性胃腸病、細菌性敗血病、卒倒病(細菌性中毒癥)三種,這些都是由于寄生細菌的迅速繁殖而引起的,病蠶死后尸體很快軟化腐爛,故有“軟化病”通稱。目前對該類疾病的控制通常采用抗菌藥物,基于抑菌、抗菌作用,能抑制細菌繁殖,這種方式能夠在短期內控制病情,但抑菌針對性強,不具有廣譜抑菌效果,且對刺激家蠶內部環境,打破了體內微生物平衡,容易使得菌株產生抗藥性。如上世紀70年代末以來,生產上常用氯霉素添食來治療蠶的細菌病,氯霉素對黑胸敗血病、青頭敗血病有顯著的治療效果,對靈菌敗血病的療效不明顯[周奇等.藥物對沙雷鐵氏菌的治療試驗[J],江蘇蠶業,1986(2):10?12];甲砜霉素、強力霉素,蠶用氯霉素及氯霉素粉(獸用)雖對蠶的黑胸敗血病有顯著的治療效果,而甲砜霉素、鏈霉素、強力霉素對靈菌敗血病治愈率并不高,鏈霉素對黑胸敗血病無治療效果[朱方容.家蠶細菌病治療藥物的研究[J],廣西蠶業,2003,40(2):4?9]。上述蠶用藥物作用單一,綜合治療蠶病效果差,病原體易產生抗藥性,殘留在動物體內,如氯霉素因會在動物體內殘留,2002年國家農業部發布《食品動物禁用的獸藥及其它化合物清單》中,氯霉素為禁用獸藥之一。此外,其生產工藝復雜,成本較高,生產使用過程中對環境產生污染。
中草藥是我國特有的中醫藥理論與實踐的產物,其可從整體上調理機體的各種功能,大多含有抑菌成分,可作用于細菌的不同部位和不同繁殖階段,并作用于細菌的多個代謝環節,且資源豐富,價格低廉,長期使用對機體的毒副作用小,低殘留或無殘留。而目前中草藥應用于細菌性引起的家蠶病的研究較少,多以抗病毒性為主,如:專利申請號為200610054277.8的“抗病毒性蠶病的蠶藥”中公開了一種抗病毒性蠶病的蠶藥,包括中藥黃連、黃柏、黃芪、大蒜、板蘭根、當歸、桑寄生、淫羊霍、麥冬、地龍、甘草共11味中藥。而專利申請號為200610054277.8的“一種治療蠶病的中藥”中公開了一種治療蠶病的中藥,包括以下重量份的藥物:木香、麥芽、谷芽、黃柏、山楂、神曲、陳皮、元胡、黨參、茯苓、貝母、生地,玄參以及甘草,其治療蠶病中痢疾桿菌及綠膿桿菌、大腸桿菌、金黃色球菌、炭疽桿菌等,但其缺乏系統的研究和臨床驗證。因此,開發出藥效明確、安全無毒副作用,且適于治療多種由細菌所引起的傳染病或感染性疾病的中草藥蠶藥,為家蠶用治療細菌病的藥物提供新的藥用選擇,對蠶業發展具有重要的意義。
發明內容
為了克服上述現有技術的缺點,本發明目的在于提供一種治療家蠶細菌病的蠶藥及其制備方法。
為了實現上述目的,本發明采用的技術方案是:
一種治療家蠶細菌病的蠶藥,包括以下重量份的組分配制而成:敗醬草5?30份,金銀花8?25份,地錦草5?15份,黃岑5?20份,檸檬皮8?35份,穿心蓮 6?30份。
本發明涉及的治療家蠶細菌病的蠶藥,它的優選方案是由包括如下重量份的原料制備而成的:敗醬草10?20份,金銀花10?15份,地錦草8?12份,黃岑8?15份,檸檬皮10?20份,穿心蓮15?25份。
本發明涉及的治療家蠶細菌病的蠶藥,它的進一步優選方案是由包括如下重量份的原料制備而成的:敗醬草15份,金銀花12份,地錦草10份,黃岑15份,檸檬皮10份,穿心蓮18份。此外,在原料中還可以加入秦皮8份和白頭翁12份,增加藥物協同抗菌能力,對于傳染性蠶病效果更好。
本發明可采用傳統水提法制備,取全部原料藥材,按上述組分取料,加入料液重量比為1:8~10的去離子水,提取90~150min,過濾,將藥渣再依法提取1~2次,合并濾液,將所得濾液真空蒸發濃縮至0.3~0.5倍體積后進行噴霧干燥,即得所述活性成分。
 
本發明中主要藥材的詳細情況如下:
敗醬草
本品為菊科植物山苦荬的全草或根,菊科苦荬菜屬,拉丁學名Ixeris denticulata,主要分布于中國北部、東部和南部。其性味辛、苦、微寒,有清熱解毒、消癰排膿、祛瘀止痛之功,習慣用于治療腸癰、肺癰、癰腫瘡毒和產后瘀阻腹痛等癥。通過臨床驗證,該品還有許多新的功用,如:治療皮膚瘙癢癥、慢性潰瘍性結腸炎、皮膚瘙癢癥等。
金銀花
本品為為忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或帶初開的花,其善清解血毒,用于各種熱性病,如身熱、發疹、發斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等,均效果顯著。
地錦草
本品為大戟科植物地錦 Euphorbia humifusa Willd. 或斑地錦 Euphorbia maculata L. 的干燥全草。臨床試驗表明,地錦草鮮汁、煎劑以及水煎濃縮乙醇提取液對于多種致病性球菌及桿菌有明顯抑菌作用.從地錦煎劑干粉中獲得乙醇提取物,進一步分離出地錦素,其抗菌作用更強.它對金黃色葡萄球菌、草綠色鏈球菌和溶血性鏈球菌、肺炎球菌、卡他球菌、白喉桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、傷寒桿菌、副傷寒桿菌、痢疾桿菌、變形桿菌、百日咳桿菌等在0.002~0.63mg/ml時有抑菌作用,0.005~1.25mg/ml時即呈殺菌作用。
黃岑
本品為唇形科植物黃芩 Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根,其具有清熱燥濕,涼血安胎,解毒功效,主治溫熱病、上呼吸道感染、肺熱咳嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎動不安、高血壓、癰腫癤瘡等癥。黃芩的臨床應用抗菌比黃連還好,而且不產生抗藥性。
檸檬皮
本品為蕓香科柑桔屬,拉丁學名Citrus Limon (L.) Burm. F.,具有利尿、抗炎癥、抗組織胺、增進食欲、刺激作用。
穿心蓮
本品為爵床科植物穿心蓮(Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees)的全草或葉,主產于廣東、福建等省,華中、華北、西北等地也有引種,具有清熱解毒、消炎、消腫止痛作用,主治細菌性痢疾、尿路感染、急性扁桃體炎、腸炎、咽喉炎、肺炎和流行性感冒等,外用可治療瘡癤腫毒、外傷感染等。
秦皮
本品為木犀科植物苦櫪白蠟樹、白蠟樹、尖葉白蠟樹或宿柱白蠟樹的干燥枝皮或干皮,拉丁學名Fraxinus rhynchophylla Hance.,具有清熱燥濕,清肝明目,收澀止痢功效。
白頭翁
本品為毛茛科植物,拉丁學名Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel.,原產中國,華北、江蘇、東北等地均有分布。其具有清熱解毒,涼血止痢,燥濕殺蟲的功效,對金黃色葡萄球菌綠膿桿菌有抑制作用。
本發明所提供的治療家蠶細菌病的蠶藥療效確切,具有良好抗菌活性,能有效抑制細菌感染,無毒副作用,為家蠶用治療細菌病的藥物提供了一種新的藥用選擇,其制備工藝簡單,適合工業化生產。
具體實施方式
為了使本發明實現的技術手段易于了解,下面結合具體實施例對本發明做進一步闡述。
實施例1
敗醬草1500g      金銀花1200g      地錦草1000g    
黃岑1500g       檸檬皮1000g      穿心蓮1800g
取全部6味原料藥材,按組分取料后,加入80L去離子水,提取120min,過濾,將藥渣再依法提取1次,合并濾液,將所得濾液真空蒸發濃縮至60L進行噴霧干燥,即得所述活性成分。
實施例2
敗醬草500g      金銀花800g      地錦草500g   
黃岑 500g      檸檬皮800g      穿心蓮600g
取全部6味原料藥材,按組分取料后,加入37L去離子水,提取120min,過濾,將藥渣再依法提取1次,合并濾液,將所得濾液真空蒸發濃縮至30L后進行噴霧干燥,即得所述活性成分。
實施例3
敗醬草3000g      金銀花2500g     地錦草1500g    
黃岑2000g      檸檬皮3500g     穿心蓮3000g
取全部6味原料藥材,按組分取料后,加入150L去離子水,提取120min,過濾,將藥渣再依法提取1次,合并濾液,將所得濾液真空蒸發濃縮至120L后進行噴霧干燥,即得所述活性成分。
實施例4
敗醬草1500g      金銀花1200g      地錦草1000g    黃岑1500g       
檸檬皮1000g      穿心蓮1800g      秦皮800g     白頭翁1200g
取全部8味原料藥材,按組分取料后,加入100L去離子水,提取120min,過濾,將藥渣再依法提取1次,合并濾液,將所得濾液真空蒸發濃縮至80L后進行噴霧干燥,即得所述活性成分。
實施例5
采用本發明各實施例藥物進行抗菌試驗
(1)培養致病菌
將黑胸敗血菌、蘇云金桿菌、靈菌敗血菌、鏈球菌、葡萄球菌、殺螟桿菌等菌種接種于LB液體培養基中,搖床擴大培養到對數生長期(37℃,130rmp),利用血球板計數法將各菌株用培養基配制成濃度為1.0×106cfu/mL的菌懸液。
(2)最小抑菌濃度(MIC)測定
取實施例1~4的適量活性成分藥物,加入蒸餾水溶解稀釋,分別配制成濃度為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.63、7.62、3.91mg/ml的藥液。
取滅菌試管10支,每管加入濃度為1.0×106cfu/mL的菌懸液培養基1mL。將實施例1~4各濃度藥液分別加入1mL,混合均勻,第10管不加藥物作為陰性對照,再依法制備兩組,第一組不加細菌稀釋液用于陰性對照,第二組用于重復實驗。將各試管置于恒溫培養箱中37℃培養24h,觀察結果,陽性對照細菌生長,呈均勻渾濁狀,陰性對照管無細菌生長呈澄清、透明狀。上述三組試管,若兩組試管內液體均為澄清、透明,則判定無菌生長,以無菌生長的最低稀釋度即為最小抑菌濃度。MIC小于7.82mg/mL為高度敏感,大于7.82mg/mL小于250mg/mL為中度敏感,大于250mg/mL為不敏感。
(3)最小殺菌濃度(MBC)測定
 將上述最小抑菌濃度測定中各試管培養物分別接種于LB營養瓊脂平板,置于恒溫培養箱中37℃培養48h,觀察結果。菌落數少于3個視為無菌生長,無菌生長的藥物最低濃度,即該藥物對該菌的最小殺菌濃度(MBC),結果如表1。
表1 各實施例藥液對6種病原菌的MIC(mg/mL)和MBC(mg/mL)

試驗表明,各實施例的藥物對黑胸敗血菌、蘇云金桿菌、靈菌敗血菌、鏈球菌、葡萄球菌、殺螟桿菌等有較強的抑菌效果。其中,實施例1藥物對蘇云金桿菌、靈菌敗血菌、鏈球菌、葡萄球菌、殺螟桿菌最小抑菌濃度均為7.62mg/ml,屬于高度敏感;實施例2的藥物對各菌種均為中度敏感;實施例3的藥物對蘇云金桿菌、靈菌敗血菌、鏈球菌、殺螟桿菌均為高度敏感;實施例4的藥物對黑胸敗血菌、蘇云金桿菌、靈菌敗血菌、鏈球菌、葡萄球菌、殺螟桿菌均顯示很好的抑菌作用和殺菌作用,均為高度敏感,且所需殺菌藥物濃度最低。
實施例6
采用本發明各實施例藥物進行臨床試驗
常規飼養的5齡蠶,起蠶后進行皮下針刺接種病原菌(攻毒),然后分別添食各實施例藥液和清水,連續添食3次,后隔12小時再連添2次,以后每天添食1次,以正常飼養區作對照,陰性對照區為攻毒后按正常喂食,每小區30頭,每處理3個重復小區。蠶期、蔟中調查記錄病死蠶數、上蔟后第8天調查死籠率,其各時期發生家蠶細菌病的死亡率見表2。
表2 各實施例藥物對家蠶細菌病的治療效果

試驗結果表明,各實施例藥物均對家蠶細菌病有顯著的治療效果。陰性對照區最先出現病蠶,14d后死亡率均達到50%左右,實施例1和實施例4藥物對黑胸敗血菌引起細菌性敗血病、葡萄球菌引起細菌性胃腸病均有顯著的效果,14d后累計的死亡率低于5%;實施例2和實施例3藥物對家蠶細菌病的治療效果較好,14d后累計死亡率低于10%。 

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一種 治療 家蠶 細菌 及其 制備 方法
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