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一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物及制備方法.pdf

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一種 京尼平 固定 活化 人工 皮膚 移植 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201310020874.9

申請日:

2013.01.18

公開號:

CN103083721B

公開日:

2014.12.10

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A61L 27/24申請日:20130118|||公開
IPC分類號: A61L27/24; A61L27/22; A61L27/20; A61L27/60 主分類號: A61L27/24
申請人: 南方醫科大學
發明人: 張琳; 張璐; 陳世萱
地址: 510515 廣東省廣州市白云區沙太南路1023號
優先權:
專利代理機構: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205 代理人: 方振昌
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310020874.9

授權公告號:

103083721B||||||

法律狀態公告日:

2014.12.10|||2013.06.12|||2013.05.08

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明公開了一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物及其制備方法,該人工皮膚移植物包括由皮膚移植物支架材料制成的水凝膠,及分布在水凝膠中的經京尼平交聯的活化素B;其制備方法:在皮膚移植物支架材料的水溶液中,依次加入京尼平水溶液、活化素B,混合均勻,然后成型加工,同時成膠,得產品。本發明產品無毒、無致熱原性,具有良好的生物相容性;可預防病原微生物入侵,降低感染發生率;可促進上皮組織快速愈合;減少創面體液滲出,并保持局部濕潤的微環境,可常規消毒和滅菌,便于儲存和運輸,應用于燒傷、外傷等皮膚創傷修復中。

權利要求書

權利要求書一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物,包括由皮膚移植物支架材料制成的水凝膠,及分布在水凝膠中的經京尼平交聯的活化素B。
根據權利要求1所述的人工皮膚移植物,其特征在于:皮膚移植物支架材料為殼聚糖、羧甲基殼聚糖、海藻酸鹽、明膠和膠原蛋白中的至少一種。
根據權利要求2所述的人工皮膚移植物,其特征在于:皮膚移植物支架材料為明膠和羧甲基殼聚糖。
權利要求1~3任一項所述的人工皮膚移植物的制備方法,包括以下步驟:在皮膚移植物支架材料的水溶液中,依次加入京尼平水溶液、活化素B,混合均勻,得混合液,然后成型加工,同時成膠,得京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物。
根據權利要求1所述的人工皮膚移植物的制備方法,其特征在于:混合液中皮膚移植物支架材料的濃度為5~20 g/mL。
根據權利要求5所述的人工皮膚移植物的制備方法,其特征在于:皮膚移植物支架材料為質量比為9:1的明膠、羧甲基殼聚糖的混合物。
根據權利要求1所述的人工皮膚移植物的制備方法,其特征在于:混合液中活化素B的濃度為1~20ng/mL。
根據權利要求1所述的人工皮膚移植物的制備方法,其特征在于:混合液中京尼平的濃度為0.01~0.5 g/mL。
根據權利要求1所述的人工皮膚移植物的制備方法,其特征在于:制備過程中各原料均為無菌原料。

說明書

說明書一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物及制備方法
技術領域
本發明涉及一種人工皮膚移植物及制備方法,尤其涉及一種京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物及制備方法。
背景技術
隨著社會的不斷進步和醫學的迅速發展,不少疾病已經得到有效的控制,但皮膚創傷卻有增無減。目前,全國有數百萬人受其傷害,因此,皮膚創傷是不可忽視的疾病,如燒傷或外傷,這些會損害到皮膚的表皮層與真皮層,甚至造成全層皮膚傷害,當治療無法愈合的傷口時,常需通過自體皮膚移植來永久封閉傷口,而對于大面積的燒傷傷口或病人傷口再生能力較弱者而言,可供取皮的部位有限;對于開放性的感染性傷口,利用薄裂層皮膚移植物來作皮膚移植治療的成功率很高,但是,由于薄裂皮膚移植物的真皮層較薄,傷口終會形成增生或收縮的瘢痕孿縮現象而影響重建后皮膚功能。因此,各種不同的生物敷料被提出,并被顯示可用為裂層皮膚移植物的替代物。
隨著傷口愈合研究的深入,人們認識到使用生物敷料的目的不止是為了覆蓋創面,還必須能幫助傷口愈合,防止細菌侵襲,減少傷口區域的超高代謝和營養不良,降低疼痛和不適,防止結痂而促進愈合。
臨床使用量最大的生物敷料是醫用脫脂棉,由于肉芽組織向敷料內生長引起粘連,在揭除時產生痛苦和二次創傷,且積液易引起感染。針對這種情況,近幾年出現了許多新型敷料,廣受好評的是高分子水凝膠皮膚創傷修復敷料,其具有良好透氣性和透水性,能抵御細菌的侵入,并能根據創面的外形而成型,其不足之處在于膠體強度差、缺乏耐用性。為了增加膠體強度,高分子水凝膠皮膚創傷修復敷料的合成過程中,通常采用化學交聯、物理凍融、輻射合成三種方法,采用化學合成需要使用交聯劑和引發劑等有毒有害化學物質,如戊二醛、碳化二亞胺,這又使合成的水凝膠敷料用于傷口護理時,增加了使用風險;采用凍融法合成水凝膠敷料不存在使用有毒有害化學物質,使得其細胞毒性增加,存在潛在的安全問題。但是合成的敷料具有熱可逆性,在溫度較高時容易變形,使之不易運輸儲存,且凍融過程易使水凝膠敷料中的水分溢出,造成其保水能力大大降低,吸收傷口滲出液的能力也降低,從而影響其傷口護理效果,與皮膚不易貼合。采用輻射法合成的水凝膠敷料,由于輻射法制備的水凝膠機械強度較小,尤其是使用單一原料輻照時,產生的凝膠較脆。
不論是皮膚移植物,還是皮膚移植物的替代物“生物敷料”,對于可以促進傷口快速愈合,且無毒,有良好的生物相容性的皮膚移植物的替代物,仍是人類迫切需要的和積極研究的方向。
發明內容
本發明的目的在于提供一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物及制備方法。
本發明采用的技術方案為:
一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物,包括由皮膚移植物支架材料制成的水凝膠,及分布在水凝膠中的經京尼平交聯的活化素B。
優選的,皮膚移植物支架材料為殼聚糖、羧甲基殼聚糖、海藻酸鹽、明膠和膠原蛋白中的至少一種。
優選的,皮膚移植物支架材料為明膠和羧甲基殼聚糖。
優選的,在皮膚移植物支架材料的水溶液中,依次加入京尼平水溶液、活化素B,混合均勻,得混合液,然后成型加工,同時成膠,得京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物。
優選的,混合液中皮膚移植物支架材料的濃度為5~20 g/mL。
優選的,皮膚移植物支架材料為質量比為9:1的明膠、羧甲基殼聚糖的混合物。
優選的,混合液中活化素B的濃度為1~20ng/mL。
優選的,混合液中京尼平的濃度為0.01~0.5 g/mL。
優選的,制備過程中各原料均為無菌原料。
本發明的有益效果是:
本發明的人工皮膚移植物無毒、無致熱原性,具有良好的生物相容性;可預防病原微生物入侵,降低感染發生率;可促進上皮組織快速愈合;減少創面體液滲出,并保持局部濕潤的微環境,可常規消毒和滅菌,便于儲存和運輸,應用于燒傷、外傷等皮膚創傷修復中。
附圖說明
圖1是實施例所得不同明膠、殼聚糖含量的人工皮膚移植物圖。
具體實施方式
下面結合具體的實施例對本發明作進一步的說明,但并不局限于此。
實施例1
一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物的制備方法,包括以下步驟:
1)原料提純:
稱取5g明膠溶于100mL蒸餾水中,加熱至50℃攪拌溶解;
稱取10g羧甲基殼聚糖溶于100mL蒸餾水中,攪拌室溫下溶解;
將溶解后的明膠、羧甲基殼聚糖溶液分別15000轉/min高速離心5min,分離得到上清液,分別冷凍干燥24h,分別得到純化后的明膠、羧甲基殼聚糖;
2)京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物制備
分別稱取純化后的明膠2.25g、羧甲基殼聚糖0.25g,紫外滅菌30min,然后均加入到滅菌的蒸餾水中,加熱至50℃攪拌溶解并冷卻至室溫,用滅菌的蒸餾水定容至40mL,得明膠、羧甲基殼聚糖混合液;
稱取25mg京尼平溶解于10mL滅菌的蒸餾水中,過濾滅菌,得京尼平水溶液;
將京尼平水溶液倒入明膠、羧甲基殼聚糖混合液中,室溫下攪勻,加入50μL 10μg/mL的活化素B溶液(R&D Systems, Inc. Catalog Number:659?AB/CF),攪勻后倒入模具中,置于4℃下成膠,得京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物,所得產品至于4℃或者?70℃保存,產品液狀下各個成分的最終比例是:明膠4.5 g/mL,羧甲基殼聚糖0.5 g/mL,京尼平0.05 g/mL,活化素B 10ng/mL。所得產品的示意圖見圖1中的左圖。
實施例2
一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物的制備方法,包括以下步驟:
1)按實施例1的方法將明膠、羧甲基殼聚糖提純;
2)人工皮膚移植物的制備:
分別稱取純化后的明膠4.5g、羧甲基殼聚糖0.5g,紫外滅菌30min,然后加入到滅菌的蒸餾水中,加熱至50℃攪拌溶解并冷卻至室溫,用滅菌的蒸餾水定容至40mL,得明膠、羧甲基殼聚糖混合液;
稱取25mg京尼平溶解于10mL滅菌的蒸餾水中,過濾滅菌,得京尼平水溶液;
將京尼平水溶液倒入明膠、羧甲基殼聚糖混合液中,室溫下攪勻,加入50μL 10μg/mL的活化素B溶液,攪勻后倒入模具中,置于4℃下成膠,得京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物,所得產品至于4℃或者?70℃保存,產品液狀下各個成分的最終比例是:明膠9 g/mL,羧甲基殼聚糖1 g/mL,京尼平0.05 g/mL,活化素B 10ng/mL。所得產品的示意圖見圖1中的中圖。
實施例3
一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物的制備方法,包括以下步驟:
1)按實施例1的方法將明膠、羧甲基殼聚糖提純;
2)人工皮膚移植物的制備:
分別稱取純化后的明膠9g、羧甲基殼聚糖1g,紫外滅菌30min,然后均加入到滅菌的蒸餾水中,加熱至50℃攪拌溶解并冷卻至室溫,用滅菌的蒸餾水定容至40mL,得明膠、羧甲基殼聚糖混合液;
稱取25mg京尼平溶解于10mL滅菌的蒸餾水中,過濾滅菌,得京尼平水溶液;
將京尼平水溶液倒入明膠、羧甲基殼聚糖混合液中,室溫下攪勻,加入50μL 10μg/mL的活化素B溶液,攪勻后倒入模具中,置于4℃下成膠,得到京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物,所得產品至于4℃或者?70℃保存,產品液狀下各個成分的最終比例是:明膠18g/mL,羧甲基殼聚糖2g/mL,京尼平0.05 g/mL,活化素B 10ng/mL。所得產品的示意圖見圖1中的右圖。圖1中從左到右的三個產品,顏色逐漸升高,透明度也逐漸降低,產品的強度從左到右也依次升高,可見明膠、羧甲基殼聚糖總的含量越低,所得人工皮膚移植物越柔軟,硬度越小,根據不同的病癥,選用不同強度的人工皮膚移植物。
實施例4
一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物的制備方法,包括以下步驟:
1)按實施例1的方法將明膠、羧甲基殼聚糖提純;
2)人工皮膚移植物的制備:
分別稱取純化后的明膠5g、羧甲基殼聚糖1g,紫外滅菌30min,然后均加入到滅菌的蒸餾水中,加熱至50℃攪拌溶解并冷卻至室溫,用滅菌的蒸餾水定容至40mL,得明膠、羧甲基殼聚糖混合液;
稱取5mg京尼平溶解于10mL滅菌的蒸餾水中,過濾滅菌,得京尼平水溶液;
將京尼平水溶液倒入明膠、羧甲基殼聚糖混合液中,室溫下攪勻,加入5μL 10μg/mL的活化素B溶液,攪勻后倒入模具中,置于4℃下成膠,得京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物,所得產品至于4℃或者?70℃保存。產品液狀下各個成分的最終比例是:明膠10 g/mL,羧甲基殼聚糖2 g/mL,京尼平0.01 g/mL,活化素B 1ng/mL。
實施例5
一種京尼平固定活化素B的人工皮膚移植物的制備方法,包括以下步驟:
1)按實施例1的方法將明膠、羧甲基殼聚糖提純;
2)人工皮膚移植物的制備:
分別稱取純化后的明膠5g、羧甲基殼聚糖1g,紫外滅菌30min,然后均加入到滅菌的蒸餾水中,加熱至50℃攪拌溶解并冷卻至室溫,用滅菌的蒸餾水定容至40mL,得明膠、羧甲基殼聚糖混合液;
稱取0.25mg京尼平溶解于10mL滅菌的蒸餾水中,過濾滅菌,得京尼平水溶液;
將京尼平水溶液倒入明膠、羧甲基殼聚糖混合液中,室溫下攪勻,加入100μL 10μg/mL的活化素B溶液,攪勻后倒入模具中,置于4℃下成膠,得京尼平固定活化素B生長因子的人工皮膚移植物,所得產品至于4℃或者?70℃保存。產品液狀下各個成分的最終比例是:明膠10 g/mL,羧甲基殼聚糖2 g/mL,京尼平0.5 g/mL,活化素B 20ng/mL。

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