鬼佬大哥大
  • / 7
  • 下載費用:30 金幣  

輻照降解黃曲霉毒素的方法.pdf

關 鍵 詞:
輻照 降解 黃曲霉 毒素 方法
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
摘要
申請專利號:

CN201610984217.X

申請日:

20161109

公開號:

CN106551237A

公開日:

20170405

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A23L5/20 主分類號: A23L5/20
申請人: 中國農業科學院農產品加工研究所
發明人: 哈益明,王鋒,靳婧,范家霖,李慶鵬,陳云堂,郭芹,崔龍
地址: 100193 北京市海淀區圓明園西路2號院
優先權: CN201610984217A
專利代理機構: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 代理人: 史霞
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201610984217.X

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種黃曲霉毒素的降解方法。更具體地說,本發明涉及一種輻照降解黃曲霉毒素的方法,包括:制備黃曲霉菌孢子懸浮液;將試驗農產品置于紫外燈下照射滅菌后,加入黃曲霉菌孢子懸浮液中混勻培養,得到感染黃曲霉菌的試驗農產品;將感染黃曲霉菌的試驗農產品加入體積濃度為80~85%的酒精中浸泡,并攪拌,70~80℃水浴加熱,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品;將感染黃曲霉菌的試驗農產品置于離心管中密封,先放入60Coγ射線輻射場進行輻照處理,再放入電子束輻照場中進行輻照處理。本發明提高了農產品中黃曲霉毒素的降解率,改善了降解效果,減少了工業污染,降低了企業在生產過程中的成本損失。

權利要求書

1.一種輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,包括以下步驟:步驟一、將黃曲霉菌ATCC11498接種于已在120~125℃滅菌15~25min的察氏培養基,斜面,溫度25~30℃,濕度45~55%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液;步驟二、將試驗農產品置于紫外燈下照射10~15min滅菌后,按照試驗農產品和無菌水以質量比為1:1.5~2將試驗農產品加入無菌水中,然后加入步驟一中的2~3體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度30~32℃,濕度為50~60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的試驗農產品;步驟三、將10~15重量份的感染黃曲霉菌的試驗農產品加入20~50重量份的體積濃度為80~85%的酒精中浸泡50~60min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌20~30min,再逆時針攪拌20~40min,然后將浸泡液放入通風櫥中70~80℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品;步驟四、將步驟三得到的感染黃曲霉菌的試驗農產品置于離心管中密封,先放入Coγ射線輻射場進行輻照處理,輻照劑量為10kGy,再放入電子束輻照場中進行輻照處理,輻照劑量為25kGy,電子束的能量調整為4MeV。2.如權利要求1所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步驟一中的察氏培養基包括硝酸鈉2g,磷酸氰二鉀1g,氯化鉀0.5g,硫酸鎂0.5g,硫酸亞鐵0.01g,蔗糖30g,瓊脂15~20g和水1000ml。3.如權利要求1所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,所述試驗農產品為花生或花生制品。4.如權利要求1所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步驟四中的離心管為100ml的聚丙烯離心管。5.如權利要求1所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步驟一中,將黃曲霉菌ATCC11498接種于已在123℃滅菌15min的察氏培養基,斜面,溫度30℃,濕度45%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液。6.如權利要求1所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步驟二中,將試驗農產品置于紫外燈下照射14min滅菌后,按照試驗農產品和無菌水以質量比為1:1.5將試驗農產品加入無菌水中,然后加入步驟一中的2體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度32℃,濕度為60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的試驗農產品。7.如權利要求1所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步驟三中,將12重量份的感染黃曲霉菌的試驗農產品加入35重量份的體積濃度為83%的酒精中浸泡55min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌25min,再逆時針攪拌30min,然后將浸泡液放入通風櫥中75℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品。

說明書

技術領域

本發明涉及一種黃曲霉毒素的降解方法。更具體地說,本發明涉及一種輻照降解黃曲霉毒素的方法。

背景技術

黃曲霉毒素(Aflatoxin,簡稱AF),是對人類和動物危害大的真菌毒素之一。大量資料證實,黃曲霉毒素對人及動物的肝臟組織有很強的毒害作用,嚴重時可導致肝癌,甚至死亡。黃曲霉毒素污染食品比較嚴重,尤其是對花生、核桃、玉米及其制品的污染最為嚴重和普遍。此外,在大豆、稻谷、通心粉、牛奶及其制品、食用油等食品中也經常發現黃曲霉毒素。黃曲霉毒素不僅降低農產品和飼料品質,使經濟遭受巨大損失,還可通過污染或殘留黃曲霉毒素的肉、乳等動物源性食品進入人體,對人類健康造成威脅。其中毒性最強的是黃曲霉毒素B1(C17H12O6,分子量312),為氰化鉀的10倍,其化學結構式如式1所示。

現有去除黃曲霉毒素的方法,主要分為物理化學法和生物化學法。其中,物理化學去毒法對食品的色、香、味及營養成分如維生素或蛋白質等均有不同程度的破壞和不良影響。生物化學去毒法成本較高,很難在工業化水平制備高活性黃曲霉毒素解毒活性物質。

發明內容

本發明的一個目的是解決至少上述問題,并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是提高農產品中黃曲霉毒素的降解率,改善降解效果,減少工業污染,降低企業在生產過程中的成本損失。

為了實現本發明的這些目的和其它優點,提供了一種輻照降解黃曲霉毒素的方法,包括以下步驟:

步驟一、將黃曲霉菌ATCC11498接種于已在120~125℃滅菌15~25min的察氏培養基,斜面,溫度25~30℃,濕度45~55%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液;

步驟二、將試驗農產品置于紫外燈下照射10~15min滅菌后,按照試驗農產品和無菌水以質量比為1:1.5~2將試驗農產品加入無菌水中,然后加入步驟一中的2~3體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度30~32℃,濕度為50~60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的試驗農產品;

步驟三、將10~15重量份的感染黃曲霉菌的試驗農產品加入20~50重量份的體積濃度為80~85%的酒精中浸泡50~60min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌20~30min,再逆時針攪拌20~40min,然后將浸泡液放入通風櫥中70~80℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品;

步驟四、將步驟三得到的感染黃曲霉菌的試驗農產品置于離心管中密封,先放入60Coγ射線輻射場進行輻照處理,輻照劑量為10kGy,再放入電子束輻照場中進行輻照處理,輻照劑量為25kGy,電子束的能量調整為4MeV。

優選的是,所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟一中的察氏培養基包括硝酸鈉2g,磷酸氰二鉀1g,氯化鉀0.5g,硫酸鎂0.5g,硫酸亞鐵0.01g,蔗糖30g,瓊脂15~20g和水1000ml。

優選的是,所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述試驗農產品為花生或花生制品。

優選的是,所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟四中的離心管為100ml的聚丙烯離心管。

優選的是,所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟一中,將黃曲霉菌ATCC11498接種于已在123℃滅菌15min的察氏培養基,斜面,溫度30℃,濕度45%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液。

優選的是,所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟二中,將試驗農產品置于紫外燈下照射14min滅菌后,按照試驗農產品和無菌水以質量比為1:1.5將試驗農產品加入無菌水中,然后加入步驟一中的2體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度32℃,濕度為60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的試驗農產品。

優選的是,所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟三中,將12重量份的感染黃曲霉菌的試驗農產品加入35重量份的體積濃度為83%的酒精中浸泡55min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌25min,再逆時針攪拌30min,然后將浸泡液放入通風櫥中75℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品。

本發明至少包括以下有益效果:先對試驗農產品進行紫外線殺菌,以減少農產品本身攜帶的細菌對試驗結果的影響,然后通過酒精浸泡感染黃曲霉菌的試驗農產品,達到初步降解黃曲霉毒素的目的,再經過γ射線輻照和電子束輻照相結合的方法進行二次降解和深度降解,提高了農產品中黃曲霉毒素的降解率,改善了降解效果。

本發明的其它優點、目標和特征將部分通過下面的說明體現,部分還將通過對本發明的研究和實踐而為本領域的技術人員所理解。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步的詳細說明,以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據以實施。

應當理解,本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術語并不配出一個或多個其它元件或其組合的存在或添加。

本發明提供一種輻照降解黃曲霉毒素的方法,包括以下步驟:

步驟一、將黃曲霉菌ATCC11498(購自美國菌種保藏中心ATCC,11498號菌株)接種于已在120~125℃滅菌15~25min的察氏培養基,斜面,溫度25~30℃,濕度45~55%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液。

步驟二、將試驗農產品置于紫外燈下照射10~15min滅菌后,按照試驗農產品和無菌水以質量比為1:1.5~2將試驗農產品加入無菌水中,然后加入步驟一中的2~3體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度30~32℃,濕度為50~60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的試驗農產品。

步驟三、將10~15重量份的感染黃曲霉菌的試驗農產品加入20~50重量份的體積濃度為80~85%的酒精中浸泡50~60min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌20~30min,再逆時針攪拌20~40min,以提高降解速率,然后將浸泡液放入通風櫥中70~80℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品。

步驟四、將步驟三得到的感染黃曲霉菌的試驗農產品置于離心管中密封,先放入60Coγ射線輻射場(中國農業輻射中心)進行輻照處理,輻照劑量為10kGy,再放入電子束輻照場(清華大學SML5520型電子直線加速器)中進行輻照處理,輻照劑量為25kGy,電子束的能量調整為4MeV。

所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟一中的察氏培養基包括硝酸鈉2g,磷酸氰二鉀1g,氯化鉀0.5g,硫酸鎂0.5g,硫酸亞鐵0.01g,蔗糖30g,瓊脂15~20g和水1000ml。

所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述試驗農產品為花生或花生制品。

所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟四中的離心管為100ml的聚丙烯離心管,材質為99.9%生物級聚丙烯,耐輻射。

所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟一中,將黃曲霉菌ATCC11498接種于已在123℃滅菌15min的察氏培養基,斜面,溫度30℃,濕度45%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液。

所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟二中,將試驗農產品置于紫外燈下照射14min滅菌后,按照試驗農產品和無菌水以質量比為1:1.5將試驗農產品加入無菌水中,然后加入步驟一中的2體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度32℃,濕度為60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的試驗農產品。

所述的輻照降解黃曲霉毒素的方法中,所述步驟三中,將12重量份的感染黃曲霉菌的試驗農產品加入35重量份的體積濃度為83%的酒精中浸泡55min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌25min,再逆時針攪拌30min,然后將浸泡液放入通風櫥中75℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的試驗農產品。

試驗過程中采用國家發明專利ZL200510018555.X公開的方法進行黃曲霉毒素含量的檢測,并進行降解率的換算。

實施例1

一種輻照降解黃曲霉毒素的方法,包括以下步驟:

步驟一、將黃曲霉菌ATCC11498(購自美國菌種保藏中心ATCC,11498號菌株)接種于已在120℃滅菌15min的察氏培養基(察氏培養基包括硝酸鈉2g,磷酸氰二鉀1g,氯化鉀0.5g,硫酸鎂0.5g,硫酸亞鐵0.01g,蔗糖30g,瓊脂15g和水1000ml),斜面,溫度25℃,濕度45%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液。

步驟二、將花生置于紫外燈下照射10min滅菌后,按照花生和無菌水以質量比為1:1.5將花生加入無菌水中,然后加入步驟一中的2體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度30℃,濕度為50%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的花生。

步驟三、將10重量份的感染黃曲霉菌的花生加入20重量份的體積濃度為80%的酒精中浸泡50min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌20min,再逆時針攪拌20min,以提高降解速率,然后將浸泡液放入通風櫥中70℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的花生。

步驟四、將步驟三得到的感染黃曲霉菌的花生置于離心管中密封,先放入60Coγ射線輻射場(中國農業輻射中心)進行輻照處理,輻照劑量為10kGy,再放入電子束輻照場(清華大學SML5520型電子直線加速器)中進行輻照處理,輻照劑量為25kGy,電子束的能量調整為4MeV。

單一酒精浸泡試驗、單一γ射線輻照試驗、單一電子束試驗和本實施例三者結合試驗對花生中黃曲霉毒素的降解率如表1所示。

表1 單一酒精浸泡試驗、單一γ射線輻照試驗、單一電子束試驗和本實施例三者結合試驗對花生中黃曲霉毒素的降解率對照表

由此可見,采用本發明三種方式結合的方法,可明顯提高花生中黃曲霉毒素的降解率。

實施例2

一種輻照降解黃曲霉毒素的方法,包括以下步驟:

步驟一、將黃曲霉菌ATCC11498(購自美國菌種保藏中心ATCC,11498號菌株)接種于已在125℃滅菌25min的察氏培養基(察氏培養基包括硝酸鈉2g,磷酸氰二鉀1g,氯化鉀0.5g,硫酸鎂0.5g,硫酸亞鐵0.01g,蔗糖30g,瓊脂20g和水1000ml),斜面,溫度30℃,濕度55%,培養7天,待斜面長滿黃綠色菌絲,菌絲上略生孢子時,用無菌水制成孢子懸浮液。

步驟二、將花生制品置于紫外燈下照射15min滅菌后,按照花生制品和無菌水以質量比為1:2將花生制品加入無菌水中,然后加入步驟一中的3體積份的孢子懸浮液混勻,在溫度32℃,濕度為60%時,培養7天得到感染黃曲霉菌的花生制品。

步驟三、將15重量份的感染黃曲霉菌的花生制品加入50重量份的體積濃度為85%的酒精中浸泡60min,浸泡時對浸泡液先順時針攪拌30min,再逆時針攪拌40min,以提高降解速率,然后將浸泡液放入通風櫥中80℃水浴加熱,使酒精完全揮發,得到經過初步降解的感染黃曲霉菌的花生制品。

步驟四、將步驟三得到的感染黃曲霉菌的花生制品置于離心管中密封,先放入60Coγ射線輻射場(中國農業輻射中心)進行輻照處理,輻照劑量為10kGy,再放入電子束輻照場(清華大學SML5520型電子直線加速器)中進行輻照處理,輻照劑量為25kGy,電子束的能量調整為4MeV。

單一酒精浸泡試驗、單一γ射線輻照試驗、單一電子束試驗和本實施例三者結合試驗對花生中黃曲霉毒素的降解率如表2所示。

表2 單一酒精浸泡試驗、單一γ射線輻照試驗、單一電子束試驗和本實施例三者結合試驗對花生制品中黃曲霉毒素的降解率對照表

由此可見,采用本發明三種方式結合的方法,可明顯提高花生制品中黃曲霉毒素的降解率。

盡管本發明的實施方案已公開如上,但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用,它完全可以被適用于各種適合本發明的領域,對于熟悉本領域的人員而言,可容易地實現另外的修改,因此在不背離權利要求及等同范圍所限定的一般概念下,本發明并不限于特定的細節和這里示出與描述的圖例。

關于本文
本文標題:輻照降解黃曲霉毒素的方法.pdf
鏈接地址:http://www.wwszu.club/p-6717189.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開
鬼佬大哥大