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一種無激素的玉米愈傷組織再生方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201310357188.0

申請日:

2013.08.15

公開號:

CN103444525B

公開日:

2014.12.24

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A01H 4/00申請日:20130815|||公開
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 廣東省農業科學院作物研究所
發明人: 祁喜濤; 胡建廣; 吳景
地址: 510640 廣東省廣州市天河區五山路金穎西二街18號
優先權:
專利代理機構: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 代理人: 蘇運貞;裘暉
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310357188.0

授權公告號:

103444525B||||||

法律狀態公告日:

2014.12.24|||2014.01.15|||2013.12.18

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明公開一種無激素的玉米愈傷組織再生方法。將長勢良好、呈顆粒狀的玉米愈傷組織培養在無激素的胚狀體誘導培養基上,于24~26℃培養20~23天,誘導產生胚狀體;將胚狀體轉接到無激素的再生培養基上,培養溫度為24~26℃,光照度為12000~18000lux,每天的光照時間為16h,培養至生出根和芽,得到再生植株;將再生植株于如下條件下繼續培養6~7天進行壯苗即可:26~28℃、24000~30000lux,每天光照時間為16h。本發明通過改變蔗糖用量來調控再生培養階段的滲透壓,從而實現愈傷組織的高效再生,全程不需要植物激素。這一方法不但節約了實驗成本,而且避免了長期使用激素對組織材料的毒害。

權利要求書

權利要求書
1.  一種無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于包含如下步驟:
(1)將長勢良好、呈顆粒狀的玉米愈傷組織培養在胚狀體誘導培養基上,于24~26℃培養20~23天,誘導產生胚狀體;
(2)將步驟(1)得到的胚狀體轉接到無激素的再生培養基上,培養溫度為24~26℃,光照度為12000~18000lux,每天的光照時間為16h,培養至生出根和芽,得到再生植株;
(3)將步驟(2)得到再生植株于如下條件下繼續培養6~7天進行壯苗即可:26~28℃、24000~30000lux,每天的光照時間為16h;
步驟(1)中所述的胚狀體誘導培養基的成分如下:MS大量元素+MS微量元素+肌醇250mg/L+鹽酸硫胺素3.5mg/L+煙酸吡哆醇1.0mg/L+煙酸0.5mg/L+甘氨酸4.0mg/L+蔗糖40~80g/L+脯氨酸300mg/L+水解酪蛋白100mg/L+MES500mg/L+植物凝膠2500mg/L,pH值為5.8;
步驟(2)中所述的無激素的再生培養基的成分如下:MS大量元素+MS微量元素+肌醇250mg/L+鹽酸硫胺素3.5mg/L+煙酸吡哆醇1.0mg/L+煙酸0.5mg/L+甘氨酸4.0mg/L+蔗糖20~40g/L+MES500mg/L+植物凝膠2500mg/L,pH值為5.8。

2.  根據權利要求1所述的無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于:步驟(1)中所述的玉米愈傷組織為超甜玉米自交系1132、超甜玉米自交系日超-1或HiII雜交種的玉米愈傷組織。

3.  根據權利要求1所述的無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于:步驟(1)中所述的胚狀體誘導培養基中的蔗糖含量為60g/L。

4.  根據權利要求1所述的無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于:步驟(2)中所述的無激素的再生培養基中的蔗糖含量為30g/L。

5.  根據權利要求1所述的無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于:步驟(2)中所述的光照度為16000lux。

6.  根據權利要求1所述的無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于:步驟(2)中所述的培養至生出根和芽的時間為4~7天。

7.  根據權利要求1所述的無激素的玉米愈傷組織再生方法,其特征在于:步驟(3)中所述的光照度為30000lux。

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