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一種藍莓組織培養方法.pdf

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一種 藍莓 組織培養 方法
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摘要
申請專利號:

CN201810049740.2

申請日:

20180118

公開號:

CN108064696A

公開日:

20180525

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 廣西正匠農業科技有限公司
發明人: 黎海波
地址: 545000 廣西壯族自治區柳州市魚峰區洛維工業集中區(E-05-1號地塊)標準廠房南面一層第8間
優先權: CN201810049740A
專利代理機構: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 代理人: 寧霞光
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201810049740.2

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種藍莓組織培養方法,其利用嫩枝條帶芽莖段作為外植體先接種第一培養基中進行不定芽誘導培養,不定芽誘導培養完成后接種到第二培養基中進行增殖培養,增殖培養完成后接種到第三培養基中進行生根培養,最后將生根組培苗置于室溫光照條件下煉苗7?9天,用1000倍多菌靈溶液消毒后移栽至蛭石和珍珠巖混合基質中,移栽后蓋膜或噴霧保濕。利用本發明的方法對藍莓進行繁殖培養,成功率高達83.4%,組培苗生長好,成活率高達93.8%,且根系發達、植株健壯,長勢強。

權利要求書

1.一種藍莓組織培養方法,其特征在于包括以下步驟:(1)選取外植體,選取當年生嫩枝條帶芽莖段,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗2-3遍,然后用75%的酒精浸泡10-20s,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗2-3遍,然后用0.1%氯化汞或2.0%次氯酸納浸泡7-10min,最后用無菌水沖洗2-3遍;(2)將外植體接種到第一培養基中進行不定芽誘導培養,所述第一培養基為:1/2MS、ZT1mg/L、IBA0.5mg/L、NAA0.05mg/L;(3)不定芽誘導培養完成后接種到第二培養基中進行增殖培養,所述第二培養基為:1/2MS、BA0.5mg/L、6-BA1mg/L、NAA0.05mg/L;(4)增殖培養完成后接種到第三培養基中進行生根培養,所述第三培養基為:1/4MS、IBA0.5mg/L、ABT0.1mg/L、NAA0.1mg/L;(5)將生根組培苗置于室溫光照條件下煉苗7-9天,用1000倍多菌靈溶液消毒后移栽至蛭石和珍珠巖混合基質中,移栽后蓋膜或噴霧保濕,所述蛭石和珍珠巖的質量比為1:1。2.根據權利要求1所述的藍莓組織培養方法,其特征在于所述的培養條件為:白天溫度為24±1℃,夜晚溫度20±1℃,光照強度為1500-2000lx,每天光照時間為12-14h。3.根據權利要求1所述的藍莓組織培養方法,其特征在于不定芽誘導培養時間為25-30d。4.根據權利要求1所述的藍莓組織培養方法,其特征在于增殖培養時間為25-30d。5.根據權利要求1所述的藍莓組織培養方法,其特征在于生根培養時間為10-15d。

說明書

技術領域

本發明涉及植物組織培育技術領域,具體涉及一種藍莓組織培養方法。

背景技術

藍莓,又名越橘、藍漿果,杜鵑花科越橘屬植物,是多年生落葉或常綠灌木果樹。其漿果含有豐富的花青素,具有防止腦神經系統老化、抗癌、軟化血管、增強人機體免疫力等功能,被國際糧農組織認定為五大健康食品之一,擁有“黃金漿果”的美譽。藍莓作為一種新型水果,經濟價值和營養保健價值較高,具有廣闊的開發利用前景。近年來,藍莓種植面積日益擴大,但常規的扦插育苗方式培養周期長、成本高、繁殖效率低,而組織培養技術可顯著縮短藍莓苗的培養周期,繁殖系數高,可培育無病毒植株。

發明內容

針對上述現有技術的不足,本發明的目的是提供一種藍莓組織培養方法。

本發明采取的技術方案是:

一種藍莓組織培養方法,包括以下步驟:

(1)選取外植體,選取當年生嫩枝條帶芽莖段,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗2-3遍,然后用75%的酒精浸泡10-20s,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗2-3遍,然后用0.1%氯化汞或2.0%次氯酸納浸泡7-10min,最后用無菌水沖洗2-3遍;

(2)將外植體接種到第一培養基中進行不定芽誘導培養,所述第一培養基為:1/2MS、ZT 1mg/L、IBA0.5mg/L、NAA0.05mg/L;

(3)不定芽誘導培養完成后接種到第二培養基中進行增殖培養,所述第二培養基為:1/2MS、BA0.5mg/L、6-BA1mg/L、NAA0.05mg/L;

(4)增殖培養完成后接種到第三培養基中進行生根培養,所述第三培養基為:1/4MS、IBA 0.5mg/L、ABT0.1mg/L、NAA0.1mg/L;

(5)將生根組培苗置于室溫光照條件下煉苗7-9天,用1000倍多菌靈溶液消毒后移栽至蛭石和珍珠巖混合基質中,移栽后蓋膜或噴霧保濕,所述蛭石和珍珠巖的質量比為1:1。

進一步地,所述的培養條件為:白天溫度為24±1℃,夜晚溫度20±1℃,光照強度為1500-2000lx,每天光照時間為12-14h。

進一步地,不定芽誘導培養時間為25-30d。

進一步地,增殖培養時間為25-30d。

進一步地,生根培養時間為10-15d。

本發明的優點是:利用本發明的方法對藍莓進行繁殖培養,成功率高達83.4%,組培苗生長好,成活率高達93.8%,且根系發達、植株健壯,長勢強。

具體實施方式

為了進一步理解本發明,下面結合實施例對本發明優選實施方案進行描述,但是應當理解,這些描述只是為進一步說明本發明的特征和優點,而不是對本發明權利要求的限制。

實施例1

一種藍莓組織培養方法,包括以下步驟:

(1)選取外植體,選取當年生嫩枝條帶芽莖段,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗2遍,然后用75%的酒精浸泡10s,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗2遍,然后用0.1%氯化汞浸泡7min,最后用無菌水沖洗2遍;

(2)將外植體帶入實驗室進行培養,培養條件為:白天溫度為23℃,夜晚溫度19℃,光照強度為1500lx,每天光照時間為12h,首先將外植體接種到第一培養基中進行不定芽誘導培養25d,所述第一培養基為:1/2MS、ZT 1mg/L、IBA0.5mg/L、NAA0.05mg/L;

(3)不定芽誘導培養完成后接種到第二培養基中進行增殖培養25d,所述第二培養基為:1/2MS、BA0.5mg/L、6-BA1mg/L、NAA0.05mg/L;

(4)增殖培養完成后接種到第三培養基中進行生根培養10d,所述第三培養基為:1/4MS、IBA 0.5mg/L、ABT0.1mg/L、NAA0.1mg/L;

(5)將生根組培苗置于室溫光照條件下煉苗7天,用1000倍多菌靈溶液消毒后移栽至蛭石和珍珠巖混合基質中,移栽后蓋膜或噴霧保濕,所述蛭石和珍珠巖的質量比為1:1。

本實施例外植體成功率為80.3%,組培苗成活率為91.5%。

實施例2

一種藍莓組織培養方法,包括以下步驟:

(1)選取外植體,選取當年生嫩枝條帶芽莖段,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗3遍,然后用75%的酒精浸泡15s,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗3遍,然后用0.1%氯化汞浸泡8min,最后用無菌水沖洗3遍;

(2)將外植體帶入實驗室進行培養,培養條件為:白天溫度為24℃,夜晚溫度20℃,光照強度為1800lx,每天光照時間為13h,首先將外植體接種到第一培養基中進行不定芽誘導培養28d,所述第一培養基為:1/2MS、ZT 1mg/L、IBA0.5mg/L、NAA0.05mg/L;

(3)不定芽誘導培養完成后接種到第二培養基中進行增殖培養28d,所述第二培養基為:1/2MS、BA0.5mg/L、6-BA1mg/L、NAA0.05mg/L;

(4)增殖培養完成后接種到第三培養基中進行生根培養13d,所述第三培養基為:1/4MS、IBA 0.5mg/L、ABT0.1mg/L、NAA0.1mg/L;

(5)將生根組培苗置于室溫光照條件下煉苗8天,用1000倍多菌靈溶液消毒后移栽至蛭石和珍珠巖混合基質中,移栽后蓋膜或噴霧保濕,所述蛭石和珍珠巖的質量比為1:1。

本實施例外植體成功率為82.8%,組培苗成活率為93.5%。

實施例3

一種藍莓組織培養方法,包括以下步驟:

(1)選取外植體,選取當年生嫩枝條帶芽莖段,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗3遍,然后用75%的酒精浸泡20s,用自來水沖洗干凈再用無菌水沖洗3遍,然后用2.0%次氯酸納浸泡10min,最后用無菌水沖洗3遍;

(2)將外植體帶入實驗室進行培養,培養條件為:白天溫度為25℃,夜晚溫度21℃,光照強度為2000lx,每天光照時間為14h,首先將外植體接種到第一培養基中進行不定芽誘導培養30d,所述第一培養基為:1/2MS、ZT 1mg/L、IBA0.5mg/L、NAA0.05mg/L;

(3)不定芽誘導培養完成后接種到第二培養基中進行增殖培養30d,所述第二培養基為:1/2MS、BA0.5mg/L、6-BA1mg/L、NAA0.05mg/L;

(4)增殖培養完成后接種到第三培養基中進行生根培養15d,所述第三培養基為:1/4MS、IBA 0.5mg/L、ABT0.1mg/L、NAA0.1mg/L;

(5)將生根組培苗置于室溫光照條件下煉苗9天,用1000倍多菌靈溶液消毒后移栽至蛭石和珍珠巖混合基質中,移栽后蓋膜或噴霧保濕,所述蛭石和珍珠巖的質量比為1:1。

本實施例外植體成功率為82.1%,組培苗成活率為92.8%。

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