鬼佬大哥大
  • / 11
  • 下載費用:30 金幣  

一種武夷山巖茶提取物及其制備方法和應用.pdf

關 鍵 詞:
一種 武夷山 提取物 及其 制備 方法 應用
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
摘要
申請專利號:

CN200910198637.5

申請日:

20091110

公開號:

CN102047997B

公開日:

20130403

當前法律狀態:

有效性:

有效

法律詳情:
IPC分類號: A23F3/18,A61K36/185,A61K8/97,A61P39/06,A61P3/10,A61P25/00,A61P17/00,A61Q19/02 主分類號: A23F3/18,A61K36/185,A61K8/97,A61P39/06,A61P3/10,A61P25/00,A61P17/00,A61Q19/02
申請人: 上海市新文達生物科技有限公司
發明人: 劉桂云,駱峰,駱濱
地址: 201203 上海市浦東張江高科技園區碧波路518號310室
優先權: CN200910198637A
專利代理機構: 上海智信專利代理有限公司 代理人: 薛琦;朱水平
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN200910198637.5

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種武夷山巖茶提取物的制備方法,其包含下列步驟:(1)將武夷山巖茶用乙醇水溶液提取;(2)將步驟(1)提取所得物質用大孔樹脂柱進行分離,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分,即可。其還可包含下列步驟:將步驟(2)所得的物質進行硅膠柱層析分離,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比8∶3∶1,Rf值0.44,Rf值0.27和Rf值0.16的三個餾分中的一個或多個餾分。本發明還涉及上述提取物及其應用。本發明的武夷山巖茶提取物性質穩定、水溶性好,并且與現有的茶多酚苷元相比性質更穩定,活性更高。

權利要求書

1.一種武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于包含下列步驟:(1)將武夷山巖茶用乙醇水溶液提取;(2)將步驟(1)提取所得物質用大孔樹脂柱進行分離,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分;(3)將步驟(2)所得的物質進行硅膠柱層析分離,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.44,Rf值為0.27和Rf值為0.16的三個餾分中的一個或多個餾分;步驟(3)中,在所述的硅膠柱層析分離中,上柱物質與硅膠的質量比為2∶100;硅膠的目數為100目~300目;所述硅膠柱層析的步驟為:用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶劑進行梯度洗脫,梯度為二氯甲烷、甲醇和水的體積比為20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1;每個梯度所用的混合溶劑的用量為150~250ml,以8ml分段收集各餾分,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.44,Rf值為0.27和Rf值為0.16的三個餾分中的一個或多個餾分。2.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:所述的武夷山巖茶原料包括武夷山大紅袍、白雞冠、水金龜、不見天、金鑰匙、醉海棠、醉洞賓、釣金龜、鳳尾草、玉麒麟、一枝香、金錢、竹絲、金柳條、倒葉柳、迎春柳、不知春、肉桂、石乳香和白麝香中的一種或多種。3.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:步驟(1)中,所述的武夷山巖茶為粉碎后使用,粉碎后的粒徑為20~100目;所述的乙醇水溶液的體積濃度為30%~90%;所述的武夷山巖茶與乙醇水溶液的料液比為1g∶5ml~1g∶10ml;所述的提取的溫度為40~70℃,提取的方法為旋轉提取,提取時間為1~3小時。4.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:步驟(1)中還包含下列步驟:將提取所得的提取液過濾,收集濾液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,得濾液,即可。5.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:步驟(2)中,所述的大孔樹脂為D101和/或D201大孔樹脂,上柱原料的重量與大孔樹脂的重量比為1∶1.5~1∶1。6.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:大孔樹脂分離的步驟為:先用蒸餾水進行淋洗,再用乙醇水溶液進行梯度洗脫,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分;其中,乙醇水溶液的梯度范圍為體積濃度30%~90%。7.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:步驟(2)中還包含下列步驟:將大孔樹脂分離得到的餾分濃縮,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,干燥,即可。8.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:步驟(3)中還包含下列步驟:將各餾分的溶液濃縮,干燥,即可。9.如權利要求1所述的武夷山巖茶提取物的制備方法,其特征在于:所述的武夷山巖茶提取物的制備方法包含下列步驟:以武夷山巖茶為原料,粉碎至20~100目,以1g∶5ml~10ml的料液比,加入體積濃度為50%~70%的乙醇水溶液,40~70℃旋轉提取1~3小時,過濾,收集濾液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,濾液過D101型大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水淋洗,再以體積濃度為30%~90%的乙醇水溶液依次梯度洗脫,分別收集洗脫液,每餾分為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同餾分,取第11~25餾分,即收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分,濃縮,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,粉末提取物通過硅膠柱層析分離,依次用體積比例20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1的二氯甲烷、甲醇和水的混合洗脫劑進行梯度洗脫,每個梯度所用的混合溶劑為150ml~250ml,分別收集洗脫液,每餾分8ml,以硅膠薄層層析法檢測,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,合并Rf值為0.44的第7-18餾分,其為DF-3組;合并Rf值為0.27的餾分第19-39餾分,其為DF-2組;合并Rf值為0.16的第45-81餾分,其為DF-1組,將各餾分濃縮,真空干燥,得干燥粉末,即可。10.如權利要求1~9任一項所述的制備方法制得的武夷山巖茶提取物。11.如權利要求10所述的武夷山巖茶提取物在制備清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶、抑制乙酰膽堿酯酶或抑制酪氨酸酶的食品、保健食品、藥物或化妝品中的應用。12.如權利要求10所述的武夷山巖茶提取物在制備具有抗氧化、抗衰老、降血糖、改善記憶和美白中的一種或多種功能的食品、保健食品、藥物或化妝品中的應用。13.如權利要求11或12所述的武夷山巖茶提取物的應用,其特征在于:所述的食品或保健食品為飲品。

說明書

技術領域

本發明具體的涉及一種武夷山巖茶提取物及其制備方法和應用。

背景技術

武夷山巖茶(Wuyi?Mountain?Rock?Tea)歷史悠久,早在二世紀初即開始種植,武夷山巖茶(Wuyi?Mountain?Rock?Tea)具有綠茶之清香,紅茶之甘醇,以武夷山巖茶為原料制成的名茶是茶中之極品,其品種很多,如大紅袍、烏龍茶、鐵觀音、白雞冠、水金龜等名茶。以“大紅袍”(camellia.sinensiscv.dahongpao)最為名貴,享“茶中之王”之譽。大紅袍生長在武夷山風景區內九龍窠的半山崖上,那里群山環抱,重巒疊嶂,幽澗清水長流,常年云霧彌漫。武夷山地屬“丹霞地形”,由砂、礫凝結而成,土質疏松、土壤呈酸性(PH值為4-6),兩旁巖壁矗立,日照不長,溫度適宜,終年有涓涓細泉滋潤茶樹,由枯葉、苔醉等植物腐爛形成的有機物,使土地肥沃而無污染。由于生長環境得天獨厚,武夷山巖茶(Wuyi?Mountain?Rock?Tea)成茶具有獨到的品質和品味,其滋味醇厚,飲后回甘快、余味長,香氣不論高低都持久濃厚,茶冷仍幽香飄逸,且其含有多種化學元素,藥理性質特別顯著。

“大紅袍”作為“茶中之王”,目前市場上常見的有價格昂貴的不同包裝等級的原茶產品,但是關于其進一步深加工、功效成分的提取分離、提取物在保健品、飲品、食品、醫藥、化妝品等方面的應用還尚未見報道。另外,在加工包裝“大紅袍”等原茶產品過程中,一部分老葉子、殘次葉常被作為廢棄葉剔除,而這些殘次葉、老葉中也含有一定量的功效成分如茶多酚黃酮等,將其棄之,造成了很大的浪費。

因此,利用武夷山巖茶“大紅袍”等的下腳料對其功效成分茶多酚進行提取分離,并對其功效性進行進一步的研究,開發食用方便、功效性更好的巖茶提取物保健品(如茶飲料)等將具有廣闊的市場前景,且充分利用了武夷巖茶原料,減少浪費,提高經濟效益。

茶多酚是茶之“靈魂”,研究證明,茶多酚可以清除活性氧自由基、抗氧化、抗衰老、降血壓、降血脂、防輻射、防癌治癌等作用,是一類安全、無毒、多功能的天然抗氧化劑。

但是,茶多酚的主要成分兒茶素的性質非常活潑,在空氣和酸性條件下很容易被氧化,導致其抗氧化能力降低。而且從結構看,其既有疏水性的苯環,又有親水性的羥基,所以該分子既有親水性又有親脂性,但是其在水相和油相中的溶解度都不高,導致其生物活性得不到充分的發揮,影響其在食品、醫藥等領域的應用。

但是,至今尚未見從天然植物巖茶,如“大紅袍”烏龍茶等中直接提取分離含有糖苷的茶多酚。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供了一種與現有的茶葉提取物完全不同的武夷山巖茶提取物,本發明的武夷山巖茶提取物性質穩定、水溶性好,并且與現有的茶多酚苷元相比,性質更穩定,活性更高。

本發明中,所述的武夷山巖茶提取物(WTDF)的原料為武夷巖茶,包括武夷山大紅袍、烏龍茶、鐵觀音、白雞冠、水金龜等名茶;還有以茶樹生長環境命名的,如不見天、金鑰匙等;以茶樹形狀命名的,如醉海棠、醉洞賓、釣金龜、鳳尾草、玉麒麟、一枝香等;有以茶葉樹形命名的,如瓜子樹、金錢、竹絲、金柳條、倒葉柳等;以茶樹發芽遲早命名的,如迎春柳,不知春等;以茶香型命名的,如肉桂、石乳香、白麝香等。

因此本發明涉及一種武夷山巖茶提取物(WTDF)的制備方法,其包含下列步驟:

(1)將武夷山巖茶用乙醇水溶液提取;

(2)將步驟(1)提取所得物質用大孔樹脂柱進行分離,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分;即可。

其中,所述的武夷山巖茶較佳的為武夷山大紅袍、烏龍茶、鐵觀音、白雞冠、水金龜、不見天、金鑰匙、醉海棠、醉洞賓、釣金龜、鳳尾草、玉麒麟、一枝香、瓜子樹、金錢、竹絲、金柳條、倒葉柳、迎春柳、不知春、肉桂、石乳香和白麝香中的一種或多種,優選武夷山大紅袍。

步驟(1)中,所述的武夷山巖茶可以是武夷山巖茶的下腳料,其較佳的為粉碎后使用,粉碎后的粒徑較佳的為20~100目;所述的乙醇水溶液的體積濃度較佳的為30%~90%,更佳的為50%~70%,武夷山巖茶與乙醇水溶液的料液比較佳的為1g∶5ml~1g∶10ml;所述的提取的溫度較佳的為40~70℃,提取的方法較佳的為旋轉提取,提取時間較佳的為1~3小時。

步驟(1)中,較佳的還包含下列步驟:將提取所得的提取液過濾,收集濾液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,得濾液,即可。

步驟(2)中,所述的大孔樹脂較佳的為D101和/或D201大孔樹脂,上柱原料的重量與大孔樹脂的重量比較佳的為1∶1.5~1∶1。

大孔樹脂分離的步驟較佳的為:先用蒸餾水進行淋洗,再用乙醇水溶液進行梯度洗脫,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分;其中,乙醇水溶液的梯度范圍較佳的為體積濃度30%~90%,更佳的為50%~70%。

步驟(2)中,較佳的還包含下列步驟:將大孔樹脂分離得到的餾分濃縮,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,干燥,即可。

本發明中,所述的武夷山巖茶提取物(WTDF)的制備方法較佳的還包含下列步驟(3):將上述步驟(2)所得的物質進行硅膠柱層析分離,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.44,Rf值為0.27和Rf值為0.16的三個餾分中的一個或多個餾分。

其中,在所述的硅膠柱層析分離中,上柱物質與硅膠的質量比較佳的為2∶100;硅膠的目數較佳的為100目~300目;所述硅膠柱層析的步驟較佳的為用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶劑進行梯度洗脫,梯度較佳的為二氯甲烷、甲醇和水的體積比為20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1;每個梯度所用的混合溶劑的用量較佳的為150~250ml,以8ml分段收集各餾分,收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.44,Rf值為0.27和Rf值為0.16的三個餾分中的一個或多個餾分。

步驟(3)中,較佳的還包含下列步驟:將各餾分的溶液濃縮,干燥,即可。

最佳的,所述的武夷山巖茶提取物的制備方法包含下列步驟:以武夷山巖茶為原料,粉碎至20~100目,以1∶5~10(g/ml)的料液比,加入體積濃度為50%~70%的乙醇水溶液,40~70℃旋轉提取1~3小時,過濾,收集濾液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,濾液過D101型大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水淋洗,再以體積濃度為30%~90%的乙醇水溶液依次梯度洗脫,分別收集洗脫液,每餾分為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同餾分,取第11~25餾分,即收集用硅膠薄層層析法檢測時,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,Rf值為0.16~0.45的餾分,濃縮,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,粉末提取物通過硅膠柱層析分離,依次用體積比例20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1的二氯甲烷、甲醇和水的混合洗脫劑進行梯度洗脫,每個梯度所用的混合溶劑為150ml~250ml,分別收集洗脫液,每餾分8ml,以硅膠薄層層析法檢測,展開劑二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1,合并Rf值為0.44的7-18餾分,其為DF-3組;合并Rf值為0.27的餾分19-39餾分,其為DF-2組;合并Rf值為0.16的45-81餾分,其為DF-1組,將各餾分濃縮,真空干燥,得干燥粉末,即可。

上述制備方法中的各優選條件可按本領域知識進行任意組合,即得本發明的各優選實例。

本發明進一步涉及由上述制備方法制得的武夷山巖茶提取物。

本發明還涉及上述武夷巖茶提取物在制備清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶、抑制乙酰膽堿酯酶或抑制酪氨酸酶等的食品、飲品、保健食品、藥物或化妝品中的應用。

本發明還涉及上述武夷巖茶提取物在制備具有抗氧化、抗衰老、降血糖、改善記憶和美白中的一種或多種功能的食品、飲品、保健食品、藥物或化妝品中的應用。

本發明中,通過以下方法對優選的武夷巖茶的提取物結構進行鑒定,結果如下:

1.DF-1提取物的紅外光譜分析

(1)糖類物質O-H鍵伸縮振動

糖類物質的O-H鍵伸縮振動在3800~3200cm-區為有許多小肩峰組成的強寬峰,這是由于分子中的羥基形成多種方式的氫鍵所致。多糖類化合物如纖維素二聚體的羥基峰在3400cm-附近,多聚體的羥基峰在3347~3324cm-。

樣品在3353.7cm-處有強而寬的峰,推斷可能為糖類物質的O-H鍵伸縮振動。

(2)糖類物質C-O伸縮振動

糖類物質在1200~1030cm-C-O伸縮振動產生的吸收帶。

樣品在1145.5cm-、1080cm-、1035.6cm-處有三個吸收峰,推斷該多聚體為糖苷類物質。

(3)糖苷類型解析

吡喃糖苷在1100~1010cm-出現3個強峰,而呋喃糖則出現2個強峰。

樣品在1090cm-、1035.5cm-、1010cm-出現3個吸收峰,提示該糖苷為吡喃糖苷。而對照品(綠茶多酚)則在1100~1010cm-出現6個峰,提示該對照品沒有吡喃糖苷。

(4)吡喃糖α和β異構體的解析

吡喃糖為α異構體在766±10cm-有吡喃環擴張運動特征峰,在844±8cm-有C1-H彎曲振動特征峰。

樣品在767.5cm-和850cm-有吸收峰,判斷該吡喃糖為α異構體。

2.DF-1提取物的旋光度的測定

樣品的比旋光度而對照品的比旋光度兩者的差值為52.5°,推斷本樣品是含葡萄糖配基的糖苷物質,因為葡萄糖的比旋光度配基葡萄糖與苷元產生消旋作用使糖苷物質的旋光度發生改變,即左旋204.6°與右旋52.5°產生消旋作用使糖苷物質的旋光度變為左旋150.6°。

3.DF-1、DF-2和DF-3提取物的硅膠薄層層析

通過對各樣品進行水解,以葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、巖藻糖、半乳糖、葡萄糖醛酸為標準單糖,將樣品和標準糖進行硅膠薄層層析分析,結果表明,本樣品中含有葡萄糖。

4.DF-1、DF-2和DF-3的液相-質譜分析

(1)EGCG糖苷(代號DF-1)

質譜中有459和623正離子峰,EGCG的質量數為458,EGCG的分子上連接一個葡萄糖,其質量數為458+180-18=620,證明樣品中含有EGCG茶多酚糖苷類物質。

(2)ECG糖苷(代號DF-2)

質譜中有441負離子峰和605負離子峰,ECG的質量數為442,ECG的分子上連接一個葡萄糖,其質量數為442+180-18=604,證明樣品中含有ECG茶多酚糖苷類物質。

(3)EGC糖苷(代號DF-3)

質譜中有305負離子峰和630負離子峰,EGC的質量數為306,EGC的分子上連接上兩個葡萄糖,306+180-18+180-18=630,證明樣品中含有EGC糖甙類物質。

除特殊說明外,本發明涉及的原料和試劑均市售可得。

本發明的積極進步效果在于:

(1)本發明可以利用武夷山巖茶如大紅袍等以及其殘次品來提取活性功效成分,即武夷巖茶提取物(WTDF),充分利用了寶貴的武夷巖茶資源。

(2)本發明的武夷山巖茶如大紅袍等的提取物(WTDF)中含有茶多酚兒茶素與糖基相結合的糖苷,與現有的茶多酚提取物相比,其活性、穩定性和水溶性大大提高。并且,本發明的巖茶提取物與從綠茶和白茶中提取的茶多酚苷元的活性相比,要高出30%~50%。

(3)本發明的武夷山巖茶如大紅袍等的提取物(WTDF)為開發高效的具有抗氧化、降血糖、改善記憶力的食品、飲品、保健品、藥品和具有美白功效的化妝品提供了新的途徑。

具體實施方式

下面用實施例來進一步說明本發明,但本發明并不受其限制。

以下涉及到Rf值的實施例中,Rf值的測定條件均為:展開劑系統為二氯甲烷∶甲醇∶水的體積比為8∶3∶1。

實施例1

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為80%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為80%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質有一部分多酚糖苷,含量在20%左右。

實施例2

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為70%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為70%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依此用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質中多酚糖苷的含量為50%左右。

實施例3

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為50%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為50%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質中多酚糖苷的含量為50%左右。

實施例4

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為30%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為30%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依此用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質中多酚糖苷的含量為低于20%。

實施例5

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為80%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為80%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物。經鑒定,所得活性物質有一部分糖苷,含量在20%左右。將正丁醇萃取物進行硅膠柱層析分離,以二氯甲烷、甲醇和水的體積比為20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脫,分段收集各餾分,根據薄層層析結果,合并餾分7-18,Rf值為0.44;合并19-39餾分,Rf值為0.27;合并45-81的餾分,Rf值為0.16。將各餾分濃縮,真空干燥,得干燥粉末。

實施例6

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為70%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為70%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依此用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質中糖苷的含量為50%左右。將正丁醇萃取物進行硅膠柱層析分離,以二氯甲烷、甲醇和水的體積比為20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脫,分段收集各餾分,根據薄層層析結果,合并餾分7-18,Rf值為0.44;合并19-39餾分,Rf值為0.27;合并45-81的餾分,Rf值為0.16。將各餾分濃縮,真空干燥,得干燥粉末。

實施例7

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為50%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為50%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質中糖苷的含量為50%左右。將正丁醇萃取物進行硅膠柱層析分離,以二氯甲烷、甲醇和水的體積比為20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脫,分段收集各餾分,根據薄層層析結果,合并餾分7-18,Rf值為0.44;合并19-39餾分,Rf值為0.27;合并45-81的餾分,Rf值為0.16。將各餾分濃縮,真空干燥,得干燥粉末。

實施例8

稱取巖茶大紅袍1000g,粉碎,20~100目,加入體積濃度為30%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋轉提取2h,過濾得到提取液,濾渣繼續用6000ml體積濃度為30%的乙醇水溶液,65℃旋轉提取2h,過濾,合并兩次提取液,脫色,過濾,濾液濃縮至無乙醇,離心,過濾,取濾液過大孔吸附樹脂柱,先以蒸餾水3000ml淋洗,再以體積濃度為30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脫,分別收集洗脫液,每流份為150ml,分別做硅膠薄層層析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值為0.16~0.45,濃縮至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,濃縮,真空干燥,得到干燥的粉狀提取物,經鑒定,所得活性物質中糖苷的含量為低于20%。將正丁醇萃取物進行硅膠柱層析分離,以二氯甲烷、甲醇和水的體積比為20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脫,分段收集各餾分,根據薄層層析結果,合并餾分7-18,Rf值為0.44;合并19-39餾分,Rf值為0.27;合并45-81的餾分,Rf值為0.16。將各餾分濃縮,真空干燥,得干燥粉末。

效果實施例

本發明的武夷巖茶提取物具有抗氧化、降血糖、改善記憶力和美白的功效,以下通過DPPH自由基清除率試驗、α-葡萄糖苷酶活性抑制率試驗、乙酰膽堿酯酶活性抑制率試驗和酪氨酸酶活性抑制率試驗,說明本發明提取物的功效性。

采用分光光度法測定提取物清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶活性和乙酰膽堿酯酶活性的功效,并與商品綠茶和白茶所得茶多酚提取物進行功效對比,結果見表1:

表1功效評價試驗結果

表2本發明的提取物DF-1、DF-2和DF-3的活性檢測數據

??樣品名稱 ??DPPH自由基清除率??(IC50) ??a-葡萄糖苷酶活性抑??制率(IC50) ??乙酰膽堿酯酶活性??抑制率(IC50) ??DF-1 ??2.8ppm ??0.1ppm ??12.2ppm ??DF-2 ??2.9ppm ??0.4ppm ??23.8ppm ??DF-3 ??3.2ppm ??0.27ppm ??25.6ppm

綜上所述:

(1)本發明的武夷山巖茶提取物具有清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶活性、乙酰膽堿酯酶活性和酪氨酸酶活性的作用,且其功效性顯著優于綠茶提取物茶多酚的功效性。因此,本提取物為開發具有降血糖、醒腦與改善記憶力、預防老年癡呆癥功效的食品、飲品、保健品、藥品提供了新的天然原料,具有廣闊的市場前景。

(2)本發明的武夷山巖茶提取物具有清除DPPH自由基和抑制酪氨酸酶的功效,且其功效性顯著優于茶多酚苷元類物質的功效性。因此,本提取物可作為天然植物功效原料,用于具有抗氧化、抗衰老、美白功效的高級化妝品。

(3)本發明的武夷山巖茶提取物改善了茶多酚苷元類物質易氧化、不穩定的缺陷,使提取物的穩定性有了極大的提高,從而提高了提取物的活性功效。

關于本文
本文標題:一種武夷山巖茶提取物及其制備方法和應用.pdf
鏈接地址:http://www.wwszu.club/p-6765685.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開
鬼佬大哥大