鬼佬大哥大
  • / 13
  • 下載費用:30 金幣  

一種丹參紅花凍干粉針劑及其制備方法.pdf

關 鍵 詞:
一種 丹參 紅花 干粉 針劑 及其 制備 方法
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
摘要
申請專利號:

CN200410058503.0

申請日:

20040816

公開號:

CN1626227A

公開日:

20050615

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K35/78,A61K9/19,A61P9/10 主分類號: A61K35/78,A61K9/19,A61P9/10
申請人: 張正生
發明人: 張正生
地址: 100036北京市海淀區蓮花小區1號樓1門1801室
優先權: CN200410058503A
專利代理機構: 代理人:
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN200410058503.0

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種由丹參和紅花組成的丹紅凍干粉針劑及其制備工藝,本發明工藝在用水加熱提取時,加入了水溶性抗氧化劑,防止了有效成分的氧化分解,并采用高速離心、大孔吸附樹脂柱吸附等手段精制、純化,進一步采用中空纖維柱超濾,提高了本發明注射用凍干粉針劑的療效和質量,適宜于工業化生產。

權利要求書

1、一種丹參紅花凍干粉針劑,其特征在于是由下述方法制備的:(1)用含抗氧劑的水溶液提取;(2)采用高速離心法分離提取液;(3)用大孔樹脂吸附精制;(4)用溶劑萃取法進一步純化;(5)用超濾方法進一步精制;(6)提取有效成分與凍干賦形劑混合。2、根據權利要求1所述的一種丹參紅花凍干粉針劑,其特征在于它包括以下步驟:(1)取丹參藥材,粉碎成粗粉,用含抗氧劑的水溶液加熱煎煮提取3-5次,每次60~90min,合并提取液并高速離心,離心液用酸液調pH值至2-4,冷藏,濾過,濾液加到已處理好的大孔吸樹脂柱上,先用2-5倍量樹脂柱體積的水洗去雜質,再用20%-50%的乙醇3-5倍量洗脫,收集20%-50%的乙醇洗脫液,減壓回收溶劑至藥液與生藥量之比為1∶1-2,用有機溶劑萃取3-5次,萃取液合并,減壓回溶劑至干,即得丹參總酚酸類成分;(2)取紅花,粉碎成粗粉,用含抗氧劑的水溶液加熱煎煮提取3-5次,每次60~90min,合并提取液,提取液高速離心,離心液加到已處理好的大孔吸樹脂柱上,先用2-5倍量樹脂柱體積的水洗去雜質,再用20%-50%的乙醇3-5倍量洗脫,收集20%-50%的乙醇洗脫液,減壓回溶劑至干,即得紅花總黃色素類成分;(3)分別取丹參總丹酚酸和紅花總黃素,加注射用水溶解,使每1ml的藥液相當于1g生藥,超濾,超濾液加5%-8%的注射用凍干賦形劑,攪拌加熱至沸,用0.1-0.2%的活性炭煮沸15min,趁熱濾過,濾液以微孔濾膜濾過,灌裝于西林瓶,冷凍干燥,軋蓋,即得。3、根據權利要求1或2所述的粉針劑,其中含抗氧劑的水溶液中的抗氧劑是亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或者維生素C中的一種,抗氧劑在水溶液中的含量為0.1%-0.3%。4、根據權利要求1或2中所述的粉針劑,其中高速離心法分離提取液時的離心速度為10000~20000r/min。5、權利要求1或2中所述的粉針劑,其中大孔吸附樹脂是D,AB-8,D-4020,D-3520和X-5中的一種。6、根據權利要求1或2所述的粉針劑,其中溶劑萃取時用于萃取的溶劑是乙酸乙酯,水飽和的正丁醇中的一種。7、根據權利要求1或2所述的粉針劑,其中用于超濾的介質是截流分子量為3000的中空纖維柱和0.22μm的微孔濾膜。

說明書

?

所屬技術領域

本發明屬中藥制藥技術領域,具體涉及一種由丹參和紅花組成的 中藥丹紅注射液和注射用凍干粉針劑及其制備工藝。

背景技術

丹參為傳統中藥,臨床上廣泛用于心腦血管系統方面的疾病治 療,其主要活性成分為水溶性丹酚酸類成分,包括丹酚酸A~C、迷 迭香酸及其甲酯、丹參素、原兒茶醛、原兒茶酸等化學成分,具有抗 血小板聚集、抗血栓形成、改善微循環、抗氧化損傷等作用,因此能 多途徑發揮作用起到保護心肌和心腦血管系統的作用。國內對丹參水 溶性成分的研究均采用水加熱提取后過大孔樹脂,然后再過聚酰胺柱 的方法,或先過聚酰胺柱,再過大孔樹脂柱的方法,不僅成本高、周 期長,而且得率低。中國專利CN98111076、CN02160771、CN02155004 均采用上述方法。丹酚酸為多元酚結構,易被氧化降解,不易長時間 受熱,上述諸方法要么直接用水加熱煎煮,要么在100℃以下浸漬, 存在著有效成分易氧化分解或提取不完全的缺點。

紅花為中藥中活血化瘀的代表性藥,其提取物具有抗心肌缺血、 抗血小板激活因子、抗炎等多方面的心腦血管藥理活性。多年來,國 內外對紅花進行了大量研究,發現其含有的紅花總黃色素為其主要活 性成分。目前,國內對紅花總黃色素的提取制備也采用水提取,過大 孔樹脂柱,然后再過聚酰胺柱的精制方法制備,如中國專利 CN02133563、CN99123731等。

以丹參和紅花組方的丹紅注射液在臨床上對冠心病、心絞痛、腦 血管病等多種疾病具有較好的療效。現行部頒標準采用稀醇提丹參 后,醇提后的藥渣再與紅花共水提的方法,純化效果不好,有效成分 的含量不高,制成的注射液水針劑既不穩定,也不便于運輸,因此, 其理想劑型為凍干粉針劑。

發明內容

本發明針對現有技術的不足,根據丹參和紅花中有效成分受熱易 氧化分解的特點,對丹參和紅花分別采用含有抗氧化劑的水溶液提取 的方案,較好的解決了上述問題,且其工藝簡單、成本低,適宜于工 業化生產;另外,分別根據丹參和紅花中所含有效成分理化特點,采 用不同的方法對其進行精制純化。對紅花、丹參提取液采用高速離心 后,分別上大孔吸附樹脂柱,先用水洗去雜質,再分別用低濃度的醇 洗脫,得到其有效部位,對有效部位再進一步采用有機溶劑萃取。分 別得到丹參總酚酸和紅花總黃色素后,將二者用適量注射用水溶解, 過截留分子量為3000的中空纖維柱超濾,可以除去熱原和大分子鞣 質,并能顯著提高注射液的澄明度。

本發明通過以下技術方案實現:

(1)取丹參藥材,粉碎成粗粉,用含有0.1%-0.3%抗氧劑水溶液( 抗氧劑可以是亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或者維生素C中任一種)加 熱煎煮提取3-5次,每次60~90min,合并提取液并高速離心(10000~ 20000r/min),離心液用酸液調pH值至2-4,冷藏,濾過,濾液加到 已處理好的大孔吸樹脂柱上,先用2-5倍量樹脂柱體積的水洗去雜質, 再用20%-50%的乙醇3-5倍量洗脫,收集20%-50%的乙醇洗脫液, 減壓回收溶劑至藥液與生藥量之比為1∶1-2,用水飽和的正丁醇或醋 酸乙酯進行萃取,萃取液減壓回收溶劑至干,即得丹參總酚酸類成分。

(2)取紅花,粉碎成粗粉,用含有0.1%-0.3%抗氧劑的水溶液(抗 氧劑可以是亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或者維生素C中任一種)加熱 煎煮提取3-5次,每次60~90min,合并提取液,提取液高速離心 (10000~20000r/min),離心液加到已處理好的大孔吸樹脂柱上,先 用2-5倍量樹脂柱體積的水洗去雜質,再用20%-50%的乙醇3-5倍量 洗脫,收集20%-50%的乙醇洗脫液,減壓回收溶劑至干,即得紅花 總黃色素類成分。

(3)分別取丹參總丹酚酸和紅花總黃色素,加注射用水溶解,使 每1ml的藥液相當于1g生藥,過截留分子量為3000的中空纖維柱超 濾,超濾液加5%-8%的注射用凍干賦形劑,攪拌加熱至沸,用0.1% 的活性炭煮沸15min,趁熱濾過,濾液以0.22μm的微孔濾膜濾過, 灌裝于西林瓶,冷凍干燥,軋蓋,即得本發明的丹紅凍干粉針。

下面通過藥理實驗對本發明的有益效果作進一步的說明

實驗一:不同提取方法對丹參素和紅花黃色素得率的影響.

1.不同提取方法對丹參素得率的影響

丹參傳統提取方法是采用水煎煮3次,每次2小時;本發明方法 采用含有0.1%-0.3%抗氧劑的水溶液煎煮4次,每次1.5小時。精密稱 取丹參2份,每份10克。1份采用傳統提取方法,每次加入10倍量水, 提取3次,每次提取液過濾后,定容至200ml;另1份采用本發明方法 提取,每次加入10倍量含有0.1%亞硫酸氫鈉的水溶液,煎煮1.5小 時,每次提取液過濾后,定容至200ml。參照陳彥等方法(江蘇中醫 藥.2003年24卷6期),采用高效液相色譜法測定,結果見表1。

???????????表1??不同提取方法對丹參素得率的影響 ????傳統水提取法 次數丹?參素含量(mg/g)??累積含量(mg/g) ????本發明提取法 次數?丹參素含量(mg/g)???累積含量(mg/g) 1??????1.6728??????????1.6728 1????2.0364?????????????2.0364* 2??????1.0321??????????2.7049 2????1.1437?????????????3.1801* 3??????0.4137??????????3.1186 3????0.7253?????????????3.9054* 4????0.3482?????????????4.2536**

*p<0.05??**p<0.01

2.不同提取方法對紅花總黃色素得率的影響

紅花黃色素傳統提取方法是采用50-100倍量水煎煮3次,每次2 小時;本發明提取方法是采用50-100倍量含0.1%-0.3%抗氧劑的 水溶液煎煮3次,每次1.5小時。

精密稱取紅花6份,每份1.0克。3份采用傳統提取方法,每次加 入100ml水,提取3次,提取液過濾,合并3次濾液,定容至300ml;另3 份采用本發明方法提取,每次加入100ml含有0.1%維生素C的水溶 液,煎煮1.5小時,提取液過濾,合并3次濾液,定容至300ml。參照 祝明等方法(中藥材.2000年23卷8期)方法,采用高效液相色譜法 測定,結果見表2。

表2??不同提取方法對紅花總黃色素得率的影響

????傳統提取方法 ??樣品號??實測量(mg/g) ????本發明提取方法 ????樣品號???實測量(mg/g) ??1???????8.3254 ????1????????8.8647 ??2???????7.9637 ????2????????9.0346 ??3???????8.1452 ????3????????9.1085

將二種提取方法3個樣品實測量相加后比較,可以看到本發明方 法的紅花總黃色素得率較傳統提取方法的提高了10.5%。

實驗二:本發明的丹紅凍干粉針劑、丹紅注射液對大鼠血液流變 學的影響

一、實驗材料

SD大白鼠:由第一軍醫大學實驗動物中心提供,60只,體重200 ±20g,雄性。腎上腺素,上海生物化學制藥廠;丹紅注射液,三江 制藥有限公司生產;丹紅凍干粉針制劑(丹紅凍干粉針制劑20mg與 丹紅注射液1ml所含生藥量相當),廣東天之驕藥物開發有限公司實 驗室提供;丹參注射液,正大天晴制藥有限公司。

二、實驗方法

大鼠60只隨機分6組:A正常對照組(生理鹽水組)、B血淤模 型組、C丹紅注射劑組0.15ml/kg、D丹紅注射劑組0.3ml/kg、E丹 紅凍干粉針劑組1.5mg/kg、F丹紅凍干粉針劑組3mg/kg、G陽性對照 丹參注射液組0.3ml/kg。每日1次,連續im給藥7d,末次給藥后 30min,除對照組用0.9%NS外,其余各組均皮下注射0.1%腎上腺 素(0.9mg/kg),30min后將大鼠放入冰水中冷浴8min,間隔2h后再 注射等量腎上腺素,制備血淤模型。腹主動脈取血5ml,肝素抗凝, 測定10s-1、40s-1、200s-1全血粘度、血漿比粘度、紅細胞壓積。實 驗室溫度控制在(20±1)℃。

三、實驗結果

與正常組相比,血淤模型組低、中、高切率的全血粘度、血漿比 粘度、纖維蛋白原、紅細胞壓積均明顯升高(P<0.01),說明模型可 靠。與模型組相比,丹紅凍干粉針劑及注射液組,陽性對照丹參注射 液組均能明顯改善血液流變學指標(P<0.05);丹紅凍干粉針劑組療 效優于注射液組,實驗結果見表3。

表3??丹紅注射制劑對急性血淤模型大鼠血液流變學的影響(x±s,n=10)

????????????????????????????氣血粘度

組???????????????????????????????????????????????????????血漿???????紅細

?????劑量???????????10

別???????????????????????????40s-1???????????200s-1????比粘度?????胞壓積

????????????????????s-1

????????????????????20.87?????????????????????6.91???????1.45???????0.42

A????-???????????????????????11.44±2.73

????????????????????±5.16????????????????????±1.02?????±0.10?????±0.03

????????????????????38.25??????????????????????8.29??????1.85???????0.48

B????-???????????????????????16.65±2.43*

????????????????????±9.04*??????????????????±0.59*??±0.05*???±0.03*

????????????????????21.64??????????????????????6.48??????1.68???????0.39

C????1.5mg/kg????????????????11.73±2.23a

????????????????????±5.26a??????????????????±0.43a??±0.04a???±0.02a

????????????????????17.43??????????????????????6.43??????1.67???????0.39

D????3mg/kg??????????????????9.81±1.33a

????????????????????±2.46a??????????????????±0.53a??±0.13a???±0.03a

????????????????????28.36??????????????????????7.57??????1.70???????0.40

E????0.15ml/kg???????????????14.36±3.24

????????????????????±9.47a??????????????????±0.58a??±0.14?????±0.02a

????????????????????23.76??????????????????????6.98??????1.68???????0.39

F????0.3ml/kg????????????????12.08±3.34a

????????????????????±4.82a??????????????????±0.56a??±0.07a???±0.04a

????????????????????22.18??????????????????????6.65??????1.66???????0.40

G????0.3ml/kg????????????????11.25±2.09a

????????????????????±4.74a??????????????????±0.78a??±0.11a???±0.04a

注:*與正常組比較P<0.01,a與模型組比較P<0.05

具體實施方式

實施例一:規格10000瓶

(1)取丹參藥材15000g,粉碎成粗粉,用含有0.1%亞硫酸氫鈉水 溶液加熱煎煮提取3次,每次60min,合并提取液,以20000r/min高 速離心,離心液用鹽酸調pH值至2,冷藏,濾過,濾液加到已處理 好的D101大孔吸樹脂柱上,先用2倍量樹脂柱體積的水洗去雜質,再 用30%的乙醇3倍量洗脫,收集30%的乙醇洗脫液,減壓回收乙醇 至藥液與生藥量之比為1∶2,用醋酸乙酯萃取4次,萃取液合并后 減壓回收溶劑至干,即得丹參總酚酸類成分。

(2)取紅花5000g,濕法粉碎,用含有0.1%的維生素C水溶液加 熱煎煮提取3次,每次60min,合并提取液,高速離心(20000r/min), 離心液加到已處理好的D-4020大孔吸樹脂柱上,先用2倍量樹脂柱 體積的水洗去糖類等雜質,再用3倍于樹脂柱體積的30%的乙醇洗 脫,收集30%的乙醇洗脫液,減壓回收溶劑至干,即得紅花總黃色素 類有效部位。

(3)分別取丹參總丹酚酸和紅花總黃色素,加新制的注射用水溶 解,使每1ml的藥液相當于1g生藥,過截留分子量為3000的中空纖 維柱超濾,超濾液加6%(w/v)的注射用凍干賦形劑,攪拌加熱至沸, 加入0.1%的活性炭煮沸15min,趁熱濾過,濾液以0.22μm的微孔 濾膜濾過,灌裝于西林瓶,冷凍干燥,軋蓋,即得。

實施例二:規格1000瓶

(1)取丹參藥材1500g,粉碎成粗粉,用含有0.1%焦亞硫酸鈉水溶 液加熱煎煮提取3次,每次90min,合并提取液并高速離心 (10000r/min),離心液用鹽酸調pH值至2.4,冷藏,濾過,濾液加 于已處理好的AB-8型大孔吸樹脂柱上,先用2倍量樹脂柱體積的水 洗脫,再用40%的乙醇4倍量洗脫,收集40%的乙醇洗脫液,減壓 回收至藥液與生藥量之比為1∶2,用水飽和的正丁醇萃取3次,萃 取液減壓回收溶劑至干,即得丹參總酚酸類成分。

(2)取紅花500g,濕法粉碎,用含有0.1%亞硫酸氫鈉的水溶液加 熱煎煮提取3次,每次90min,合并提取液,提取液高速離心 (10000r/min)后加到已處理好的X-5型大孔吸樹脂柱上,先用3倍 量樹脂柱體積的水洗去雜質,再用3倍量40-50%的乙醇洗脫,收集 40-50%的乙醇洗脫液,減壓回收溶劑至干,即得紅花總黃色素類有 效部位。

(3)分別取丹參總丹酚酸和紅花總黃素,加新制的注射用水溶解, 使每1ml的藥液相當于1g生藥,過截留分子量為3000的中空纖維柱 超濾,超濾液加5%的注射用甘露醇,攪拌加熱至沸,用0.1%的活性 炭煮沸15min,趁熱濾過,濾液以0.22μm的微孔濾膜濾過,灌裝于 西林瓶,冷凍干燥,軋蓋,即得本發明的丹紅凍干粉針。

實施例三:規格5000瓶

(1)取丹參藥材7500g,粉碎成粗粉,用含有0.1%的維生素C水 溶液加熱煎煮提取4次,每次60min,合并提取液并高速離心 (15000r/min),離心液用酸液調pH值至2,冷藏,濾過,濾液加到 已處理好的D101大孔吸樹脂柱上,先用2倍量樹脂柱體積的水洗脫, 棄去水洗脫液,再用3倍于樹脂柱體積30%的乙醇洗脫,收集30% 的乙醇洗脫液,減壓回收溶劑至藥液與生藥量之比為1∶2,用醋酸 乙酯萃取4次,萃取液減壓回溶劑至干,即得丹參總酚酸類成分。

(2)取紅花2500g,濕法粉碎后用含有0.1%的焦亞硫酸鈉水溶液 加熱煎煮提取5次,每次60min,合并提取液,提取液高速離心 (20000r/min),離心液加到已處理好的D-3520型大孔吸樹脂柱上, 先用2倍量樹脂柱體積的水洗去雜質,再用25%的乙醇5倍量洗脫, 收集25%的乙醇洗脫液,低溫減壓回收溶劑至干,即得紅花總黃色素 類有效部位。

(3)分別取丹參總丹酚酸和紅花總黃素,加注射用水溶解,使每 1ml的藥液相當于1g生藥,過截留分子量為3000的中空纖維柱超濾, 超濾液加8%的乳糖,攪拌加熱至沸,用0.1%的活性炭煮沸15min, 趁熱濾過,濾液以0.22μm的微孔濾膜濾過,灌裝于西林瓶,冷凍干 燥,軋蓋,即得本發明的丹紅凍干粉針。

實施例四:規格20000瓶

(1)取丹參藥材30000g,粉碎成粗粉,用含有0.1%的維生素C水 溶液加熱煎煮提取4次,每次60min,合并提取液并高速離心 (10000r/min),離心液用酸液調pH值至3,冷藏,濾過,濾液加到 已處理好的D101大孔吸樹脂柱上,先用2倍量樹脂柱體積的水洗脫, 棄去水洗脫液,再用3倍于樹脂柱體積30%的乙醇洗脫,收集30% 的乙醇洗脫液,減壓回收溶劑至藥液與生藥量之比為1∶2,用醋酸 乙酯萃取4次,萃取液減壓回溶劑至干,即得丹參總酚酸類成分。

(2)取紅花10000g,濕法粉碎后用含有0.1%的焦亞硫酸鈉水溶液 加熱煎煮提取5次,每次60min,合并提取液,提取液高速離心 (10000r/min),離心液加到已處理好的D-3520型大孔吸樹脂柱上, 先用2倍量樹脂柱體積的水洗去雜質,再用25%的乙醇5倍量洗脫, 收集25%的乙醇洗脫液,低溫減壓回收溶劑至干,即得紅花總黃色素 類有效部位。

(3)分別取丹參總丹酚酸和紅花總黃素,加注射用水溶解,使每 1ml的藥液相當于1g生藥,過截留分子量為3000的中空纖維柱超濾, 超濾液加8%的乳糖,攪拌加熱至沸,用0.1%的活性炭煮沸15min, 趁熱濾過,濾液以0.22μm的微孔濾膜濾過,灌裝于西林瓶,冷凍干 燥,軋蓋,即得本發明的丹紅凍干粉針。

關于本文
本文標題:一種丹參紅花凍干粉針劑及其制備方法.pdf
鏈接地址:http://www.wwszu.club/p-6765637.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開
鬼佬大哥大