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皮特蘭豬的選育方法.pdf

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皮特蘭豬 選育 方法
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摘要
申請專利號:

CN200910247308.5

申請日:

20091228

公開號:

CN101743929B

公開日:

20111123

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A01K67/02 主分類號: A01K67/02
申請人: 上海市農業科學院,上海科立特農科(集團)有限公司
發明人: 談永松
地址: 201106 上海市北翟路2901號
優先權: CN200910247308A
專利代理機構: 上海唯源專利代理有限公司 代理人: 劉秋蘭
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法律狀態
申請(專利)號:

CN200910247308.5

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種皮特蘭豬的選育方法,其包括如下步驟:A)組建基礎選育群體,該群體中至少有一頭具有HalN基因的皮特蘭豬;B)培育皮特蘭公豬和母豬并進行選配產仔,選配措施是配種的每對皮特蘭公母豬中至少一頭具有HalN基因;C)培育仔豬并進行選種,選種措施是檢測每一仔豬的Hal基因,選留具有HalN基因的皮特蘭豬以及綜合選擇指數高的具有Haln基因的皮特蘭豬作為種豬;D)重復步驟B)和步驟C)5~10次。利用本發明的方法可以有效地提高皮特蘭豬群體的HalN基因頻率,降低皮特蘭豬群的應激反應和PSE肉的出現機率。

權利要求書

1.一種皮特蘭豬的選育方法,其包括如下步驟:A)組建基礎選育群體,該群體中至少有一頭具有HalN基因的皮特蘭豬;B)培育皮特蘭公豬和母豬并進行選配產仔,選配措施是配種的每對皮特蘭公母豬中至少一頭具有HalN基因,提高下一代皮特蘭豬群體的HalN基因頻率;C)培育仔豬并進行選種,選種措施是檢測每一仔豬的Hal基因,選留具有HalN基因的皮特蘭豬以及綜合選擇指數高的具有Haln基因的皮特蘭豬作為種豬;D)重復步驟B)和步驟C)5~10次。2.如權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟A)的基礎選育群體中,具有HalN基因的皮特蘭豬,是將具有HalN基因的皮特蘭公豬精液導入到皮特蘭母豬,然后培養具有HalN基因的仔豬納入選育群體。3.如權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟A)中,組建基礎選育群體的首要原則是首先選擇HalNHalN基因型的皮特蘭豬,其次選擇HalNHaln基因型的皮特蘭豬,最后選擇HalnHaln基因型的皮特蘭豬,組建基礎選育群體的次要原則是取綜合選擇指數高的皮特蘭豬納入基礎選育群體。4.如權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟B)中,選配措施是首先選擇HalNHalN基因型的皮特蘭豬,其次選擇HalNHaln基因型的皮特蘭豬進行配種,加快提高下一代皮特蘭豬群體的HalN基因頻率。5.如權利要求4所述的方法,其特征在于:步驟B)中,交配模式包括HalNHalN×HalNHalN,HalNHalN×HalNHaln,HalNHaln×HalNHalN,HalNHaln×HalNHaln和HalNHalN×HalnHaln。6.如權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟C)中,所述選種措施是保留HalNHalN基因型的豬,擇優選留HalNHaln基因型的豬,嚴格剔除HalnHaln基因型的豬。7.如權利要求6所述的方法,其特征在于:步驟C)中,所述選種的另一措施是取綜合選擇指數高的皮特蘭豬作為種豬。?8.如權利要求1、6或7所述的方法,其特征在于:步驟C)中,培育仔豬并進行選種時還進行淘汰制選擇,于仔豬28±4日齡時進行第一次選留,淘汰體質虛弱、體型外貌差、發育不良者;于皮特蘭豬120±10日齡進行第二次選留,對少數發育不良,體重小于40kg以及體型外貌差者予以淘汰;于皮特蘭豬180±10日齡進行第三次選留,嚴格剔除外陰畸形或發育不良、臍疝者;選種時同時參考其父母產仔性能和同胞生長性能。9.如權利要求1、3或7所述的方法,其特征在于:所述綜合選擇指數其中,表示某一性狀的群體平均數,P表示某一性狀的個體表型值,1、2、3、4分別表示達100kg的日齡、飼料轉化率、活體背膘厚和眼肌面積四個性狀。10.如權利要求1所述的方法,其特征在于:采用PCR-RFLPs方法檢測皮特蘭豬的Hal基因。?

說明書

技術領域

本發明屬于畜牧選育技術領域,尤指一種皮特蘭豬的選育方法。?

背景技術

皮特蘭豬是目前瘦肉率最高的豬種,原產于比利時布拉邦特地區,是先由比利時的本地豬與法國的貝衣豬雜交,后又引入英國的泰姆沃斯豬的血統雜交而成,1955年被歐洲各國所公認,是近十幾年來歐洲較為流行的豬種。我國于1988年從法國引進皮特蘭豬,在我國主要是被用作二元或三元雜交生產的父本,以提高雜交商品豬的瘦肉率水平。?

盡管皮特蘭豬具有極高的瘦肉率,但它的應激反應嚴重,常常在運輸途中死亡或出現PSE肉(Pale,Soft?and?Exudative,即灰白、松軟和滲出液汁),給養豬企業帶來巨大損失。現代分子生物學的研究認為,位于豬第6號染色體上p11-q21區域的氟烷基因(Halothane?Gene)是決定PSE從而影響肉質的主效基因。目前已知氟烷座位(Hal)有三種基因型:HalNHalN、HalNHaln、HalnHaln(常用N表示顯性,用n表示隱性),前兩種基因型對氟烷不敏感(為氟烷陰性),后一種為敏感型個體(氟烷陽性),氟烷基因呈隱性純合時,導致豬應激綜合癥頻繁發生。?

如此一來就迫切需要選育出對氟烷不敏感的陰性皮特蘭豬。然而常規的育種技術是根據表現型來進行選育的,而表現型取決于基因型。對于氟烷基因來講,一般常規技育種術是利用氟烷氣體來進行測試,只有氟烷基因呈隱性純合即為HalnHaln時,豬才會陽性反應,而對雜合子HalNHaln而言,此技術無能為力!若采用常規技術努力提高種豬和商品豬瘦肉率的同時,就會發現氟烷隱性基因的頻率在豬群中有升高的趨勢。?

也有許多研究表明,無氟烷隱性基因的純合體HalNHalN皮特蘭豬的肉質性狀如肉色和嫩度等方面較優越,但純合體HalNHalN皮特蘭豬的胴體性狀如瘦肉率等卻有所降低。?

發明內容

本發明的目的之一是降低皮特蘭豬群的應激反應和PSE肉的出現機?率,實現這一目的的有效方法之一是對皮特蘭豬群進行無氟烷隱性基因的選育,采用分子輔助標記選擇手段鑒別個體皮特蘭豬的氟烷基因及其基因型,將氟烷隱性基因的皮特蘭豬從豬群中剔除出去。?

本發明的皮特蘭豬的選育方法,包括如下步驟:?

A)組建基礎選育群體,該群體中至少有一頭具有HalN基因的皮特蘭豬;?

B)培育皮特蘭公豬和母豬并進行選配產仔,選配措施是配種的每對皮特蘭公母豬中至少一頭具有HalN基因,提高下一代皮特蘭豬群體的HalN基因頻率;?

C)培育仔豬并進行選種,選種措施是檢測每一仔豬的Hal基因,選留具有HalN基因的皮特蘭豬以及綜合選擇指數高的具有Haln基因的皮特蘭豬作為種豬;?

D)重復步驟B)和步驟C)5~10次。?

步驟A)中,組建的皮特蘭豬基礎選育群體共120頭以上,含有5個血統,公豬與母豬的比例為1∶4~6。?

如果在選擇步驟A)的基礎選育群體時,試驗場所有皮特蘭豬經檢測均沒有HalN基因,則可引進具有HalN基因的皮特蘭公豬精液,導入到皮特蘭母豬,然后培養仔豬并將具有HalN基因的仔豬納入選育群體。?

步驟A)中,組建基礎選育群體的首要原則是首先選擇HalNHalN基因型的皮特蘭豬,其次選擇HalNHaln基因型的皮特蘭豬,最后選擇HalnHaln基因型的皮特蘭豬。?

步驟B)中,選配措施是首先選擇HalNHalN基因型的皮特蘭豬,其次選擇HalNHaln基因型的皮特蘭豬進行配種,加快提高下一代皮特蘭豬群體的HalN基因頻率。例如可以選擇的交配模式包括HalNHalN×HalNHalN,HalNHalN×HalNHaln,HalNHaln×HalNHalN,HalNHaln×HalNHaln和HalNHalN×HalnHaln。優選HalNHalN×HalNHalN,HalNHalN×HalNHaln,HalNHaln×HalNHalN的交配模式,更優選HalNHalN×HalNHalN的交配模式。?

步驟C)中,選種措施是大力保留HalNHalN基因型的豬,擇優選留HalNHaln基因型的豬,嚴格剔除HalnHaln基因型的豬。?

本發明的另一目的是為了在降低皮特蘭豬群的應激反應和PSE肉的出現機率的同時,提高皮特蘭豬群的胴體性狀、生長性能等指標。?

因此組建基礎選育群體的次要原則是取綜合選擇指數SI值高的皮特?蘭豬納入基礎選育群體,其中 SI = 0.06 P 1 P 1 ‾ + 0.06 P 2 P 2 ‾ + 0.135 P 3 P 3 ‾ + 0.144 P 4 P 4 ‾ . ]]>

步驟B)中,選配的另一措施是取綜合選擇指數SI值高的皮特蘭豬進行配種。?

步驟C)中,取綜合選擇指數SI值高的皮特蘭豬作為種豬。?

步驟C)中,培育仔豬并進行選種時還進行淘汰制選擇,于仔豬28±4日齡時進行第一次選留,淘汰體質虛弱、體型外貌差、發育不良者;于皮特蘭豬120±10日齡進行第二次選留,對少數發育不良,體重小于40kg以及體型外貌差者予以淘汰;于皮特蘭豬180±10日齡進行第三次選留,嚴格剔除外陰畸形或發育不良、臍疝者;選種時同時參考其父母產仔性能和同胞生長性能。?

在基礎選育群體及各世代的選育中,采用PCR-RFLPs方法檢測皮特蘭豬的Hal基因。?

在基礎選育群體及各世代的選育中,選留種豬數120頭以上,公母豬比例為1∶4~6。?

在無氟烷隱性基因皮特蘭豬的選育過程中,選種選配的首要原則是優選采用HalNHalN基因型皮特蘭豬,其次采用HalNHaln基因型皮特蘭豬,最后采用HalnHaln基因型皮特蘭豬,利用該方法可以快速提高皮特蘭豬群體的HalN基因頻率以及HalNHalN基因型頻率;選種選配的次要原則是選擇綜合選擇指數SI值高的皮特蘭豬,通過選擇綜合選擇指數SI值高的皮特蘭豬進行選配選種可以使得皮特蘭豬群體的生產性能下降得不至于過快,同時有機會將非HalNHalN基因型皮特蘭豬的其它優秀性狀如胴體性能、生長性能等逐漸固定到具HalNHalN基因型皮特蘭豬上,提高整個皮特蘭豬群的各生產性能。?

本發明取得的積極進步效果在于:?

在選育出的皮特蘭豬群體中,HalnHaln基因型皮特蘭豬完全剔除出去,Haln基因頻率也基本為0,無應激和PSE肉;群體中皮特蘭豬平均日增重高達740g,瘦肉率也在72%以上。?

具體實施方式

實施例1組建基礎選育群體?

取上海市農業科學院畜牧獸醫研究所試驗豬場的皮特蘭豬、上海大江畜禽公司種豬場內的皮特蘭豬、北京順鑫農業茶棚原種豬場的皮特蘭豬耳?組織樣,采用文獻[談永松,張似青,張忠明,何玉英,劉紅林,王林云.PCR-RFLPs檢測法在無氟烷隱性基因皮特蘭豬建群中的應用.上海農業學報,2001,17(3):34-37]報道的PCR-RFLPs方法檢測皮特蘭豬的氟烷基因。?

并記錄上海市農業科學院畜牧獸醫研究所試驗豬場的每頭皮特蘭豬的達100kg日齡、飼料轉化率、活體背膘厚、眼肌面積等指標,計算綜合選擇指數SI(Selection?Index)。根據所有皮特蘭豬的SI值,從最高值往下選擇一直到組建基礎選育群所需要的頭數。?

其中, SI = W 1 h 1 2 P 1 P 1 ‾ + W 2 h 2 2 P 2 P 2 ‾ + · · · · · · W n h n 2 P n P n ‾ ]]>

式中:W代表性狀的經濟重要性,權數W1+W2+…Wn=1.0?

h2=性狀的遺傳力,=某一性狀的群體平均數,P=某一性狀的個體表型值。?

皮特蘭豬共選擇四個性狀加以考慮,分別為代表生長性狀的達100kg的日齡P1和飼料轉化率P2,代表胴體性狀的活體背膘厚P3和眼肌面積P4,則所對應的性狀遺傳力分別為:h12=0.30、H22=0.30、H32=0.45、h42=0.48,根據育種目標,皮特蘭豬的上述四個性狀的經濟重要性分別為:W1=20%、W2=20%、W3=30%、W4=30%,則皮特蘭豬的綜合選擇指數?

SI = 20 % × 0.30 × P 1 P 1 ‾ + 20 % × 0.30 × P 2 P 2 ‾ + 30 % × 0 . 45 × P 3 P 3 ‾ + 30 % × 0.48 × P 4 P 4 ‾ ]]>

= 0.06 P 1 P 1 ‾ + 0.06 P 2 P 2 ‾ + 0.135 P 3 P 3 ‾ + 0.144 P 4 P 4 ‾ ]]>

結果:所有皮特蘭豬均未檢測到HalN基因,均為HalnHaln基因型,根據綜合選擇指數SI值共選得HalnHaln基因型皮特蘭豬120頭,15頭公豬,共有5個血統。?

實施例2導入具有HalN基因皮特蘭豬外血產生一世代豬?

從法國引進含N基因的法系皮特蘭豬精液,及時對實施例1的基礎選育群體中的10頭皮特蘭母豬按照常規方法進行人工授精,產生一世代,PCR-RFLPs方法檢測一世代豬的Hal基因。?

結果:經檢測,共產生127頭仔豬,具有HalN基因的皮特蘭雜合子仔豬19頭,納入選育群體中。?

實施例3選育擴大HalN基因皮特蘭豬個體數和出現HalNHalN基因?型皮特蘭豬個體?

采用HalNHaln×HalNHaln的交配模式,盡可能多地擴大含HalN基因的皮特蘭豬個體數,同時也期望能獲得HalNHalN基因型的皮特蘭豬。同時為了充分利用皮特蘭公豬的HalN基因,也采用HalNHaln×HalnHaln交配模式,以擴大含HalN基因的皮特蘭豬個體數。?

采用系祖建系法與群體繼代選育法相結合的方法,培養皮特蘭公豬和母豬,根據上述交配模式產仔豬并進行選種,給每頭皮特蘭豬建立詳細的檔案資料。于仔豬出生時采集耳組織樣,利用PCR-RFLPs方法檢測氟烷基因及其基因型;于仔豬28日齡時進行第一次選留,淘汰體質虛弱、體型外貌差、發育不良者;于皮特蘭豬4月齡進行第二次選留,對少數發育不良,體重小于40kg以及體型外貌差者予以淘汰;于皮特蘭豬6月齡進行第三次選留,嚴格剔除外陰畸形或發育不良、臍疝者。根據氟烷基因及其基因型,最后保留HalNHalN基因型、HalNHaln基因型和優秀HalnHaln基因型的皮特蘭豬作為種豬,同時根據每頭皮特蘭豬的胴體性能和生長性能指標計算出的SI值,從高到低進行選擇120頭種豬,公母比例為1∶5,選種時同時參考其父母產仔性能和同胞生長性能。?

其中, SI = 0.06 P 1 P 1 ‾ + 0.06 P 2 P 2 ‾ + 0.135 P 3 P 3 ‾ + 0.144 P 4 P 4 ‾ ]]>

表1各世代皮特蘭豬的Hal基因情況?

備注:表格中的0世代即為基礎群皮特蘭豬,1世代即是實施例2的仔豬?

從表1可以看出,經過有目的的選種配種,各世代的皮特蘭豬的HalN頻率呈現上升趨勢,至2世代出現了HalNHalN皮特蘭豬個體12頭。?

實施例4繼續逐代選育提高皮特蘭豬群體HalNHalN基因型頻率?

采用系祖建系法與群體繼代選育法相結合的方法,培養皮特蘭公豬和母豬,根據HalNHalN×HalNHaln、HalNHaln×HalNHalN、HalNHaln×HalNHaln、HalNHalN×HalnHaln交配模式選配產仔豬并進行選種,給每頭皮特蘭豬建立詳細的檔案資料,記錄達100kg日齡、飼料轉化率、活體背膘厚、眼肌面積等數據。仔豬出生后采集耳組織樣,利用PCR-RFLPs方法?檢測氟烷基因及其基因型;于仔豬28日齡時進行第一次選留,淘汰體質虛弱、體型外貌差、發育不良者;于皮特蘭豬4月齡進行第二次選留,對少數發育不良,體重小于40kg以及體型外貌差者予以淘汰;于皮特蘭豬6月齡進行第三次選留,嚴格剔除外陰畸形或發育不良、臍疝者。最后根據氟烷基因及其基因型,大力保留HalNHalN基因型的皮特蘭豬,擇優選留HalNHaln基因型的皮特蘭豬,嚴格剔除HalnHaln基因型的皮特蘭豬,同時根據每頭皮特蘭豬的胴體性能和生長性能指標計算出的SI值,從高到低進行選擇120頭種豬,公母比例1∶5,選種時同時參考其父母產仔性能和同胞生長性能。?

其中, SI = 0.06 P 1 P 1 ‾ + 0.06 P 2 P 2 ‾ + 0.135 P 3 P 3 ‾ + 0.144 P 4 P 4 ‾ ]]>

表2各世代皮特蘭豬的Hal基因情況?

備注:表格中的1、2世代分別為實施例2、3的仔豬數量。?

從表2可以看出,經過有目的的選種配種,各世代的皮特蘭豬的HalNHalN基因型頻率呈現上升趨勢,至5世代HalNHalN基因型皮特蘭豬頻率已達到87.83%,而HalN基因頻率上升到93.9%。?

實施例5氟烷基因的檢測?

采用PCR-RFLPs法檢測從2003年11月份至2007年8月份止的28批共994頭后備豬的氟烷基因及其基因型,結果如表3所示。?

表3各批次氟烷基因檢測結果?

注:送檢總數與檢測總數不太一致,因送檢樣本或DNA抽提等原因未能檢測,氟烷基因檢測結果以及選育依據均以檢測總數為準?

從表3中可以看出,盡管不同檢測批次間HalN基因以及HalNHalN基因型出現的頻率變化較大,各批次間也不是一世代接一世代的關系,但若以年為單位總體來看,整個群體有一個總體的趨勢,那就是隨著時間的推移,群體中HalN基因的頻率在增加,HalNHalN基因型的頻率在增加,而HalNHaln基因型頻率相對在下降,經過不斷的有目的地選配,最終剔除了HalnHaln基因型。這說明隨著選育的深入進行,群體正逐步地淘汰Haln基因,向著HalNHalN基因型群體發展,具體的基因及基因型頻率發展趨勢可參見表4。?

表4各批次氟烷基因不同基因型及基因頻率?

實施例6肥育試驗及屠宰測定?

選取出生日期相同或相近、體重大約在25~30kg左右的皮特蘭仔豬,按照HalNHalN、HalNHaln、HalnHaln基因型分為3組進行肥育試驗時,每組不少于6頭,逐個稱取試驗始重,然后每滿1個月稱一次個體重,至肥育試驗結束。?

屠宰測定時,選取90~95kg左右的試驗豬,每組選擇3頭進行屠宰,左胴測量,右胴分割試驗。結果如表5所示。?

表5肥育屠宰試驗結果?

結論:剔除Haln基因的皮特蘭豬肉肉質得到明顯改善,特別是具HalNHalN基因型的皮特蘭豬肉,肉色鮮紅,大理石紋明顯,有光澤,有彈性,而具HalnHaln基因型的皮特蘭豬肉,肉色蒼白、松軟、滲水,出現典型的PSE肉。具HalNHalN基因型的豬肉的嫩度好于HalnHaln基因型,肌內脂含量亦高于后者,這說明前者肉質明顯優于后者。HalNHaln基因型的其各項指標介于HalNHalN和HalNHaln基因型之間,更偏近于HalNHalN基因型。并且本發明的HalNHalN基因型的皮特蘭豬的胴體瘦肉率也高達72.89%。?

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