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脂肪酶 抑制 聚合物
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摘要
申請專利號:

CN200410087981.4

申請日:

19990106

公開號:

CN1636574A

公開日:

20050713

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K31/765,A61K31/785,A61K31/80,A61P3/06,A61P3/04 主分類號: A61K31/765,A61K31/785,A61K31/80,A61P3/06,A61P3/04
申請人: 基酶有限公司
發明人: W·哈瑞·曼德維勒三世,莫莉·凱特·博利,維凱特·R·加里加佩
地址: 美國馬薩諸塞州
優先權: 09/005,379,09/166,510
專利代理機構: 永新專利商標代理有限公司 代理人: 過曉東
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法律狀態
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CN200410087981.4

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法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明描述了一種通過給患者服用已被一個或多個抑制脂肪酶的基團取代的聚合物治療患者肥胖的方法,脂肪酶是負責脂肪水解的酶。本發明進一步涉及使用在本文所描述的方法中的聚合物,以及制備聚合物的新型中間物和方法。

權利要求書

1.一種用于治療哺乳動物高甘油三酯血癥的組合物,包括有效量的被至少一個脂肪酶抑制基團取代的聚合物,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺,聚乙烯醇,聚醚或聚烯丙基胺,并且,所述的脂肪酶抑制基團是含硼的脂肪酶抑制基團。2.依據權利要求1所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團是芳族含硼脂肪酶抑制基團。3.依據權利要求2所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團是取代的芳族含硼脂肪酶抑制基團。4.依據權利要求1所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團與脂肪酶反應形成共價鍵。5.依據權利要求4所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團與在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。6.依據權利要求5所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團與不在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。7.依據權利要求1所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團包括硼酸。8.依據權利要求7所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團具有如下結構:其中,R是疏水基團,取代的或未取代的脂肪族基團或取代的或未取代的芳族基團;Z是氧,亞烷基,硫,-SO-,-CO-,-NR-,-CONR-,-POH-或間隔基團;R是氫,取代的或未取代的脂肪族基團,或取代的或未取代的芳族基團。9.依據權利要求1所述的組合物,其中,所述的聚合物是共聚物。10.依據權利要求1所述的組合物,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺。11.被至少一個脂肪酶抑制基團取代的聚合物在制備用于治療哺乳動物高甘油三酯血癥的藥物中的應用,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺,聚乙烯醇,聚醚或聚烯丙基胺,并且,所述的脂肪酶抑制基團是含硼的脂肪酶抑制基團。12.依據權利要求11所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團是芳族含硼脂肪酶抑制基團。13.依據權利要求12所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團是取代的芳族含硼脂肪酶抑制基團。14.依據權利要求11所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團與脂肪酶反應形成共價鍵。15.依據權利要求14所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團與在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。16.依據權利要求15所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團與不在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。17.依據權利要求11所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團包括硼酸。18.依據權利要求17所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團具有如下結構:其中,R是疏水基團,取代的或未取代的脂肪族基團或取代的或未取代的芳族基團;Z是氧,亞烷基,硫,-SO-,-CO-,-NR-,-CONR-,-POH-或間隔基團;R是氫,取代的或未取代的脂肪族基團,或取代的或未取代的芳族基團。19.依據權利要求11所述的應用,其中,所述的聚合物是共聚物。20.依據權利要求11所述的組合物,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺。21.一種用于治療哺乳動物肥胖的組合物,包括有效量的被至少一個脂肪酶抑制基團取代的聚合物,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺,聚乙烯醇,聚醚或聚烯丙基胺,并且,所述的脂肪酶抑制基團是含硼的脂肪酶抑制基團。22.依據權利要求21所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團是芳族含硼脂肪酶抑制基團。23.依據權利要求22所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團是取代的芳族含硼脂肪酶抑制基團。24.依據權利要求21所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團與脂肪酶反應形成共價鍵。25.依據權利要求24所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團與在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。26.依據權利要求25所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團與不在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。27.依據權利要求21所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團包括硼酸。28.依據權利要求27所述的組合物,其中,所述的脂肪酶抑制基團具有如下結構:其中,R是疏水基團,取代的或未取代的脂肪族基團或取代的或未取代的芳族基團;Z是氧,亞烷基,硫,-SO-,-CO-,-NR-,-CONR-,-POH-或間隔基團;R是氫,取代的或未取代的脂肪族基團,或取代的或未取代的芳族基團。29.依據權利要求21所述的組合物,其中,所述的聚合物是共聚物。30.依據權利要求21所述的組合物,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺。31.被至少一個脂肪酶抑制基團取代的聚合物在制備用于治療哺乳動物肥胖的藥物中的應用,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺,聚乙烯醇,聚醚或聚烯丙基胺,并且,所述的脂肪酶抑制基團是含硼的脂肪酶抑制基團。32.依據權利要求31所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團是芳族含硼脂肪酶抑制基團。33.依據權利要求32所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團是取代的芳族含硼脂肪酶抑制基團。34.依據權利要求31所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團與脂肪酶反應形成共價鍵。35.依據權利要求34所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團與在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。36.依據權利要求35所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團與不在所述脂肪酶活性位點的氨基酸殘基形成共價鍵。37.依據權利要求31所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團包括硼酸。38.依據權利要求37所述的應用,其中,所述的脂肪酶抑制基團具有如下結構:其中,R是疏水基團,取代的或未取代的脂肪族基團或取代的或未取代的芳族基團;Z是氧,亞烷基,硫,-SO-,-CO-,-NR-,-CONR-,-POH-或間隔基團;R是氫,取代的或未取代的脂肪族基團,或取代的或未取代的芳族基團。39.依據權利要求11所述的應用,其中,所述的聚合物是共聚物。40.依據權利要求11所述的組合物,其中,所述的聚合物是聚丙烯酰胺。

說明書

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本申請是1999年1月6日遞交的申請號為99802023.0、發 明名稱為“脂肪酶抑制聚合物”的分案申請。

本發明的背景

人類肥胖被認為是健康問題,在美國,臨床上認定為超重的 有約九千七百萬人。身體脂肪的積累或保持與熱量攝入有直接關 系。因此,最常用的一種控制體重對抗肥胖的方法是攝入脂肪含 量相對低的飲食,即,飲食含脂肪量少于“正常飲食”或是含脂 肪量少于患者一般的消耗量。

在很多種食物源中的脂肪含量大大地限制了能使用在低脂 肪含量飲食中的食物源。此外,脂肪是產生多種食品的味道,外 觀及物理特性的原因。因此,低脂肪含量飲食的可接受性和保持 這樣的飲食是很困難的。

已建議使用多種化學方法來控制肥胖。厭食劑如右旋安非他 命,非-安非他命藥物苯丁胺和氟苯丙胺(Phen-Fen)的結合物, 及僅有右旋氟苯丙胺(Redux),與嚴重的副作用有關。不吸收的 物質如olestra(OLEAN),礦物油或新戊基酯(參閱美國專利 No.2,962,419)已建議用作飲食用脂肪的替代物。藤黃酸及其衍 生物也已被描述通過干擾脂肪酸合成來治療肥胖。可膨脹交聯乙 烯基嘧啶樹脂也已被描述通過提供無營養膨脹體積機理作為食 欲抑制劑,如在美國專利2,923,662中所述。外科技術如臨時回 腸側路手術,在特別情況中實施。

然而,治療肥胖的方法,如上述的方法都有嚴重缺陷,以控 制飲食作為控制肥胖的最普遍技術。因此,需要治療肥胖的新方 法。

本發明的概述

本發明描述了一種通過給患者服用含有一個或多個能抑制 脂肪酶的基團的或被其取代的聚合物來治療肥胖的方法。脂肪酶 在消化系統中是關鍵酶,其將因太大而不能被小腸吸收的甘油二 酯或甘油三酯,分解成能被吸收的脂肪酸。這樣,對脂肪酶的抑 制可致使對脂肪吸收的減少。在一個具體實施中,脂肪酶抑制 基團可以是一種“自殺性酶底物”,其通過與酶在活性位點或其 他位點形成共價鍵抑制脂肪酶的活性。在另一個具體實施中,脂 肪酶抑制基團可以是酶的同配抑制劑。本發明進一步涉及使用在 本文所描述的方法中的聚合物,以及制備聚合物的新型中間物和 方法。

本發明的詳細描述

本發明描述了一種通過給患者服用含有一個或多個能抑制 脂肪酶的基團的或被其取代的聚合物來治療肥胖的方法。因為脂 肪酶負責脂肪的水解,其抑制作用的一個結果是減小了脂肪的水 解和吸收。本發明進一步涉及使用在本文所描述的方法中的聚合 物以及制備聚合物的新型中間物和方法。

在本發明的一個方面,脂肪酶抑制基團滅活脂肪酶,如胃、 胰腺和舌脂肪酶。滅活作用能通過形成共價鍵使酶無活性而產 生。共價鍵能與在酶活性位點或鄰近活性位點的氨基酸殘基形 成,或在遠離活性位點的殘基上形成,只要形成的共價鍵能對酶 活性產生抑制作用。脂肪酶含有負責將脂肪水解成脂肪酸的催化 三價基。催化三價基包括絲氨酸,天冬氨酸,和組氨酸氨基酸殘 基。這種三價基還負責水解絲氨酸蛋白酶中的酰胺鍵,可以預測 認為絲氨酸蛋白酶抑制劑的化合物也會抑制脂肪酶。因此,能與 聚合物共價結合的絲氨酸蛋白酶抑制劑是較好的脂肪酶抑制基 團。如共價鍵可在脂肪酶抑制基團和在酶催化位點或鄰近催化位 點的羥基之間形成。如,可與絲氨酸形成共價鍵。滅活作用也可 通過脂肪酶抑制基團與氨基酸如半胱氨酸,其在遠離活性位點的 位置上,形成共價鍵產生。此外,脂肪酶抑制基團和酶之間的非 -共價相互作用也可產生對酶的滅活作用。如,脂肪酶抑制基團 可以是脂肪酸的同配體,其能與脂肪酶催化位點非-共價相互作 用。此外,脂肪酶抑制基團能與自然的甘油三酸酯競爭對脂肪酶 的水解作用。

在本發明的一個方面中,脂肪酶抑制基團可以由結構式I表 示:

其中,

R是氫,疏水基團,-NR2R3,-CO2H,-OCOR2,-NHCOR2, 取代的或未取代的脂肪族基團或取代的或未取代的芳族基團;

R1是活性基團;

Y是氧,硫,-NR2-或不存在;

Z和Z1各自單獨是,氧,亞烷基,硫,-SO3-,-CO2-, -NR2-,-CONR2-,-PO4H-或間隔基團;

R2和R3各自單獨是,氫,取代的或未取代的脂肪族基團, 或取代的或未取代的芳族基團;

m是0或1;

n是0或1。

在一個具體實施中,結構式I的脂肪酶抑制基團可由下列結 構表示:

其中R,R1和Y如上面所定義的。

在另一個具體實施中,結構式I的脂肪酶抑制基團可以表示 為下列結構:

其中R,R1,R2,R3和Y如上面所定義的,p是整數(如0 到約30之間的整數,較好地是約2到約10之間的整數)。

在另一個具體實施中,結構式I的脂肪酶抑制基團是混合酐。 混合酐包括但不限于,磷酸-羧酸,磷酸-磺酸和焦磷酸酯混合 酐脂肪酶抑制基團,分別由下列結構表示:

其中R,R1,Z1和Y如上面所定義的。

在另一方面中,本發明的脂肪酶抑制基團可以是酐。在一個 具體實施中,酐是環酐,由結構式II表示:

其中R,Z和p如上面所定義的,X是-PO2-,-SO2-, 或-CO-,k是從1到約10的整數,較好地是1-4的整數。

在另一個具體實施中,酐脂肪酶抑制基團可以是環酐,其是 稠合環系統的部分。這種類型的環酐可由結構式III表示:

其中X和Z如上面所定義的,環A是任意地取代環脂肪族 基團或芳族基團,或它們的組合物,在環中可以包括一個或多個 雜原子。在一個特別具體實施中,環酐是苯磺酸酐,由下列結構 式表示:

其中Z如上面所定義的,苯環可進一步被取代。

在另一個具體實施中,脂肪酶抑制基團是α-鹵代羰基,由 結構式IV表示:

其中R和Y如上面所定義的,W1和W2每個單獨分別是氫 或鹵素,如,-F,-Cl,-Br,-I,其中W1和W2至少一個是 鹵素。

在另一方面,含易受親核攻擊的內環基團的環狀化合物也可 以是脂肪酶抑制基團。這種類型的脂肪酶抑制基團的實例為內酯 和環氧化物,可分別由結構式V和VI表示:

其中R,Z,m和p如上面所定義的。

在另一方面,脂肪酶抑制基團可以是磺酸酯或二硫化物基 團,分別由結構式VII和VIII表示:

其中R,Z和p如上面所定義的。R5不存在或是疏水基團, 取代的或未取代的脂肪族基團或取代的或未取代的芳族基團。

在一個特別的具體實施中,二硫化物脂肪酶抑制基團可以由 下列結構式表示:

其中R,Z和p如上面所定義的。

在本發明的另一方面,脂肪酶抑制基團可以是硼酸,其可通 過疏水基團與聚合物結合,或當聚合物是疏水的時,可直接與聚 合物結合。硼酸脂肪酶抑制基團可由下列結構式表示:

其中R5,Z,n和m如上面所定義的。

在另一方面,同配脂肪酶抑制基團可以是與聚合物結合的石 炭酸。石炭酸脂肪酶抑制基團可由下列結構式表示:

其中Z,R5,n,m如上面所定義的,-CO2H和-OH彼此 相鄰或相對。

很多種聚合物可使用在本文所描述的發明中。聚合物可以是 脂肪族的,脂環族的,或芳族的或合成的或自然產生的。然而, 較好的是脂肪族和脂環族合成聚合物。并且,聚合物可以是疏水 的,親水的或疏水和/或親水單體的共聚物。聚合物可以整體或部 分是非離子的(如中性的),陰離子的或陽離子的。并且,聚合 物可從烯屬或烯屬單體(如乙烯醇)或從縮合聚合物制備。

如,聚合物可以是聚乙烯醇,聚乙烯胺,聚-N-烷基乙烯 胺,聚烯丙基胺,聚-N-烷基烯丙基胺,聚烯烴亞胺),聚乙烯, 聚丙烯,聚醚,聚環氧乙烷,聚酰胺,聚丙烯酸,聚烷基丙烯酸 酯,聚丙烯酰胺,聚甲基丙烯酸,聚烷基甲基丙烯酸酯,聚甲基 丙烯酰胺,聚-N-烷基丙烯酰胺,聚-N-烷基甲基丙烯酰胺, 聚苯乙烯,乙烯基萘,乙基乙烯基苯,氨基苯乙烯,乙烯基二苯 基,乙烯基苯甲醚,乙烯基咪唑基,乙烯基吡啶基,二甲基氨基 甲基苯乙烯,三甲基銨乙基甲基丙烯酸酯,三甲基銨乙基丙烯酸 酯,碳水化合物,蛋白質和上面物質的取代的衍生物(如它們的 氟代單體)和它們的共聚物。

較好的聚合物包括聚醚,如聚(亞烷基)二醇。聚醚可由下 列結構式IX表示:

其中R如上面所定義的,q是整數。

如,聚合物可以是聚丙二醇或聚乙二醇或它們的共聚物。聚 合物可以是無規共聚物或嵌段共聚物。并且,聚合物可以是疏水 的,親水的,或它們的組合物(如在無規共聚物或嵌段共聚物中)。

尤其推薦的聚合物是特點在于有疏水和親水聚合區域的嵌 段共聚物。在這種具體實施中,“核心聚合物”可以是疏水的, 一端或兩端帶有親水聚合物,或者反過來。這種聚合物的實例是 聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇共聚物,如以商品名 PLURONIC(BASF?Wyandotte公司)售出。BRIJ和IGEPAL(Aldrich,Milwaukee,WI)是含帶有一個疏水末端基團的聚乙二 醇核心的聚合物實例。BRIJ聚合物是一個末端帶有烷氧基基團 的聚乙二醇,而聚合物鏈的另一端的羥基基團是自由的。 IGEPAL聚合物是一個末端帶有4-壬基苯氧基基團的聚乙二 醇,而聚合物鏈的另一端的羥基基團是自由的。

另一種聚合物包括脂肪族聚合物如,聚乙烯醇,聚烯丙基胺, 聚乙烯胺,聚乙烯亞胺。這些聚合物可進一步有一個或多個取代 基的特點,如取代的或未取代的,飽和的或未飽和的烷基和取代 的或未取代的芳基。適當的取代基包括陰離子,陽離子或中性基 團,如烷氧基,芳基,芳氧基,芳烷基,鹵素,胺,和銨基團。 聚合物可按所需含有一個或多個反應官能基團,其可直接或間 接,與含脂肪酶抑制基團的中間物反應。

在一個具體實施中,聚合物含下列重復單元:

其中,

q是整數;

R4是-OH,NH2-,-CH2NH2,-SH,或由下列結構式表 示的基團:

其中R,R1,Y,Z,Z1,m和n如上面所定義的。

此外,聚合物也可是碳水化合物,如幾丁聚糖,纖維素,半 纖維素或淀粉或它們的衍生物。

聚合物可以是線性的或是交聯的。可通過將共聚物與一種 或多種交聯試劑反應實施交聯,交聯試劑含兩個或多個官能基 團,如親電子基團,其與聚合物的醇反應形成共價鍵。在這種情 況中可通過在親電子基團上聚合物羥基基團的親核攻擊產生交 聯。這樣形成了橋鍵單元,將不同聚合物鏈的兩個或多個醇氧原 子連接。這種類型適當的交聯試劑包括含兩個或多個從酰基氯代 物,環氧化物,和烷基-X中選取的基團的化合物,其中X是適 當的離去基團,如鹵,甲苯磺酰或甲磺酰基團。這種化合物的實 例包括,但不限于此,表氯醇,琥珀酰二氯,丙烯酰氯,丁二醇 縮水甘油醚,乙二醇縮水甘油醚,1,2,4,5-苯四酸二酐,和二鹵 代烷。

聚合物組合物也可通過在反應混合物中含多官能共聚用單 體作為交聯試劑來交聯。多官能共聚用單體可摻入到兩條或多條 成長的聚合物鏈中,從而交聯鏈。適當的多官能共聚用單體包括, 但不限于此,二丙烯酸酯,三丙烯酸酯,四丙烯酸酯,二甲基丙 烯酸酯,二丙烯酰胺,二烯丙基丙烯酰胺,和二甲基丙烯酰胺。 具體實例包括乙二醇二丙烯酸酯,丙二醇二丙烯酸酯,丁二醇二 丙烯酸酯,乙二醇二甲基丙烯酸酯,丁二醇二甲基丙烯酸酯,亞 甲基雙(甲基丙烯酰胺),1,2-亞乙基雙(丙烯酰胺),1,2-亞 乙基雙(甲基丙烯酰胺),亞乙基雙(丙烯酰胺),亞乙基雙(甲 基丙烯酰胺),季戊四醇四丙烯酸酯,三羥甲基丙烷三丙烯酸酯, 雙酚A二甲基丙烯酸酯,和雙酚A二丙烯酸酯。其他適當的多 官能單體包括聚乙烯基聚乙烯基芳烴,如二乙烯基苯。

聚合物的分子量不是至關重要的。所需的是聚合物應足夠大 到在腸胃道中基本上或完全不被吸收。如,分子量可大于900道 爾頓。

脂肪的消化和吸收是一個復雜過程,其中不溶于水的脂肪乳 化形成油滴直徑約為0.5mm的油在水中的乳液。由于存在脂肪酸 和膽汁鹽,它們是主要的乳化試劑,這種乳化油相具有凈負電荷。 存在于水溶相中的脂肪酶水解在乳液表面的乳化脂肪。當脂肪酶 在水溶液中時,大部分脂肪酶含有一個被直接位于活性位點頂部 的氨基酸表面環掩蓋的活性位點。然而,當脂肪酶在脂肪乳液的 脂肪/水界面的膽汁鹽接觸時,脂肪酶經歷結構上的變化,將表面 環移動到一邊而使活性位點暴露。這種結構上的變化使得脂肪酶 能催化乳液的脂肪/水界面的脂肪水解。能破壞乳液表面或改變其 化學性質的聚合物應能抑制脂肪酶的活性。因此,通過加入一種 或多種能改變乳液表面的聚合物可增加含脂肪酶抑制基團的聚 合物的效力。或者,脂肪酶抑制基團可直接附著在這樣的聚合物 上。

幾種類型的脂肪結合聚合物已有效地破壞了脂肪乳液的表 面或改變了其化學性質。如,含正電荷乳化劑的聚合物能形成穩 定的多聚陽離子脂肪乳液。在這種乳液中的脂肪不再是腸胃脂肪 酶的基質,因為乳液表面含凈正電荷而不是通常的凈負電荷。另 一種類型的脂肪結合聚合物破壞乳液使得乳液的油滴結合,這樣 減小了脂肪酶是活性的乳液表面區域,因此降低了脂肪水解。脂 肪結合聚合物在共同待審的1998年1月9日提交的、序列號為 No.09/004,963的申請中,及在1998年10月5日提交的、序列號 為No.09/166,453的申請中作了進一步的描述,這些文獻的內容 通過在此引述而收入本篇。

本文所描述的取代的聚合物可通過此領域中通常已知的方 法制備。如,具有反應活性組成的脂肪酶抑制中間物可與具有與 所說的反應活性組成反應的官能基團的聚合物接觸。參閱March. J,高級有機化學,第三版,紐約John?Wiley和Sons,有限公司; (1985)。

本文所使用的“疏水基團”,是這樣的一種基團,其作為獨 立實體在辛醇中比在水中溶解性大。如,辛基(C8H17)是疏水 的,因為其“母”烷,辛烷,在辛醇中比在水中溶解性大。疏水 基團可以是飽和的或不飽和的,取代的或未取代的烴基團。這樣 的基團包括取代的和未取代的,正常的,支鏈的或環狀的含至少 4個碳原子的脂肪族基團,取代的或未取代的芳烷基或雜芳烷基 基團及取代的或未取代的芳基或雜芳基。較好地,疏水基團包括 含約6個到30個碳原子的脂肪族基團。適當的疏水基團的具體 實例包括下列烷基:丁基,戊基,己基,庚基,辛基,壬基,癸 基,十二烷基,十四烷基,十六烷基,十八烷基,二十二烷基, 膽固醇基,法呢基,芳烷基,苯基,萘基,和它們的組合物。其 他適當的疏水基團實例包括含至少4個碳原子的鹵代烷基(如10 -鹵代癸基),含至少6個碳原子的羥烷基(如11-羥十一烷基), 芳烷基(如芐基)。本文所使用的脂肪族基團包括完全飽和的或 含一個或多個不飽和單元的直鏈,支鏈或環狀C4-C30碳氫化合 物。

適用在本發明中的芳族基團包括但不限于,芳環,如苯基和 取代的苯基,雜芳環,如吡啶基,呋喃基,苯硫基,稠合多環芳 族環系統,其中碳環芳族環或雜芳環與一個或多個其他碳環或雜 芳環稠合。稠合多環芳族環系統的實例包括取代的或未取代的菲 基,蒽基,萘基,2-苯并噻嗯基,3-苯并噻嗯基,2-苯并 呋喃基,3-苯并呋喃基,2-吲哚基,3-吲哚基,2-喹啉基, 3-喹啉基,2-苯并噻唑基,2-苯并惡唑基,2-苯并咪唑基, 2-喹啉基,3-喹啉基,1-異喹啉基,3-喹啉基,1-異吲哚 基,3-異吲哚基,和丫啶基。

“取代的脂肪族或芳族基團”可含一個或多個取代基,如一 個芳基基團(包括碳環芳基基團或雜芳基基團),取代的芳基基 團,-O-(脂肪族基團或芳基基團),-O-(取代的脂肪族基 團或取代的芳基基團),芳基,-CHO-,-CO-(脂肪族或取 代的脂肪族基團),-CO-(芳基或取代的芳基),-COO-(脂 肪族或取代的脂肪族基團),-COO-(芳基或取代的芳基基團), -NH-(酰基),-O-(酰基),芐基,取代的芐基,鹵代小分 子烷基(如三氟代甲基和三氯代甲基),氟代,氯代,溴代,碘 代,氰基,硝基,-SH,-S-(脂肪族或取代的脂肪族基團), -S-(芳基或取代的芳基),-S-(酰基)等等。

“活性基團”是提供官能基團或反應活性組成的基團。通常, 吸電子基團是“活性基團”。上面結構式的R1或Y-R1,是好的 離去基團或吸電子基團。好的離去基團實例是磷酸酯,對-硝基 苯酚,鄰,對-二硝基苯酚,N-羥基琥珀酰亞胺,咪唑,抗壞血 酸,吡哆素,三甲基乙酸酯,羰基化金剛烷,對-氯代苯酚,鄰, 對-二氯代苯酚,磺酰化甲烷,磺酰化莢基化氧,和三異丙基苯 磺酰。較好的離去基團是N-羥基琥珀酰亞胺。

間隔基團可以是含一個到約三十個原子并與脂肪酶抑制劑, 與聚合物,或與疏水基團共價結合的基團。通常,間隔基團可通 過官能基團與脂肪酶抑制劑,聚合物或疏水基團共價結合。官能 基團的實例有氧,亞烷基,硫,-SO2-,-CO2-,-NR2-, 或-CONR2-。間隔基團可以是親水的或是疏水的。間隔基團的 實例包括氨基酸,多肽,碳水化合物,及任意取代的亞烷基或芳 族基團。間隔基團可從如表氯醇,二鹵代烷,鹵代烷基酯,聚乙 二醇,聚丙二醇和其他交聯的或雙官能化合物制備。溴代烷基乙 酸酯是較好的間隔基團。

給受試體服用的聚合物的量取決于疾病的類型和嚴重性,還 取決于受試體的特點,如通常的健康情況,年齡,體重,和耐藥 性。它還取決于肥胖的程度及與肥胖相關的并發癥。根據這些及 其他因素技術人員能確定適當的劑量。一般,在人類受試體內, 聚合物的有效量范圍對于成年人約10mg每天到約50mg每天。 較好地,劑量范圍為約10mg每天到約20mg每天。

聚合物可通過適當的途徑服用,包括如以膠囊,懸浮液或片 劑口服。與食物混合口服是較好的服用方式。

聚合物也可與作為部分藥組合物的可接受藥用載體結合服 用。用來服用的聚合物配方根據所選取的服用途徑(如溶液,乳 液,膠囊)而變化。適當的藥用載體可含有惰性組分,其不與聚 合物的脂肪酶抑制基團作用。可使用標準藥用配方技術,如在PA, Easton,Mack出版公司的Remington藥物科學中所描述的。將 組合物裝入膠囊的方法(如包裹在硬凝膠或環糊精中)在此領 域中是眾所周知的(Baker等人“生物活性試劑的控釋給藥”,John Wiley和Sons,1986)。

試驗

?????????????????????聚合物的合成

????????????????????????實例1

制備含n-苯基疏水基團和p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團

?????????????????????? 的聚乙二醇:

將在無水二氯甲烷(40ml)中的n-戊醇(19.5毫摩爾,1.72 g)和N-甲基咪唑(19.5毫摩爾,1.6g)混合物在無水條件下 經20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(19.5毫摩爾, 5.0g)的無水二氯甲烷(100ml)溶液中。加料期間反應燒瓶在 水浴中冷卻。加料完成后,將水浴移開,反應混合物在室溫攪拌 2小時。在無水條件下將在無水二氯甲烷(150ml)中的聚乙二 醇(MW=8,000,10毫摩爾,80g)和N-甲基咪唑(19.5毫摩 爾,1.6g)加入到反應燒瓶內。混合物在室溫下攪拌25小時。 真空移出溶劑,依據方法A提純殘留物,獲得白色粉末聚合物(70 g)。

提純過程

方法A:

將殘留物溶解在去離子水(100ml)中。使用Spectra/Por Membrane?MWCO:3,500將溶液透析24小時。將透析的溶液凍干, 獲得白色粉末聚合物。

方法B:

將殘留物倒入到0.5L的二乙基醚中并在室溫攪拌1小時。 將溶劑輕輕倒出并加入新鮮的二乙基醚(0.25L)。混合物攪拌1 小時。將溶劑倒出,在室溫真空下干燥聚合物。

方法C:

將反應混合物用10%水溶硫酸鈉溶液(3×100ml)沖洗。 用硫酸鎂干燥有機相。將溶劑移出,在室溫下干燥聚合物。

使用上述過程,合成下列化合物,在下面的表中列出。

表1:有不同疏水基團的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團的

????????????????????聚乙二醇(PEG) ?實例 ????PEG ????MW ??疏水基團(R) 提純方法 物理狀態 ??1 ????8400 ????n-戊基 ??方法A ??粉末 ??2 ????3400 ????n-癸基 ??方法B ??粉末 ??3 ????3400 ????n-十二烷基 ??方法B ??粉末 ??4 ????3400 ????n-十八烷基 ??方法B ??粉末 ??5 ????1000 ????n-癸基 ??方法B ??半固體 ??6 ????1000 ????n-十二烷基 ??方法B ??半固體 ??7 ????1000 ????n-十四烷基 ??方法B ??半固體 ??8 ????1000 ????n-十六烷基 ??方法B ??半固體 ??9 ????1000 ????n-十八烷基 ??方法B ??半固體 ??10 ????1000 ????n-戊基 ??方法C ??半固體 ??11 ????1000 ????n-己基 ??方法C ??半固體 ??12 ????1000 ????n-辛基 ??方法C ??半固體 ??13 ????1000 ????n-二十二烷基 ??方法C ??粉末 ??14 ????1000 ????膽固醇基 ??方法C ??粉末 ??15 ????3400 ????n-戊基 ??方法B ??固體 ??16 ????1500 ????n-戊基 ??方法B ??固體 ??17 ????1500 ????n-癸基 ??方法B ??固體 ??18 ????1500 ????n-十二烷基 ??方法B ??固體 ??19 ????1500 ????n-十六烷基 ??方法C ??固體 ??20 ????1500 ????n-十八烷基 ??方法C ??固體 ??21 ????1500 ????n-二十二烷基 ??方法B ??固體 ??22 ????1500 ????Rac-法呢基 ??方法B ??棕色固體 ??23 ????1500 ????n-膽固醇基 ??方法C ??固體 ??24 ????1500 ????5-苯基-戊基 ??方法C ??固體 ??25 ????1500 ????n-辛基 ??方法C ??固體 ??26 ????1500 ????n-己基 ??方法C ??固體 ??27 ????3400 ????n-辛基 ??方法C ??固體 ??28 ????8400 ????n-辛基 ??方法C ??固體

??????????????????????實例29

制備含n-十四烷基疏水基團和p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制

?????????????? 基團的PLURONIC聚合物

將在無水二氯甲烷(75ml)中的n-十四醇(70毫摩爾,15 g)和N-甲基咪唑(70毫摩爾,5.6ml)混合物在無水條件下經 20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(70毫摩爾,17.92 g)的無水二氯甲烷(50ml)溶液中。加料期間反應燒瓶在水浴 中冷卻。加料完成后,將水浴移開,反應混合物在室溫攪拌2小 時。在無水條件下將在無水二氯甲烷(150ml)中的PLURONIC(MW=1,100,35毫摩爾,39g)和N-甲基咪唑(70毫摩爾, 5.6ml)加入到反應燒瓶內。混合物在室溫下攪拌24小時。反應 混合物用冷的飽和氯化鈉溶液(3×150ml)提取,有機層用無水 硫酸鈉干燥。過濾出硫酸鈉,收集過濾物。減壓條件下將溶劑從 過濾物中移出,得到65g暗黃色粘稠液體。在真空室溫下干燥 物料一周。這種物料可直接用于體內和體外測試。

使用上述過程制備下列實例。

表2:??有不同疏水基團的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團的

?????????????????????PLURONIC聚合物(PLU) ??實例 ????PLU ????MW ????乙二醇 ????WT% ????疏水基團 ??????(R) ????物理狀態 ??29 ????1100 ????10wt% ????n-十四烷基 ????液體 ??30 ????1100 ????10wt% ????n-十二烷基 ????液體 ??31 ????1100 ????10wt% ????n-癸基 ????液體 ??32 ????1100 ????10wt% ????n-辛基 ????液體 ??33 ????1900 ????50wt% ????n-己基 ????液體 ??34 ????1900 ????50wt% ????n-辛基 ????液體 ??35 ????1900 ????50wt% ????n-癸基 ????液體 ??36 ????1900 ????50wt% ????n-十二烷基 ????液體 ??37 ????1900 ????50wt% ????n-十四烷基 ????半固體 ??38 ????1900 ????50wt% ????n-十六烷基 ????半固體 ??39 ????8400 ????80wt% ????n-戊基 ????粉末 ??40 ????8400 ????80wt% ????n-己基 ????粉末 ??41 ????2900 ????40wt% ????n-十八烷基 ????半固體 ??42 ????2900 ????40wt% ????n-十六烷基 ????半固體 ??43 ????2900 ????40wt% ????n-十四烷基 ????液體 ??44 ????2900 ????40wt% ????n-十二烷基 ????液體 ??45 ????4400 ????40wt% ????n-十八烷基 ????半固體 ??46 ????4400 ????40wt% ????n-十六烷基 ????半固體 ??47 ????4400 ????40wt% ????n-十四烷基 ????液體 ??48 ????4400 ????40wt% ????n-十二烷基 ????液體

??????????????????????實例51

制備含n-十六烷基疏水基團和p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制

?????????????????? 基團的聚丙二醇

將在無水二氯甲烷(75ml)中的n-十六醇(117毫摩爾, 28.41g)和N-甲基咪唑(117毫摩爾,9.34ml)混合物在無水 條件下經20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(117毫 摩爾,30g)的無水二氯甲烷(60ml)溶液中。加料期間反應燒 瓶在水浴中冷卻。加料完成后,將水浴移開,反應混合物在室溫 攪拌2小時。在無水條件下將在無水二氯甲烷(150ml)中的聚 丙二醇(MW=1,000,58.5毫摩爾,58.5g)和N-甲基咪唑(117 毫摩爾,9.3ml)加入到反應燒瓶內。混合物在室溫下攪拌24小 時。反應混合物用冷的飽和硫酸鈉溶液(3×150ml)提取,有機 層用無水硫酸鎂干燥。過濾出硫酸鎂,收集過濾物。減壓條件下 將溶劑從過濾物中移出,得到77g產物。在真空室溫下干燥物料 4天。

使用上述過程制備下列聚丙二醇p-硝基苯基磷酸酯。

表3:有不同疏水基團的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團

?????????????????的聚丙二醇(PPG) ????實例 ????PPG ????MW ????疏水基團 ????(R) ??物理狀態 ????49 ????1000 ????n-戊基 ????半固體 ????50 ????1000 ????n-辛基 ????半固體 ????51 ????1000 ????n-十六烷基 ????半固體 ????52 ????1000 ????n-十八烷基 ????半固體 ????53 ????2000 ????n-戊基 ????半固體 ????54 ????2000 ????n-辛基 ????半固體 ????55 ????2000 ????n-十六烷基 ????半固體 ????56 ????2000 ????n-十八烷基 ????半固體

???????????????????????實例57

制備含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團和戊基疏水基團的

???????????????????? 聚乙二醇聚合物

A.制備O,O-二甲基n-戊基磷酸酯:

在氮氛圍下,將O,O-二甲基n-戊基磷酸酯(220g,2摩爾) 滴加到無水THF(600ml)的NaH(48g,2摩爾)懸浮液中。1 小時后,緩慢加入在THF(400ml)中的1-溴代戊烷(248ml, 2摩爾),反應混合物回流12小時。真空移出溶劑,加入二乙基 醚(1L),過濾移出鹽。醚溶液用水(3×100ml)沖洗,有機層 在無水硫酸鈉上干燥。減壓移出醚,真空蒸餾提純粗制產物,得 到171g的O,O-二甲基n-戊基磷酸酯。

B.制備n-戊基二氯代磷酸酯:

將O,O-二甲基n-戊基磷酸酯(158g,0.88摩爾)和N,N- 二甲基甲酰胺(700mg)溶解在亞硫酰氯(200ml)中,得到的 混合物回流48小時。室溫真空下移出揮發物,蒸餾提純粗制產 物,得到無色液體(135g)。

C.制備含p-硝基苯基n-戊基磷酸酯脂肪酶抑制基團的聚 乙二醇

在無水條件下,在n-戊基二氯代磷酸酯(2.65g,14毫摩 爾)的40ml無水二氯甲烷溶液中加入亮橙色p-硝基苯酚的鈉 鹽(2.3g,14毫摩爾)。亮橙色在5-10分鐘內消失。45分鐘后, 在室溫加入聚乙二醇(MW=8400,56g,7毫摩爾)和N-甲基 咪唑(1.5mL,20毫摩爾)的混合物并攪拌24小時。反應混合 物用2%碳酸鉀溶液(6×100ml)沖洗,接著用氯化鈉溶液(6 ×100ml)沖洗。有機層在硫酸鈉上干燥,真空移出溶劑得到粘 稠液體。將產物倒入到200ml的二乙基醚中,并攪拌10分鐘。 輕輕倒出醚部分,將過程再重復三次。獲得白色粉末產物在室溫 真空下干燥一周。

使用這個過程制備下列含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基 團的聚乙二醇聚合物

表4:有不同疏水基團的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團的

??????????????????????聚乙二醇 ????實例 ????PEG ???疏水基團(R) ???物理狀態 ????57 ????8400 ????n-戊基 ????粉末 ????58 ????3400 ????n-戊基 ????粉末 ????59 ????1500 ????n-戊基 ????半固體 ????60 ????1000 ????n-戊基 ????半固體

????????????????????實例61

制備含被n-戊基-1,5二氧接頭連接的p-硝基苯基磷酸酯脂肪

酶抑制基團及含n-十六烷基疏水基團的PLURONIC聚合物:

在1L的園底燒瓶內加入氫化鈉(4.0g,60%NaH的礦物油 分散體,0.1摩爾),然后用無水庚烷(3×25ml)沖洗。加入無 水四氫呋喃(THF)(150ml),在氮氛圍下室溫攪拌懸浮液。在 室溫加入無水PLURONIC(MW=1900,50wt%聚乙二醇,50wt% 聚丙二醇;95g,0.05摩爾)的無水THF(200ml)溶液。在無 水條件下加入溴代戊基乙酸酯(20.9g,0.1摩爾)的無水THF (50ml)溶液。反應混合物在60℃回流16小時。真空移出溶劑, 產物漿懸浮到二氯甲烷(300ml)中。過濾移出固體,過濾物用 水(3×100ml)沖洗。有機層在無水硫酸鈉上干燥,移出溶劑得 到暗棕色粘稠液體(110g)。將這種物質溶解在甲醇(500ml) 中,并用水溶4N氫氧化鈉(40ml)處理。4小時后,反應混合 物用濃鹽酸酸化,真空移出溶劑。將粘稠油溶解在二氯甲烷中, 將其用水(4×100ml)沖洗。有機層在硫酸鈉上干燥,移出溶劑 得到暗棕色粘稠液體雙-5-羥基戊氧基PLURONIC(98g)。

在另一個燒瓶內,將在無水二氯甲烷(40ml)中的n-十六 醇(29.0毫摩爾,7.02g)和N-甲基咪唑(290毫摩爾,2.3ml) 混合物在無水條件下經20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代 磷酸酯(29.0毫摩爾,7.41g)的無水二氯甲烷(100ml)溶液 中。加料期間反應燒瓶在水浴中冷卻。加料完成后,將水浴移開, 反應混合物在室溫攪拌2小時。在無水條件下將在無水二氯甲烷 (150ml)中的雙-5-羥基戊氧基PLURONIC(14.48毫摩爾, 30g)和N-甲基咪唑(2.3ml)加入到反應燒瓶內。混合物在室 溫下攪拌24小時。反應混合物用冷的飽和氯化鈉溶液(3×100 ml)沖洗。收集有機層并用硫酸鈉干燥。移出溶劑得到粘稠液體。 將用沸騰的己烷(6×50ml)沖洗。在真空室溫下干燥產物過夜, 得到暗黃色粘稠液體(39g)。

使用上述過程制備下列實例。

表5:含被不同二烷氧基連接的p-硝基苯基脂肪酶抑制基團及

?????????含不同疏水基團的PLURONIC聚合物 ????實例 ????PLU ????MW ????疏水基團 ????(R) ??二烷氧基 ??(Z1) ????61 ????1900 ????n-戊基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????62 ????1900 ????n-癸基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????63 ????1900 ????n-十六烷基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????64 ????1900 ????n-戊基 ??n-十一烷基-1,10-二氧 ????65 ????1900 ????n-癸基 ??n-十一烷基-1,10-二氧 ????66 ????1900 ????n-十六烷基 ??n-十一烷基-1,10-二氧

??????????????????????????實例67

制備含被n-戊基-1,5二氧接頭連接的p-硝基苯基磷酸酯脂肪

酶抑制基團及含n-十六烷基疏水基團的聚乙二醇聚合物:

在1L的園底燒瓶內加入氫化鈉(7.67g,60%NaH的礦物 油分散體,0.19摩爾),然后用無水庚烷(3×25ml)沖洗。加入 無水四氫呋喃(THF)(200ml),在氮氛圍下室溫攪拌懸浮液。 在室溫無水條件下加入聚乙二醇(MW=1500,150g,0.1摩爾) 的無水THF(200ml)溶液。混合物在室溫下攪拌2小時,然后 向反應混合物中加入溴代戊基乙酸酯(41.82g,0.2摩爾)的無 水THF(100ml)溶液。反應混合物在60℃回流16小時。真空 移出溶劑,產物漿懸浮到二氯甲烷(300ml)中。過濾移出固體, 過濾物用水(3×100ml)沖洗。有機層在無水硫酸鈉上干燥,移 出溶劑得到暗棕色粘稠液體(110g)。將這種物質溶解在甲醇(500 ml)中,并用水溶4N氫氧化鈉(80ml)處理。4小時后,反應 混合物用濃鹽酸酸化,真空移出溶劑。將粘稠油溶解在二氯甲烷 中,將其用水(4×100ml)沖洗。有機層在硫酸鈉上干燥,移出 溶劑得到暗棕色粘稠液體雙-5-羥基戊氧基聚乙二醇(98g)。 用與實例61的過程類似的方法加入p-硝基苯基磷酸酯基團。

使用上述過程制備下列實例。

表6:含被二烷氧基接頭連接的p-硝基苯基脂肪酶抑制基團及

??????????????????含不同疏水基團的聚乙二醇 ????實例 ????PEG ????MW ?疏水基團 ?(R) ??二烷氧基 ??(Z1) ????67 ????1500 ?n-己基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????68 ????1500 ?n-十二烷基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????69 ????1500 ?n-十六烷基 ??n-戊基-1,5-二氧

??????????????????????????實例75

制備含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團及十六烷基疏水基團

??????????????????????? 的BRIJ聚合物

將在無水二氯甲烷(300ml)中的p-硝基苯基二氯代磷酸 酯(75g,0.29摩爾)加入到已經用氮氣吹掃過的1L三頸口帶 攪拌槳的園底燒瓶內。經2小時將十六醇(71.03g,0.29摩爾) 和N-甲基咪唑(23.35ml,0.29摩爾)的無水二氯甲烷(250ml) 溶液滴加到燒瓶中。在倒入到分液漏斗之前將反應混合物攪拌1 個小時。N-甲基咪唑氫氯鹽為油狀在底部分離,從漏斗中移出。 在真空低于30℃從混合物中分離出二氯甲烷,得到琥珀色油,溶 解在己烷(400ml)中,置于冷凍室過夜。然后將反應混合物解 凍,將溶解部分過濾移出p-硝基苯基二氯代磷酸酯晶體。通過 在低于35℃的旋轉汽化,將溶劑從過濾物中移出得到n-己基p -硝基苯基氯代磷酸酯。

用氮氣吹掃帶攪拌槳的500ml燒瓶。加入n-己基p-硝基苯 基氯代磷酸酯(20g,0.043摩爾)的無水THF(25ml)溶液, 接著緩慢加入BRIJ58(聚氧乙烯(20)鯨蠟基醚,48.56g,0.043 摩爾)和N-甲基咪唑(3.45ml,0.043摩爾)的無水THF(200 ml)溶液。在室溫下攪拌反應混合物24小時。在低于35℃下通 過旋轉汽化移出溶劑,油狀殘留物溶解在甲醇(50ml)中。加入 甲醇/水溶液(200ml,85ml∶15ml)。過濾收集固體雙-n,n-硝 基苯基磷酸酯。在低于35℃下通過旋轉汽化分離除去甲醇。凍干 除去水。

表7中的實例可通過上述過程制備,用下列結構表示:

表7:有不同疏水基團的含末端p-硝基苯基脂肪酶抑制基團的

??????????????????????BRIJ聚合物 ????實例 ????聚合物 ????疏水基團 ????70 ??BRIJ98(n=19,x=17) ????n-十二烷基 ????71 ??BRIJ98(n=19,x=17) ????n-十六烷基 ????72 ??BRIJ35(n=22,x=11) ????n-十二烷基 ????73 ??BRIJ35(n=22,x=11) ????n-十六烷基 ????74 ??BRIJ58(n=19,x=15) ????n-十二烷基 ????75 ??BRIJ58(n=19,x=15) ????n-十六烷基

????????????????????????實例76

制備含末端p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團及十六烷基疏水

???????????????? 基團的IGEPAL聚合物

用氮氣吹掃帶攪拌槳的500ml燒瓶,加入n-己基p-硝基苯 基氯代磷酸酯(20g,0.043摩爾)的無水THF(25ml)溶液, 接著緩慢加入IGEPAL720(32.41g,0.043摩爾)和N-甲基咪 唑(3.45ml,0.043摩爾)的無水THF(200ml)溶液。在室溫 下攪拌反應混合物24小時。在真空室溫下移出溶劑,油狀產物 溶解在甲醇(50ml)中。加入甲醇/水溶液(200ml,85∶15)到 產物中。過濾出雙-n,n-二己基p-硝基苯基磷酸酯。在低于35 ℃真空下分離除去甲醇。凍干除去水。

表8中的實例可通過上述過程制備,用下列結構表示:

表8:有不同疏水基團的含末端p-硝基苯基脂肪酶抑制基團的

???????????????????IGEPAL聚合物 ????實例 ????聚合物 ????疏水基團 ????76 ??IGEPAL720(n=11) ????n-十二烷基 ????77 ??IGEPAL720(n=11) ????n-十六烷基 ????78 ??IGEPAL890(n=39) ????n-十二烷基 ????79 ??IGEPAL890(n=39) ????n-十六烷基

??????????????????????實例80

制備有n-己基疏水基團含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團

的[聚(丙二醇)嵌段-聚(乙二醇)嵌段-聚(丙二醇)]聚合物

用氮氣吹掃帶攪拌槳的500ml燒瓶,加入n-己基p-硝基苯 基氯代磷酸酯(20g,0.043摩爾)的無水THF(25ml)溶液, 接著緩慢加入[聚(丙二醇)嵌段-聚(乙二醇)嵌段-聚(丙二醇)] (平均MW=2000,50wt%乙二醇;49.36g,0.0215摩爾)和N -甲基咪唑(3.45ml,0.043摩爾)的無水THF(200ml)溶液。 在室溫下攪拌反應混合物24小時。在真空室溫下移出溶劑,油 狀殘余物溶解在甲醇(50ml)中。加入甲醇/水溶液混合物(200 ml,85∶15)。過濾出雙-n,n-二己基p-硝基苯基磷酸酯。在低 于35℃真空下分離除去甲醇。凍干除去水。

下列實例可通過上述過程制備。

表9:有不同疏水基團的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團的

[聚(丙二醇)嵌段-聚(乙二醇)嵌段-聚(丙二醇)]聚合物 ????實例 ????聚合物 ??疏水基團(R) ????80 ??PPG-PEG-PPG2000 ????己基 ????81 ??PPG-PEG-PPG2000 ????十二烷基 ????82 ??PPG-PEG-PPG2000 ????十六烷基

??????????????????????實例83

制備含癸基疏水基團和氯磷酸酯脂肪酶抑制基團的PLURONIC

?????????????????????? 聚合物

用氮氣吹掃后,將氯氧化磷(30g,0.1956摩爾)的無水THF (100ml)溶液加入到3L燒瓶內,混合物冷卻到0-5℃。新鮮 蒸餾的三乙基胺(27.27ml,0.1956摩爾)和1-癸醇(30.97g, 0.1956摩爾)的無水THF(300ml)溶液混合物以最大流速75ml/ 小時滴加到燒瓶內,并保持溶液溫度在5℃。加料完成后,新鮮 蒸餾的三乙基胺(13.7ml,0.0978摩爾)和PLURONIC(平均 MW=2900,142g,0.0489摩爾)的無水THF(300ml)溶液混 合物以最大流速75ml/小時滴加到燒瓶內,并保持溶液溫度在5 ℃。加料完成后,反應物升溫到室溫并攪拌24小時。過濾除去 氫氯化三乙基銨鹽。在30℃真空除去溶劑,產物油用己烷(6× 250ml)沖洗以除去未反應的n-癸基二氯代磷酸酯。在高度真 空(0.003mmHg)室溫將產物,雙-n-癸基氯代磷酸酯干燥過 夜。

??????????????????????實例84

制備含癸基疏水基團和N-羥基琥珀酰亞胺基磷酸酯脂肪酶抑

?????????????? 制基團的PLURONIC聚合物

用氮氣吹掃125ml帶攪拌槳的燒瓶,加入雙-n-癸基氯代 磷酸酯PLURONIC(如在實例81中制備的,30g,0.0178摩爾) 溶液。以固體加入N-羥基琥珀酰亞胺(2.05g,0.0178摩爾) 并使其溶解。加入新鮮蒸餾的三乙基胺(2.48ml,0.0178摩爾)。 反應混合物攪拌0.5小時。過濾除去氫氯化三乙基銨鹽。在30℃ 旋轉汽化除去過濾物中的THF。在高度真空(0.003mmHg)下 將產物干燥過夜。

?????????????????????實例85

制備含癸基疏水基團和吡哆素基磷酸酯脂肪酶抑制基團的

????????????????? PLURONIC聚合物

用氮氣吹掃125ml帶攪拌槳的燒瓶,加入雙-n-癸基氯代 磷酸酯PLURONIC(如在實例82中制備的,30g,0.0178摩爾) 的無水二氯甲烷(30ml)溶液。以固體加入氫氯化吡哆素(2.54 g,0.0178摩爾)并使其溶解。加入新鮮蒸餾的三乙基胺(4.96ml, 0.0356摩爾)。反應混合物攪拌2小時。過濾除去氫氯化三乙基 銨鹽,在低于35℃通過旋轉汽化除去溶劑。將油溶解在THF(50 ml)中并重新過濾。旋轉汽化除去溶劑。在高度真空(0.003 mmHg)及室溫下將產物干燥過夜。

表10列出實例83,84和85中制備的聚合物

表10:含不同離去基團的PLURONIC聚合物 ??實例 ??聚合物 ??疏水基團 ????(R) ??離去基團 ??(y-R1) ??83 ??PLU2900 ????癸基 ??氯 ??84 ??PLU2900 ????癸基 ??n-羥基琥珀酰 ??85 ??PLU2900 ????癸基 ??吡哆素基

????????????????????實例86

制備含β-內酯脂肪酶抑制基團的PLURONIC聚合物(方案I):

方案I:合成中間物5。

中間物1:

將10-羥基甲基癸酸酯(20g,98毫摩爾),苯甲氧基2,2,2 -三氯代亞胺逐乙酸酯(30g,118毫摩爾),二氯甲烷(50ml) 和環己烷(100ml)加入到1L園底燒瓶內。混合物在室溫攪拌 5分鐘。在氮氛圍下將三氟甲烷磺酸(1.3ml)加入到反應混合 物中。在幾分鐘內將溫度從室溫升高到37℃。反應通過TLC(己 烷∶乙基乙酸酯;9∶1)監控。16小時后,起始物料全部消失。過 濾將固體從反應物中分離,過濾物用水溶重碳酸鈉溶液(3×100 ml)沖洗,接著用水(3×100ml)沖洗。收集有機相并在無水 硫酸鈉上干燥。在真空室溫下除去溶劑。殘留物在硅膠柱上提純, 使用梯度醚/己烷作為移動相。產物用醚/己烷(8∶2)從柱上洗脫。 真空除去溶劑得到固體(10g)10-苯氧基甲基癸酸酯(中間物 1)。

中間物2:

將中間物1(30g)在6N氫氧化鈉溶液(100ml)中皂化12 小時,然后用濃鹽酸酸化。產物用氯仿(5×100ml)提取。有機 層被結合,在硫酸鈉上干燥。真空除去溶劑得到10-苯氧基癸酸 (中間物2)(27g),其在下一個反應中直接使用。

中間物3:

將在己烷中n-丁基鋰(1.6M溶液,68ml,108毫摩爾) 滴加入到保持在0℃的N,N-二異丙基胺(15.14ml,108毫摩爾) 的THF(50ml)溶液中。加料完成后,混合物在0℃攪拌10分 鐘。將混合物冷卻到-50℃,然后滴加入中間物2(15g,54毫 摩爾)的THF(100ml)溶液。加料完成后,混合物溫度升高到 室溫。將混合物冷卻到-78℃,然后滴加入癸基乙醛(8.44g, 54毫摩爾)的THF(40ml)溶液。在-78℃攪拌3小時,混合 物溫度升高到室溫,然后加入氯化銨溶液(50ml)急冷。用二乙 基醚(5×50ml)提取混合物。有機層被結合,并用硫酸鈉干燥, 過濾及汽化得到中間物3(22g)。

中間物4:

將苯磺酰氯(9.8g,56毫摩爾)加入到保持在0℃的中間物 3(12g,28毫摩爾)的嘧啶(200ml)溶液中。加料完成后, 混合物保持在4℃的冰箱內24小時,然后倒入到碎冰(2公斤) 中,并在室溫下攪拌20分鐘。用二乙基醚(6×150ml)提取混 合物。結合的有機層用水沖洗,用硫酸鈉干燥,真空過濾濃縮。 產物在使用己烷∶乙基乙酸酯(9∶1)的硅膠柱上提純,得到油狀 中間物4(9.8g)。

中間物5:

中間物4()溶解在二氯甲烷中,然后使用10%Pd/C(1g) 作為催化劑在50psi的氫下氫化。溶液過濾,真空除去溶劑得到 油狀中間物5(6.9g)。

中間物6:

將PLURONIC(MW=1900,570g,300毫摩爾)的THF (500ml)溶液滴加到攪拌的氫化鈉(15g)的THF(150ml) 懸浮溶液中。加料完成后,混合物在室溫下攪拌30分鐘。滴加 乙基4-溴代丁酸酯溶液(117g,600毫摩爾),在60℃攪拌混 合物16小時。冷卻到室溫后,過濾除去鹽,真空除去溶劑,得 到淡棕色粘稠物質,將其懸浮在二氯甲烷(1L)中,并用水(3 ×200ml)沖洗。收集有機層,并用硫酸鈉干燥,過濾,真空除 去溶劑得到粘稠液體中間物6(770g)。

中間物7:

將中間物6溶解在甲醇(1L)溶液和50%氫氧化鈉溶液(100 ml)中,然后在室溫攪拌24小時。反應混合物用濃鹽酸酸化, 真空除去溶劑。殘留物重新懸浮在二氯甲烷(1L)中,然后用 水(4×250ml)沖洗。有機層用硫酸鈉干燥,過濾,真空除去溶 劑得到粘稠液體中間物7(650g)。

中間物8:

在園底燒瓶內,在氮氣氛圍下將氫氯化1-(3-二甲基氨基 丙基)-3-乙基碳化二胺(4.8g,25毫摩爾)加入到中間物7 (20.72g,10毫摩爾)的二氯甲烷(100ml)溶液中。在室溫下攪 拌混合物10分鐘,然后加入N-羥基琥珀酰亞胺(2.3g)。在室 溫攪拌混合物12小時,然后轉移到分液漏斗中,并用水(3×30ml) 沖洗。有機層用無水硫酸鈉干燥,過濾,真空除去溶劑得到直接 使用在下面步驟中的22g中間物8。

?????????????????????實例86

將三乙基胺(3ml)加入到中間物8(22g,約10毫摩爾) 和中間物5(6.5g,20毫摩爾)的二氯甲烷(150ml)溶液中。 在室溫下攪拌混合物4小時,然后倒入到分液漏斗中,并用5% 鹽酸(3×20ml)和水(3×50ml)沖洗。有機層用硫酸鈉干燥, 過濾,真空除去溶劑。實例86得到粘稠液體(26g)。這種物質 直接在體內和體外測試中使用。

????????????????????實例87

制備含二硫化物脂肪酶抑制基團的PLURONIC聚合物:

中間物9:

將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二胺(1.1g,5 毫摩爾)加入到5,5’-二硫基雙(2-硝基苯甲酸)(3.96g,10 毫摩爾)的二氯甲烷(100ml)溶液中。10分鐘后加入N-羥基 琥珀酰亞胺(0.5g,5毫摩爾),然后在室溫攪拌反應物6小時。 將反應混合物倒入到分液漏斗中,然后用水(3×20ml)沖洗。 有機層用無水硫酸鈉干燥,過濾,真空除去溶劑得到直接使用在 下面步驟中的中間物9。

在中間物9的二氯甲烷(100ml)溶液中加入PLURONIC(MW=1900,9.5g,5毫摩爾)的二氯甲烷(50ml)溶液,接 著加入三乙基胺(0.5ml)。在室溫攪拌混合物16小時,然后倒 入分液漏斗中,用水(3×30ml)沖洗。有機層用無水硫酸鈉干 燥,過濾,真空除去溶劑,得到實例87的粘稠液體(12g)。

????????????????????實例88

制備含酐脂肪酶抑制基團的PLURONIC聚合物:

中間物10:

將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二胺(2.2g, 10毫摩爾)加入到1,2,3-苯三羧酸酐(2.1g,10毫摩爾)的二 氯甲烷(100ml)溶液中。混合物攪拌10分鐘,然后加入N-羥 基琥珀酰亞胺(1.0g,10毫摩爾),在室溫攪拌反應物6小時。 將反應混合物倒入到分液漏斗中,然后用水(3×20ml)沖洗。 有機層用無水硫酸鈉干燥,過濾,真空除去溶劑得到直接使用在 下面步驟中的中間物10。

在中間物10的二氯甲烷(100ml)溶液中加入PLURONIC(MW=1900,9.5g,5毫摩爾)和三乙基胺(0.5ml)的二氯甲 烷(50ml)溶液。在室溫攪拌混合物16小時,然后倒入分液漏 斗中,用水(3×30ml)沖洗。有機層用無水硫酸鈉干燥,過濾, 真空除去溶劑,得到實例88的粘稠液體(11.2g)。

體外測試

過程I:三丁酸甘油酯基質

采用滴定法使用pH?Stat儀器(美國輻射計,Westlake?OH) 評估胰腺脂肪酶活性的潛在抑制劑。基質(1ml三丁酸甘油酯) 加入到29.0ml的Tris-HCl緩沖液(pH7.0)中,緩沖液含100mM 氯化鈉,5mM氯化鈣,和4mM牛磺脫氧膽酸鈉。攪拌溶液, 之后加入210個單位的溶解在測試緩沖液中的豬胰腺脂肪酶 (Sigma,21,000單位/毫克)。通過用0.02M氫氧化鈉滴定測試 系統恒定pH7.0,監控10分鐘脂肪酶丁酸釋放情況。酶活性表示 為每克酶每分鐘加入的堿的毫克當量。在隨后的測試中,根據化 合物的溶解特性,在三丁酸甘油酯中或緩沖液中溶解不同量的抑 制劑,并在零時加入到測試系統中。

過程2:棕櫚油基質

采用滴定法使用PH?Stat儀器(美國輻射計,Westlake?OH) 評估胰腺脂肪酶活性的潛在抑制劑。基質(15ml棕櫚油乳液, 含80mM棕櫚油和2mM油酸,溶解并超聲處理在緩沖液中,緩 沖液含10mM?Tris-HCl?pH8.0,110mM氯化鈉,10mM氯化鈣, 2mM卵磷脂,1.32mM膽固醇,1.92mM甘氨膽酸鈉和1.92mM 牛磺脫氧膽酸鈉)加入到15ml測試緩沖液(Tris-HCl緩沖液pH 8.0含110mM氯化鈉和10mM氯化鈣)中。攪拌溶液4分鐘, 之后加入1050單位的溶解在測試緩沖液中的豬胰腺脂肪酶 (Sigma,21,000單位/毫克)。通過用0.02M氫氧化鈉滴定測試 系統恒定pH8.0,監控30分鐘三甘油酯的水解情況。酶活性表 示為每克酶每分鐘加入的堿的毫克當量。在隨后的測試中,在乙 醇或DMSO中制備儲備抑制劑溶液,以不同量在零時加入到測 試系統中。

如上所述,使用過程1或2實施測試,通過比較存在及不存 在抑制劑的情況中的酶活性得到抑制作用百分數。測試了三種濃 度的抑制劑,為了確定50%抑制作用(IC50)發生的濃度,以抑 制劑濃度的對數標繪抑制作用百分數。測試了下列化合物,IC50的指示值在在表11-17中列出。

????????????????????????????????????????????????????????表11 實例 聚合物 疏水基團 IC50(μM) 三丁酸甘油酯 IC50(μM) 棕櫚油 聚乙二醇(PEG)硝基苯基磷酸酯 10 ?PEG1000 戊基磷酸酯 400 *** 11 ?PEG1000 己基磷酸酯 na *** 12 ?PEG1000 辛基磷酸酯 538 *** 5 ?PEG1000 癸基磷酸酯 na *** 6 ?PEG1000 十二烷基磷酸酯 466 *** 7 ?PEG1000 十四烷基磷酸酯 1142 *** 8 ?PEG1000 十六烷基磷酸酯 67 320 9 ?PEG1000 十八烷基磷酸酯 98 *** 13 ?PEG1000 二十二烷基磷酸酯 345 *** 14 ?PEG1000 膽固醇基磷酸酯 172 *** 16 ?PEG1500 戊基磷酸酯 na *** 19 ?PEG1500 十六烷基磷酸酯 215 *** 29 ?PEG1500 十八烷基磷酸酯 73 *** 24 ?PEG1500 ?5-苯基-1-戊基磷酸酯 24 942 22 ?PEG1500 法呢基磷酸酯 na *** 23 ?PEG1500 膽固醇基磷酸酯 307 *** 15 ?PEG3400 戊基磷酸酯 559 *** 1 ?PEG8400 戊基磷酸酯 455 *** 聚丙二醇(PPG)硝基苯基磷酸酯 49 ?PPG1000 戊基磷酸酯 4000 *** 53 ?PPG2000 戊基磷酸酯 52000 *** PLURONIC聚合物硝基苯基磷酸酯 32 ?PUL1100 辛基磷酸酯 61 601 31 ?PUL1100 癸基磷酸酯 174 454 30 ?PUL1100 十二烷基磷酸酯 55 400 29 ?PUL1100 十四烷基磷酸酯 133 1200 33 ?PUL1100 己基磷酸酯 155 353 39 ?PUL1900 戊基磷酸酯 3.6 9000 34 ?PUL1900 辛基磷酸酯 3.8 379 35 ?PUL1900 癸基磷酸酯 2.4 105 36 ?PUL1900 十二烷基磷酸酯 2.3 183 37 ?PUL1900 十四烷基磷酸酯 3.6 187 38 ?PUL1900 十六烷基磷酸酯 22 196 44 ?PUL2900 十二烷基磷酸酯 1.7 286 43 ?PUL2900 十四烷基磷酸酯 1.7 260 42 ?PUL2900 十六烷基磷酸酯 0.9 106 41 ?PUL2900 十八烷基磷酸酯 1.0 174 49 ?PUL4400 十二烷基磷酸酯 8.4 *** 47 ?PUL4400 十四烷基磷酸酯 5.0 *** 46 ?PUL4400 十六烷基磷酸酯 1.4 *** 45 ?PUL4400 十八烷基磷酸酯 4.8 *** 39 ?PUL8400 戊基磷酸酯 325 *** 40 ?PUL8400 己基磷酸酯 84 *** 聚乙二醇(PEG)硝基苯基磷酸酯 60 ?PEG1000 戊基磷酸酯 836 na 59 ?PEG1500 戊基磷酸酯 na *** PLU=PLURONIC PEG=聚乙二醇 PPG=聚丙二醇 PLU1100(10wt%PEG單體,90wt%PPG單體) PLU1900(50wt%PEG單體,50wt%PPG單體) PLU2900(40wt%PEG單體,60wt%PPG單體) PLU4400(40wt%PEG單體,60wt%PPG單體) PLU8400(80wt%PEG單體,20wt%PPG單體) na=無活性 ***=未測試

表12:含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團和二烷氧基接頭的

????????????????PLURONIC聚合物的IC50值 ???實例 ??PLU ??MW 疏水基團(R) ????二烷氧基 ????(Z1) IC50(mM)三 丁酸甘油酯 IC50(μM) 棕櫚油 ????61 ??1900 ??n-戊基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????1.8 ????na ????62 ??1900 ??n-癸基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????1.1 ????289 ????63 ??1900 ??n-十六烷基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????1.1 ????278 ????66 ??1900 ??n-十六烷基 ??n-十一烷基-1,10-二氧 ????0.8 ????182

表13:含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團和二烷氧基接頭

???????????????的聚乙二醇聚合物的IC50值 ??實例 ??PEG ??MW 疏水基團(R) ????二烷氧基 ??????(Z1) IC50(mM)三 丁酸甘油酯 IC50(μM) ??棕櫚油 ??67 ??1500 ??n-己基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????71 ????na ??68 ??1500 ??n-十二烷基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????58 ????371 ??69 ??1500 ??n-十六烷基 ??n-戊基-1,5-二氧 ????49 ????184

表14:含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團的BRIJ聚合物的

?????????????????????????IC50值 ????實例 ????聚合物 疏水基團(R) ??IC50(mM) 三丁酸甘油酯 IC50(μM) ??棕櫚油 ????70 ?BRIJ98(n=19,x=17) n-十二烷基 ????*** ????*** ????71 ?BRIJ98(n=19,x=17) n-十六烷基 ????250 ????266 ????72 ?BRIJ35(n=22,x=11) n-十二烷基 ????1800 ????275 ????73 ?BRIJ35(n=22,x=11) n-十六烷基 ????1900 ????392 ????74 ?BRIJ58(n=19,x=15) n-十二烷基 ????1100 ????168 ????75 ?BRIJ58(n=19,x=15) n-十六烷基 ????2200 ????428

表15:含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團的IGEPAL聚合物

???????????????????????的IC50值 ?實例 ????聚合物 ??疏水基團(R) ??IC50(mM) 三丁酸甘油酯 IC50(μM) ??棕櫚油 ??76 ??IGEPAL720(n=11) ??n-十二烷基 ????*** ????*** ??77 ??IGEPAL720(n=11) ??n-十六烷基 ????*** ????*** ??78 ??IGEPAL890(n=39) ??n-十二烷基 ????344 ????148 ??79 ??IGEPAL890(n=39) ??n-十六烷基 ????*** ????***

表16:含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團的PPG-PEG-

????????????????PPG聚合物的IC50值 實例 ????聚合物 ?疏水基團(R) ??IC50(μM) 三丁酸甘油酯 ??IC50(μM) ??棕櫚油 ??81 ?PPG-PEG-PPG2000 ?n-十二烷基 ????2.4 ????283 ??82 ?PPG-PEG-PPG2000 ?n-十六烷基 ????1.9 ????384

表17:含n-十六烷基疏水基團和不同離去基團的PLURONIC

????????????????????聚合物的IC50值 ?實例 ????PLU ???分子量 ????離去基團 ????(Z-R1) ??IC50(μM) 三丁酸甘油酯 ??IC50(μM) ??棕櫚油 ??83 ????2900 ????氯 ????0.9 ????968 ??84 ????2900 ????n-羥基琥珀酰 ????0.9 ????na ??85 ????2900 ????吡哆素基 ????0.09 ????936

體內研究

與對照組相比,在正常鼠中經6天時間,評估實例8,35, 36,41,42,48,62,63,67-69,71-75,78,81和82通過 增加排泄物中的脂肪排泄而降低每日熱量吸收并降低體重的增 加的能力。雄性Sprague-Dawley鼠(5到6周齡)分別關住并自 由喂給粉末“高脂肪食物”,包括補充有15%重量比脂肪(包括 55%可可油和45%玉米油)的標準嚙齒動物食物。將這種食物喂 給動物5天后,稱重動物并分類成治療組和對照組(每組6-8 只動物,每組具有相同的平均體重)。用測試化合物治療動物6 天,測試化合物加在“高脂肪食物”中,濃度(w/w)占食物的 0.0%(對照組),0.3或1.0百分比。

測量每只動物在整個研究過程中食物消耗,并表示為每只動 物在6天治療期間消耗的總食物量。在第6天,稱重動物,計算 治療期間的總體重增加。

治療6天中的最后3天收集鼠排泄物樣品。將樣品凍干并磨 成粉末。稱出樣品克數的一半轉移到提取細胞中。樣品在加速溶 劑提取器(ASE200加速溶劑提取器,Dyonex公司,Sunnyvale, CA)中用95%乙醇,5%水和100mM氫氧化鉀提取。樣品在150 ℃1500psi提取17分鐘。將提取物的等分份轉移到含過量摩爾 數的鹽酸的測試試管中。然后蒸發樣品并再置于含2%Triton X-1200,1%聚氧乙烯月桂基醚和0.9%氯化鈉的清潔劑溶液中。 用比色工具(德國Neuss,Wako?Chemical?GmbH,NEFAC)從酶上 定量脂肪酸。

表18包括對照動物和測試動物的排泄物脂肪/消耗脂肪(如 上面從酶上確定的)的值,以及與對照動物相比經6天時間食物 消耗和體重的增加。

排泄物脂肪/消耗脂肪的計算:

酶測試得到的脂肪酸濃度表示為毫摩爾/毫升。毫摩爾/毫升 的脂肪酸乘以從500mg樣品中得到提取物的毫升數,得到脂肪 酸的總毫摩爾數。使用中鏈到長鏈脂肪酸的平均分子量將脂肪酸 的總毫摩爾值轉換為脂肪酸的總毫克值。這個值對于樣品處理期 間的任何稀釋都是正確的。當結果表示為mgs/gm排泄物時,脂 肪酸的總毫克數乘以2。當結果表示為24小時內排泄脂肪酸的總 毫克數時,mgs/gm排泄物值乘以24小時內排泄的排泄物重量克 數。當結果表示為24小時內排泄脂肪占消耗脂肪的百分比時, 24小時內排泄的脂肪除以24小時消耗的脂肪酸的重量并乘以 100。

表18:選取的含脂肪酶抑制基團的聚合物的體內研究結果 化合 物號 類型 主鏈 疏水基團 排泄物脂肪 占消耗的% 對照物消耗 食物總量% ?對照物總 ?重變化% 8 磷酸酯 PEG1000 十六烷基 2????0.5 ?87??2.8** ?66??9.8** 67 磷酸酯 C5PEG1500 己基 3????0.7 ?97??7.8 ?127?64.4 68 磷酸酯 C5PEG1500 十二烷基 2????0.5 ?99??12.2 ?82??15.4 69 磷酸酯 C5PEG1500 十六烷基 3????0.8 ?105?5.5 ?92??8.7 35 磷酸酯 PLU1900 癸基 23???5 ?58??10** ?-9??17** 35 磷酸酯 PLU1900 十二烷基 12???3 ?62??18** ?16??18** 42 磷酸酯 PLU2900 十六烷基 13???2.5** ?86??8.6** ?75??16.1** 41 磷酸酯 PLU2900 十八烷基 15???3.5** ?91??6.2* ?82??6.6** 48 磷酸酯 PLU4400 十二烷基 4????1** ?96??7 ?79??8** 81 磷酸酯 PPG-PEG-PPG 十二烷基 2????0 ?92??8 ?78??11** 82 磷酸酯 PPG-PEG-PPG 十六烷基 2????0 ?114?8 ?129?12** 62 磷酸酯 C5PLU1900 癸基 12???3.2 ?47??2.6 ?-24?13.6** 63 磷酸酯 C5PLU1900 十六烷基 6????1** ?90??5** ?77??13.3** 71 磷酸酯 Brij98 十六烷基 2????1 ?98??6 ?85??11 72 磷酸酯 Brij35 十二烷基 1????0 ?95??5 ?73??13** 73 磷酸酯 Brij35 十六烷基 1????0 ?106?10 ?122?17** 74 磷酸酯 Brij58 十二烷基 2????0 ?90??5** ?61??14 75 磷酸酯 Brij58 十六烷基 1????0 ?104?8 ?100?12 78 磷酸酯 Lgepa1890 十二烷基 1????0 ?93??5 ?72??13** 對照物 2-3 ?100 ?100

動物用1.0%劑量治療

*p<0.05

**p<0.01

雖然本發明已特別演示并描述了其較好的具體實施,但本領 域中的技術人員應該理解的是,在不背離本發明的精神和所附權 利要求書所限定的本發明范圍的情況下,可作形式上和細節上的 多種變化。本領域中的技術人員可認出或僅使用常規試驗能確 定,本文特別描述的本發明的特別具體實施的許多等同物。這樣 的等同物都包括在本發明的范圍內。

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