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預知子活性組分的制備方法及其制劑的制備方法與其在制備抗腫瘤藥物中的應用.pdf

摘要
申請專利號:

CN201110425710.5

申請日:

2011.12.19

公開號:

CN103156891B

公開日:

2014.11.19

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A61K 36/185申請日:20111219|||公開
IPC分類號: A61K36/185; A61P35/00; A61K131/00(2006.01)N 主分類號: A61K36/185
申請人: 江西本草天工科技有限責任公司
發明人: 楊世林; 馮育林; 許瓊明; 陳蘭英; 李俊; 劉艷麗; 李志峰; 張武崗
地址: 330006 江西省南昌市東湖區陽明路56號
優先權:
專利代理機構: 代理人:
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201110425710.5

授權公告號:

||||||

法律狀態公告日:

2014.11.19|||2013.07.24|||2013.06.19

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明屬于醫藥技術領域,具體涉及一種預知子活性組分的制備方法及其制劑的制備方法以及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。制備方法為:將預知子藥材粉碎成粗粉,乙醇浸泡加熱回流提取2-3次,過濾,合并濾液;減壓濃縮,靜置,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ;上清液Ⅰ用堿調PH至8-14,60℃-100℃水解2-8個小時,水解后加酸調PH至3-7,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,干燥,即得預知子活性組分。該活性組分具有顯著的抗腫瘤活性,可以用來制備抗腫瘤或腫瘤輔助治療的藥物。

權利要求書

權利要求書預知子活性組分在制備抗腫瘤藥物中的應用,其特征在于:預知子活性組分可以用于制備抗腫瘤藥物或腫瘤輔助治療藥物。
預知子活性組分的制備方法,其特征在于:取預知子藥材,將其粉碎成粗粉,用5?95%乙醇浸泡0.5?2h,6?12倍量加熱回流提取1?3次,每次1?3h,過濾,合并濾液;上述濾液于50?70℃減壓濃縮至0.2?1.0g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ;上清液Ⅰ用堿調pH至8?14,60?100℃水解2?8個小時,水解后加酸調pH至3?7,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ,合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,干燥,即得預知子活性組分。
預知子活性組分在制備抗腫瘤藥物中的應用,其特征在于:預知子活性組分中皂苷類成分含量為50%以上;其中沉淀Ⅰ中總皂苷含量大于50%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量大于50%,合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ后的預知子活性組分中總皂苷含量大于50%。
預知子活性組分在制備抗腫瘤藥物中的應用,其特征在于:根據權利要求2所述的預知子沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ由于主成分基本相同,單獨使用或合并使用都可以用于制備抗腫瘤藥物或腫瘤輔助治療藥物。
根據權利要求2所述的預知子活性組分的制備方法,其特征在于:所述的堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀;所述的酸包括鹽酸、硫酸。
權利要求123所述預知子活性組分制成的制劑,其特征在于:該預知子活性組分與藥物輔料配制成藥劑學上的各種制劑。
根據權利要求23所述的預知子抗腫瘤活性組分,其特征在于:該提取物可以制成臨床上或藥學上接受的片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、注射劑、口服液體制劑、栓劑、軟膠囊劑、分散片、滴丸劑及皮下給藥制劑。

說明書

說明書預知子活性組分的制備方法及其制劑的制備方法與其在制備抗腫瘤藥物中的應用
技術領域
本發明屬于醫藥技術領域,具體涉及一種預知子活性組分的制備方法及其制劑的制備方法與其在制備抗腫瘤藥物中的應用,該活性組分具有顯著的抗腫瘤活性,可以用來制備抗腫瘤藥物或腫瘤輔助治療藥物。 
背景技術
預知子為木通科植物木通[Akebia quinata(Thunb.) Decne.]、三葉木通[Akebia trifoliate(Thunb.) Koidz.]或白木通[Akebia trifoliate (Thunb.)Koidz. var. australis (Diels) Rehd.]的干燥近成熟果實。味苦,寒。歸肝、膽、胃、膀胱經。用于舒肝理氣、活血止痛、利尿、散結。用于脘脅脹痛、經閉痛經、小便不利、痰核痞塊。文獻報道:皂苷類成分是預知子中的主要成分,具有保肝、止痙、止痛、抗真菌、殺蟲等多種藥理活性,這些作用與預知子的臨床療效具有相關性。另外經過反復研究,預知子中的某幾類皂苷具有抗腫瘤的活性,經過系統研究,準備開發以該活性組分為主要成分的抗腫瘤藥物。 
發明內容
本發明的目的在于提供一種預知子提取物,本發明另一個目的在于提供一種預知子提取物的制備方法及該提取物在抗腫瘤領域的應用。 
本發明所述的預知子活性成分是通過如下技術方案實現的: 
取預知子藥材,將其粉碎成粗粉,用5?95%乙醇浸泡0.5?2h,6?12倍量加熱回流提取1?3次,每次1?3h,過濾,合并濾液;上述濾液于50?70℃減壓濃縮至0.2?1.0g生藥材/mL,靜止,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ;上清液Ⅰ用氫氧化鈉調PH至8?14,60?100℃水解2?8個小時,水解后加鹽酸調PH至3?7,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;合并沉淀Ⅰ,沉淀Ⅱ,干燥,即得預知子活性組分。
經過本工藝提取純化可將預知子抗腫瘤活性組分中皂苷類成分含量大于50%;經HPLC法測定沉淀Ⅰ中的主要皂苷為三萜皂苷(3?O?β?D?吡喃葡萄糖基?(1→3)?α?L?吡喃鼠李糖基?(1→2)?α?L?吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷、saponins B、saponins PD和saponins A)的量占了預知子中總皂苷量的90%以上,具抗腫瘤活性,而上清液Ⅰ抗腫瘤活性不明顯,但經堿水解后,獲得沉淀Ⅱ,通過HPLC法測定其主要成分與沉淀Ⅰ相同,且有抗腫瘤活性。 
在最初的制備工藝中,將上清液Ⅱ經大孔吸附樹脂柱吸附,上樣后依次用水、40%乙醇70?90%乙醇洗脫,收集70?90%乙醇洗脫液,濃縮,干燥,得提取物Ⅲ。研究發現,沉淀Ⅰ、沉淀Ⅱ及提取物Ⅲ的組分基本相同(主要含有3?O?β?D?吡喃葡萄糖基?(1→3)?α?L?吡喃鼠李糖基?(1→2)?α?L?吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷、saponins B、saponins PD和saponins A),且三部分組分中總皂苷的含量均大于50%。然而,沉淀Ⅰ的得率為2?8%,沉淀Ⅱ的得率為2?5%,提取物Ⅲ的得率為0.1?0.3%,從節約資源和經濟效益方面考慮,大孔樹脂這部分可以不做考慮,實際中合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ;即得預知子活性組分。本發明中沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,單獨使用或合并使用(優選合并使用)都可以用于制備抗腫瘤或用于腫瘤輔助治療的藥物,該活性組分可以作為活性成分與藥物載體配制成藥劑學上的各種制劑,預知子抗腫瘤活性組分在制劑中的分散狀態可以是液體,也可以是固體,該制劑的給藥途徑可以是口服、注射和局部給藥。 
本發明中用紫外/可見分光光度法測定皂苷類成分含量:
1、齊墩果酸對照品溶液的制備
精密稱取齊墩果酸對照品5mg,轉移至50mL容量瓶中,用甲醇溶解,定容,配成0.1mg/mL的標準品溶液,冷藏保存備用。
2、齊墩果酸最大吸收波長的確定 
精密吸取對照品溶液和待測樣品溶液1ml,各2份(一份做空白,一份做顯色),加入已標號的干燥的具塞試管中,于60℃真空干燥箱中揮干,空白組加入5ml的甲醇,顯色組加入5ml的高氯酸,搖勻,顯色組于70℃水浴中反應15min,并時時振搖,反應完全后立即置冰水浴中冷卻15min,隨行試劑為空白,于島津UV?2550紫外分光光度計,在200~700nm波長范圍內進行掃描。結果供試品溶液與對照品溶液在310nm波長處有最大吸收,故確定測定波長為310nm。
3、標準曲線的繪制 
精密移取對照品溶液0.3,0.6,0.9,1.2,1.5,1.8 mL各2份(一份做空白,一份做顯色),轉移至10mL的具塞試管中,于60℃真空干燥箱中揮干,空白組加入5ml的甲醇,顯色組加入5ml的高氯酸,搖勻,顯色組于70℃水浴中反應15min,并時時振搖,反應完全后立即置冰水浴中冷卻15min,隨行試劑為空白,于島津UV?2550紫外分光光度計,在200~500nm波長掃描,在310nm波長處測定吸收度。以吸收度(A)為縱坐標, 齊墩果酸對照品濃度(C)為橫坐標,繪制標準曲線,以吸收度A對濃度C作最小二乘法回歸,得標準曲線方程為:A=0.022C+0.045, R2=0.9996(n=4),線性范圍為7.0~34.3 mg/mL,線性范圍內質量濃度與吸收度值的線性關系良好。
4、樣品中皂苷類成分含量測定方法 
取預知子藥材適量,粉碎,稱取藥材34.90g,用10倍量70%乙醇(即350ml),提取2次,每次1.5小時,所得溶液用中速濾紙過濾,濃縮至100ml以下,轉移至100ml的容量瓶,定容至刻度,即得0.349g/ml的預知子提取物;移取預知子提取液1ml,轉移至250ml的容量瓶中,定容至刻度,即得1.396mg/ml的預知子供試品溶液。精密吸取供試品溶液1ml,2份(一份做空白,一份做顯色),加入標號的干燥的具塞試管中,于60℃真空干燥箱中揮干,空白組加入5ml的甲醇,顯色組加入5ml的高氯酸,搖勻,顯色組于70℃水浴中反應15min,并時時振搖,反應完全后立即置冰水浴中冷卻15min,隨行試劑為空白,于島津UV?2550紫外分光光度計,在200~500nm波長掃描,在310nm處測定其吸收度。由標準曲線求得樣品中總皂苷濃度并計算含量。
本發明中用HPLC高效液相法對預知子活性組分進行成分分析:
1、供試品溶液的制備:取白頭翁抗腫瘤活性組分粉末約50mg,精密稱定,置于50mL容量瓶中,甲醇溶解并定容至刻度,濾過,取續濾液10mL作為供試品溶液。
2、色譜條件:色譜柱:COSMOSIL(4.6*250mm,5μm)C18ODS柱;流動相:乙腈?水?磷酸 = 45:55:0.1;檢測波長:203nm;柱溫:25℃;流速:1mL/min。進樣量20μL。 
經成分分析,預知子活性組分中的四個主要三萜皂苷為3?O?β?D?吡喃葡萄糖基?(1→3)?α?L?吡喃鼠李糖基?(1→2)?α?L?吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷、saponins B、saponins PD和saponins A(詳見附圖)。 
附圖說明
圖1:沉淀Ⅰ的HPLC色譜圖 
圖2:沉淀Ⅱ的HPLC色譜圖
圖3:沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ合并后的預知子活性組分的HPLC色譜圖
圖中1為3?O?β?D?吡喃葡萄糖基?(1→3)?α?L?吡喃鼠李糖基?(1→2)?α?L?吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷、2為saponins B、3為saponins PD、4為saponins A。
具體實施方式:
有關預知子抗腫瘤活性組分制備方法具體實施例:
實施例1:預知子活性組分的制備方法,其中:將預知子藥材粉碎成粗粉,用20%乙醇浸泡0.5h,6倍量加熱回流提取2次,每次1h,過濾,合并濾液;上述濾液于50℃減壓濃縮至0.5g生藥材/mL,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鈉調PH至9,70℃水解7h,水解后鹽酸調pH至4,離心,得沉淀Ⅱ和水解解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為5%,沉淀Ⅱ得率為3.4%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為54%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為74%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為60%。
實施例2:預知子活性組分的制備方法,其中:將預知子藥材粉碎成粗粉,用80%乙醇浸泡2h,12倍量加熱回流提取3次,每次3h,過濾,合并濾液;上述濾液于70℃減壓濃縮至1.0g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鈉調PH至10,80℃水解6h,水解后鹽酸調pH至5,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ,干燥,沉淀Ⅰ得率為5.4%,沉淀Ⅱ得率為3.8%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為66%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為85%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為74%。其余同實施例1。 
實施例3:預知子活性組分的制備方法,其中:將預知子藥材粉碎成粗粉,用50%乙醇浸泡1h,8倍量加熱回流提取2次,每次2h,過濾,合并濾液;上述濾液于60℃減壓濃縮至0.7g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鉀調PH至11,90℃水解5h,水解后鹽酸調pH至6,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ,干燥,沉淀Ⅰ得率為4.6%,沉淀Ⅱ得率為3.2%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為58%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為84%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為68%。其余同實施例1。  
實施例4:將預知子藥材粉碎成粗粉,用50%乙醇浸泡0.5h,12倍量加熱回流提取3次,每次1.5h,過濾,合并濾液。上述濾液于60℃減壓濃縮至0.5g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鈉調PH至12,90℃水解4h,水解后硫酸調pH至7,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為2.4%,沉淀Ⅱ得率為4.8%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為62%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為85%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為71%。其余同實施例1。  
 實施例5:將預知子藥材粉碎成粗粉,用95%乙醇浸泡2h,6倍量加熱回流提取2次,每次3h,過濾,合并濾液。上述濾液于50℃減壓濃縮至0.5g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鉀調PH至13,100℃水解3h,水解后鹽酸調pH至6,離心,得沉淀Ⅱ和水解解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為4.4%,沉淀Ⅱ得率為3.0%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為56%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為78%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為63%。其余同實施例1。   
實施例6:將預知子藥材粉碎成粗粉,10%乙醇浸泡1.5h,8倍量加熱回流提取1次,每次3h,過濾,合并濾液。上述濾液于50℃減壓濃縮至0.5g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鈉調PH至14,60℃水解8h,水解后硫酸調pH至6,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為5.0%,沉淀Ⅱ得率為3.0%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為66%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為85%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為74%。其余同實施例1。
實施例7:取預知子藥材,將其粉碎成粗粉,用20%乙醇浸泡0.5h,6倍量加熱回流提取1次,每次1h,過濾,合并濾液;上述濾液于50℃減壓濃縮至0.2g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鈉調PH至12,90℃水解6h,水解后鹽酸調pH至6,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為3.2%,沉淀Ⅱ得率為4.2%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為55%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為75%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為67%。其余同實施例1。 
實施例8:取預知子藥材,將其粉碎成粗粉,用80%乙醇浸泡2h,12倍量加熱回流提取3次,每次3h,過濾,合并濾液;上述濾液于70℃減壓濃縮至1.0g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鉀調PH至11,100℃水解4h,水解后鹽酸調pH至5,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為7.4%,沉淀Ⅱ得率為2.8%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為63%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為87%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為77%。其余同實施例1。 
實施例9:取預知子藥材,將其粉碎成粗粉,用60%乙醇浸泡1h,6?12倍量加熱回流提取2次,每次2h,過濾,合并濾液;上述濾液于60℃減壓濃縮至0.7g生藥材/mL,離心,得沉淀Ⅰ和上清液Ⅰ,上清液Ⅰ加氫氧化鈉調PH至13,70℃水解8h,水解后硫酸調pH至5,離心,得沉淀Ⅱ和水解后上清液Ⅱ;干燥,沉淀Ⅰ得率為5.4%,沉淀Ⅱ得率為3.8%;合并沉淀Ⅰ和沉淀Ⅱ,即得預知子活性組分。經外/可見分光光度法檢測,沉淀Ⅰ中總皂苷含量為60%,沉淀Ⅱ中總皂苷含量為81%,合并后的預知子活性組分中總皂苷的含量為74%。其余同實施例1。  
實施例10:預知子活性組分的制備方法,其中:預知子活性組分中皂苷類成分含量為50%以上。其余同實施例1。
實施例11:所述預知子活性組分制成的制劑,其中:該預知子活性組分與藥物輔料配制成藥劑學上的各種制劑。其余同實施例1、2、3、4、5、6、7、8、9及10中的任意一項。 
實施例12:所述預知子活性組分制成的制劑,其中:該預知子活性組分在制劑中的分散狀態可以是液體,也可以是固體。其余同實施例11。 
實施例13:所述的預知子活性組分,其中:該制劑的給藥途徑可以是口服、注射和局部給藥。其余同實施例11。 
實施例14、用本發明實施例1或實施例2或實施例3或實施例4或實施例5或實施例6或實施例7或實施例8或實施例9或實施例10的方法制備的預知子活性組分為原料,進行下列制劑制備: 
1、片劑制備
處方(50片):
成分                             重量(g)
本發明活性組分                    5.0
乳糖                              4.8
糊精                              9
微晶纖維素                        6
硬脂酸鎂                          0.2
按照常規片劑的操作方法,以上混合均勻,濕法制粒,最后加入硬脂酸鎂混合均勻壓制成每片500mg。
2、膠囊制備 
處方(90粒):
成分                             重量(g)
本發明活性組分                      8
乳糖                              5
糊精                              9
微晶纖維素                        5
按照常規片劑的操作方法,以上混合均勻,濕法制粒,灌裝成膠囊,每粒300mg。
3、巴布劑制備 
處方:
成分                             重量(g)
本發明活性組分                      2
聚丙烯酸酯                        18
月桂氮卓酮                        0.6
月桂酸                            1.8
丙二醇                            5.4
乙酸乙酯                          15
按照通常巴布劑的做作進行,將上述攪拌均勻,涂布于聚酯防粘層上,60度干燥2分鐘后,覆蓋聚氨基甲酯膜背襯層,切片即可。
4、粉針劑制備 
處方:
成分                             重量(g)
本發明活性組分                      0.05
鹽酸                              適量
甘露醇                             50
按照常規凍干粉針的操作進行,將本發明活性組分加適量注射用水溶解,加入甘露醇,定容至1000ml,調節PH值至4.0-5.5之間,除菌過濾,冷凍干燥即得。
5、水針劑的制備 
預知子抗腫瘤活性組分,溶于適量注射用水中,加入計量的注射用水溶性輔料,加0.1?0.5%的活性炭除去熱原,調節PH至6.0?7.5,經微孔濾膜超濾后,補充注射用水至規定量,灌裝于安瓿瓶中或輸液瓶中,熔封/軋蓋,經檢驗合格后,包裝即得。 
6、滴丸劑制備 
處方:
成分                             重量(g)
本發明活性組分                     0.1g
聚乙二醇6000                       10g
聚乙二醇4000                       20g
聚山梨酯80                          0.3g
乙醇                              1ml
制成                             1000丸  
制法:將本發明預知子抗腫瘤活性組分溶解于乙醇中,成為活性組分分散乙醇液,加入已熔融的聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚山梨酯80組成的基質中,充分攪拌至均勻,以二甲基硅油為冷卻劑,15℃下滴制成丸,擦丸,干燥,即得。
實施例15:用本發明實施例一中的方法制備的活性組分為原料,進行抗腫瘤活性組分藥效學研究: 
1、祛邪作用
1.1 對動物移植性腫瘤的抑制作用
采用7402肝癌裸鼠、MFC TCM23胃癌裸鼠和小鼠Lewis 肺癌模型,考察預知子抗腫瘤活性組分(YZS)的體內抗腫瘤作用。將分別接種7402肝癌、MFC TCM23胃癌和A549肺癌的裸鼠,隨機分為陽性對照組(環磷酰胺)、溶劑對照組(空白對照)、本發明預知子抗腫瘤活性組分(YZS)高、中、低三個劑量組(50,100,200mg/kg),連續灌胃給藥10天,末次給藥24小時后,處死動物,分離腋下腫瘤并稱重,計算腫瘤抑制率。按下式計算抑瘤率:抑瘤率(%)=[(空白對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/空白對照組平均瘤重]×100%。實驗結果如下:
(1)對7402肝癌的影響:實驗結果顯示YZS(50,100,200mg/kg)可顯著抑制裸鼠的瘤重,三個劑量抑制率分別為16.55、44.82和57.24%。結果見表1。
表1預知子抗腫瘤活性組分(YZS)對7402肝癌裸鼠的影響 

*P<0.05, **P<0.01 與空白對照組相比
(2)對MFC TCM23胃癌裸鼠的影響:YZS(50, 100, 200mg/kg)對裸鼠瘤重均有一定的抑制作用。結果見表2。
表2  預知子抗腫瘤活性組分(YZS)對MFC TCM23胃癌裸鼠的影響 

*P<0.05, **P<0.01 與空白對照組相比
(3)對A549肺癌的影響:實驗結果表明YZS(50,100,200mg/kg)對小鼠A549肺癌瘤重的抑制率分別為14.21%,33.73%和47.34%。結果見表3。
表3  預知子抗腫瘤活性組分(YZS)對小鼠A549肺癌的影響 

*P<0.05與空白對照組相比
2、扶正作用
2.1預知子抗腫瘤活性組分(YZS)對荷瘤動物免疫功能的影響
實驗結果提示預知子抗腫瘤活性組分(YZS)可明顯升高荷瘤小鼠的脾指數、脾淋巴細胞轉化率和NK細胞的殺傷活性。
建立H22荷瘤小鼠動物模型,預知子抗腫瘤活性組分(YZS)(50, 100, 200mg/kg)灌胃給藥,連續10天,末次給藥24小時后,將動物處死,取荷瘤小鼠胸腺和脾臟,稱重,分別計算胸腺指數: [胸腺重(mg)/體重(g)]×10,脾指數:[脾重(mg)/體重(g)]×10。 
(1)對小鼠胸腺指數和脾指數的影響 
與空白對照組相比,YZS(100,200 mg/kg)能明顯提高H22荷瘤小鼠的脾指數和胸腺指數,但環磷酰胺卻明顯降低脾指數和胸腺指數。提示,環磷酰胺可引起荷瘤小鼠脾和胸腺萎縮。初步說明YZS在發揮抗癌作用的同時可能提高小鼠的免疫力,結果見表4。
表4 預知子抗腫瘤活性組分(YZS)對H22荷瘤小鼠免疫系統的影響 (   ±s) 組別劑量 (mg×kg?1×d)脾指數胸腺指數YZS20010.56±1.78* 3.78±1.89* 1009.14±2.493.21±1.45 508.45±2.892.79±1.34環磷酰胺307.02±2.10*  1.02±0.49**空白對照組 8.70±2.892.56±1.23
*P<0.05,**P<0.01,與空白對照組相比
(2)對外周血細胞的影響
經計數分析,與空白對照組比較,環磷酰胺組小鼠白細胞總數、淋巴細胞和紅細胞顯著降低(p<0.01),YZS各組小鼠白細胞總數、淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞數與空白對照組相比,沒有顯著性差異(p>0.05)。提示,環磷酰胺明顯抑制小鼠免疫細胞,而YZS各組與環磷酰胺的作用明顯不同,對小鼠外周血細胞無抑制作用。結果見表5。
表5  預知子抗腫瘤活性組分(YZS)對荷瘤小鼠外周血免疫細胞的影響 

*P<0.05,與空白對照組相比
3、半數致死量
采用預知子抗腫瘤活性組分粉末,用蒸餾水配制成所需濃度的溶液,采用清潔級小鼠,由江西中醫學院實驗動物中心提供。急性毒性實驗結果表明預知子提取物口服時的半數致死量為4.90g/kg。
實施例16、采用實施例2或實施例3或實施例4或實施例5實施例6或實施例7或實施例8或實施例9或實施例10的方法制備的沉淀Ⅰ、沉淀Ⅱ以及預知子活性組分進行抗腫瘤藥效學研究,效果與實施例15類似。 
實施例17、采用實施例2或實施例3或實施例4或實施例5實施例6或實施例7或實施例8或實施例9或實施例10的方法制備的預知子活性組分與藥物輔料配制成藥劑學上的各種制劑。 
實施例18、采用實施例17所述的預知子活性組分制成的制劑,其中:預知子活性組分作為抗腫瘤活性組分在制劑中的分散狀態可以是液體,也可以是固體。 
實施例19、根據實施例2或實施例3或實施例4或實施例5實施例6或實施例7或實施例8或實施例9或實施例10的方法所述的任意一種預知子活性組分作為抗腫瘤活性組分,其中:預知子活性組分作為抗腫瘤組分可以用于制備抗腫瘤藥物或腫瘤輔助治療藥物。

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預知 活性 組分 制備 方法 及其 制劑 與其 腫瘤 藥物 中的 應用
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