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一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑及其制備方法.pdf

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一種 魚類 損傷 中藥 添加劑 及其 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201010520831.3

申請日:

20101027

公開號:

CN102018137A

公開日:

20110420

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A23K1/18,A23K1/14,A23K1/16,A61K36/744,A61P1/16 主分類號: A23K1/18,A23K1/14,A23K1/16,A61K36/744,A61P1/16
申請人: 西北農林科技大學
發明人: 吉紅,朱天和,王麗宏,李超
地址: 712100 陜西省咸陽市楊凌區邰城路3號
優先權: CN201010520831A
專利代理機構: 代理人:
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201010520831.3

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法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑,所述中藥添加劑由包括下述配比的原料制成:茵陳蒿、梔子、大黃,重量比例3∶1∶1。還公開一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑的制備方法。本發明的中藥制劑可明顯改善血清生化參數,明顯降低肝細胞凋亡數量,顯著防止肝細胞病理性損傷,具有明顯的保肝護肝作用。

權利要求書

1.一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑,其特征在于,所述中藥添加劑由包括下述配比的原料制成:茵陳蒿、梔子、大黃,重量比例3∶1∶1。2.一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)組方藥材:茵陳蒿、梔子、大黃,重量比例3∶1∶1;(2)除雜:除去茵陳蒿中存在的雜物;(3)粉碎:采用中草藥粉碎機進行粉碎,茵陳蒿粉碎為棉絮狀,大黃和梔子粉碎過40目篩;(4)浸提:加入17倍量的95%乙醇,放置十二小時或過夜,然后用抽提裝置抽提三次;(5)濃縮:使用旋轉蒸發儀回收抽提液中酒精,濃縮獲得浸膏;(6)常溫干燥:將盛放浸膏容器敞口放置,常溫下過夜干燥;(7)包合:制備β-環糊精飽和水溶液,將浸膏加入到飽和溶液中,研磨攪拌半小時至1小時;(8)干燥成品:將混合液常溫或置于40-50℃干燥箱干燥,得到粉末狀固體即為成品;(9)包裝儲存。3.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟(4)中前兩次每次回流提取3小時,最后一次2小時。4.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟(7)中將浸膏按照浸膏∶β-環糊精飽和溶液=1∶6的比例加入到飽和溶液中。

說明書

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技術領域

本發明屬于新型飼料添加劑類,尤其涉及一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑及其應用,適用于水生養殖動物肝損傷保護、肝代謝功能障礙和肝臟疾病的輔助治療。

背景技術

受養殖環境惡化和抗生素等藥品濫用的影響,動物主要的物質能量代謝器官——肝臟受損傷,進而產生嚴重代謝障礙類疾病,最終導致動物死亡的事例愈來愈多,極大地制約了當前養殖業的健康發展。

肝臟是機體代謝的重要器官,不僅僅分泌消化代謝酶,也具有重要的免疫功能,因此,肝臟的損傷對動物的健康狀態影響極大。肝的損傷也有不同程度,一般稱之為慢性,亞急性、急性三種。實踐中,急性肝損傷最難以治療和痊愈。

現有較多的合成藥劑用于治療肝損傷。部分維生素(如核黃素)、肉毒堿、乳清酸以及天然磷脂、腺苷蛋氨酸等等均有作用,且在臨床應用廣泛。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑及其應用,用于水生養殖動物肝損傷保護、肝代謝功能障礙和肝臟疾病的輔助治療。

本發明采用如下技術方案:

一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑,所述中藥添加劑由包括下述配比的原料制成:茵陳蒿、梔子、大黃,重量比例3∶1∶1。

一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑的制備方法,包括以下步驟:

(1)組方藥材:茵陳蒿、梔子、大黃,重量比例3∶1∶1;

(2)除雜:除去茵陳蒿中存在的雜物;

(3)粉碎:采用中草藥粉碎機進行粉碎,茵陳蒿粉碎為棉絮狀,大黃和梔子粉碎過40目篩;

(4)浸提:加入17倍量的95%乙醇,放置十二小時或過夜,然后用抽提裝置抽提三次;

(5)濃縮:使用旋轉蒸發儀回收抽提液中酒精,濃縮獲得浸膏;

(6)常溫干燥:將盛放浸膏容器敞口放置,常溫下過夜干燥;

(7)包合:制備β-環糊精飽和水溶液,將浸膏加入到飽和溶液中,研磨攪拌半小時至1小時;

(8)干燥成品:將混合液常溫或置于40-50℃干燥箱干燥,得到粉末狀固體即為成品;

(9)包裝儲存。

所述的制備方法,所述步驟(4)中前兩次每次回流提取3小時,最后一次2小時。

所述的制備方法,所述步驟(7)中將浸膏按照浸膏∶β-環糊精飽和溶液=1∶6的比例加入到飽和溶液中。

附圖說明

圖1為本發明中藥添加劑的制備方法流程圖;

圖2為空白組肝細胞電鏡照片;

圖3對照組肝細胞電鏡照片;

圖4、5、6為試驗組肝細胞電鏡照片,圖4為低劑量S2,圖5為中劑量S3,圖6為高劑量S4。

具體實施方式

以下結合附圖和具體實施例,對本發明進行詳細說明。

實施例1

本實施例提供一種抗魚類肝損傷的中藥添加劑,其制備產品的工藝流程為:組方藥材——除雜——粉碎——浸提3次——濃縮浸膏——常溫干燥——干膏研磨——環糊精與干膏混合——干燥成品——包裝儲存;

其中,組方藥材:茵陳蒿、梔子、大黃,重量比例3∶1∶1;

除雜:除去茵陳蒿中存在的一些較大枝條等雜物;

粉碎:采用中草藥粉碎機進行粉碎,茵陳蒿粉碎為棉絮狀,大黃和梔子粉碎過40目篩;

浸提:加入17倍量的95%乙醇(放置十二小時或過夜),然后用索氏抽提裝置抽提三次,前兩次每次回流提取3小時,最后一次2小時;

濃縮:使用旋轉蒸發儀回收抽提液中酒精,獲得提取物(浸膏);

常溫干燥:將盛放浸膏容器敞口放置,常溫下過夜干燥;

包合:制備β-環糊精飽和水溶液,將浸膏按照比例加入到飽和溶液中(浸膏∶β-環糊精飽和溶液=1∶6),研磨攪拌半小時至1小時;

干燥成品:將混合液常溫或置于40-50℃干燥箱干燥,得到粉末狀固體即為成品;

包裝儲存:添加沸石粉和微晶纖維素作為輔料以稀釋防潮;使用富馬酸二甲酯作為防腐劑(0.05-0.1%);塑料袋包裝;

所用主要儀器:回流濃縮器,超聲波清洗儀等。

實施例2

茵陳湯制劑對喹乙醇造成的肝損傷保護作用研究

1材料與方法

試驗魚:健康鯉,體重52.12±2.95g,體長12.77±0.46cm,購于西安市周至聯集漁場。實驗魚數量250尾,分成5組(對照組、模型組、茵陳湯低劑量組、茵陳湯中劑量組、茵陳湯高劑量組,茵陳湯制劑采用專利方法制備),每組2個處理,每個處理25尾魚,實驗組(除對照組)以200mg·kg-1飼料的喹乙醇劑量拌料連續飼喂造肝損傷模型。

主要試劑:喹乙醇購自北京中農發藥業有限公司黃岡分公司,批準文號:獸藥字(2006)170301441。

試驗采用單因子完全隨機設計。試驗5個配方,以常用商品配方為對照組S0,以模型組為S2(200mg·kg-1飼料的喹乙醇),在模型組日糧基礎之上添加1.35%、2.7%、5.4%實施例1所制備的制劑制成三種茵陳湯飼料,以上五種飼料分別記為處理S1、S2、S3、S4、S5。全部用用人工制粒機制成φ2.5mm硬顆粒飼料,貯存待用。

飼養試驗在室內循環水養殖系統進行,試驗魚購回后用3%食鹽水消毒,放于160L的循環養殖桶中,商品飼料馴化試養7天后,選擇規格整齊,體質健壯的個體250尾,開始正式試驗。每天于8:30、12:30、16:30三次投喂,每次投喂均視吃食情況而定,以其不搶食為止,正式試驗期間要盡量做到飼料投喂無殘餌,共計六6周。每天做好水溫、投餌量、死魚等飼養記錄,試驗期間水溫16~23℃、溶解氧10~13mg/l?DO>9.0mg/L、氨氮<0.5mg/L,pH值6.9~7.2,水質符合漁業水質標準。

飼養實驗結束后,停食24h后全部稱重、測量體長,每箱隨機取6尾采血,用于血液生化指標測定,然后取內臟團稱重,隨后立即分離取肝胰臟、脾臟、腸道稱重、測腸長,并保存肌肉。每箱再取12尾不抽血,前3尾迅速取肝胰臟、腸道(分前、中、后)放入波恩氏液(Bouin′s)固定,用于石蠟切片的制作。中間3尾,采取剖殺魚的肝組織,2.5%戊二醛固定,用于電鏡切片的制作。后6尾取剖殺魚的肝組織,用于流式細胞儀的檢測。每箱再取5尾,剖殺后迅速取出肝胰臟,用預冷的去離子水沖洗干凈,濾紙吸干后裝袋密封,置-80℃冰箱中保存備用。

血液指標采用島津ALAB600全自動分析儀測定。

2結果

2-1血液生化參數

表1不同茵陳湯制劑的添加量對鯉血液生化指標的影響

血清中谷丙轉氨酶活性(ALT)以對照組最高,顯著高于空白組(P<0.05),與其余3組差異不顯著(P>0.05),其余3組間差異不顯著(P>0.05);谷草轉氨酶活性(AST)以對照組鯉魚顯著高于其它四組(P<0.05),其它四組之間差異不顯著(P>0.05);總膽紅素(TB)低劑量組、中劑量組顯著高于其它3組(P<0.05),其它3組之間差異不顯著(P>0.05);NA的水平對照組、低劑量組之間差異不顯著(P>0.05),但顯著低于其它3組(P<0.05),其它3組之間差異不顯著(P>0.05);CL的水平對照組最低,與空白組之間差異不顯著(P>0.05),但顯著低于其它3組(P<0.05),其它3組之間差異不顯著(P>0.05);堿性磷酸酶(AKP)、血糖水平(GLU)各組之間無顯著差異(P>0.05),但均具有先降低再上升的趨勢;血清中總蛋白TP、總膽固醇Chol和甘油三酯TG、K含量各處理間無顯著性差異(P>0.05),但對照組均最高,各處理間有升高后再降低的趨勢。

2-2肝細胞存活量

表2不同添加劑量對肝細胞存活量的影響

注:Q1死細胞,Q2晚期凋亡細胞,Q3活細胞,Q4早期凋亡細胞

2-3肝細胞電鏡觀察

電鏡圖片分析:

空白(圖2):細胞膜、核膜光滑整齊,細胞間界限清晰,線粒體清晰可見,未見明顯異常現象。對照(圖3):細胞腫脹,邊界不清晰,細胞內出現了明顯的空泡現象,細胞膜不完整,損傷嚴重.試驗組(圖4、5、6)細胞膜、核膜較光滑整齊,細胞間界限清晰,線粒體清晰可見,防止了肝細胞的大量凋亡損傷,無明顯異常現象。

3結論

添加1.35%的本發明的中藥制劑可明顯改善血清生化參數,明顯降低肝細胞凋亡數量,顯著防止肝細胞病理性損傷,具有明顯的保肝護肝作用。

應當理解的是,對本領域普通技術人員來說,可以根據上述說明加以改進或變換,而所有這些改進和變換都應屬于本發明所附權利要求的保護范圍。

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