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一種提高斑馬魚受精率的裝置及方法.pdf

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一種 提高 斑馬 受精 裝置 方法
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摘要
申請專利號:

CN201711320960.6

申請日:

20171212

公開號:

CN108056058A

公開日:

20180522

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01K63/00,A01K63/04,A01K61/10,A61D7/00 主分類號: A01K63/00,A01K63/04,A01K61/10,A61D7/00
申請人: 浙江海洋大學
發明人: 代小新,牟毅,趙波,高陽,儲張杰,白琛華,王通,孫凱璐,游佳昀,黎媛
地址: 316022 浙江省舟山市定海區臨城街道海大南路1號
優先權: CN201711320960A
專利代理機構: 杭州杭誠專利事務所有限公司 代理人: 尉偉敏
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201711320960.6

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及水產養殖技術領域,尤其涉及一種提高斑馬魚受精率的裝置及方法,包括養殖箱,所述養殖箱體由水平設置的隔板隔開形成上箱體和下箱體,所述隔板設有篩孔,所述篩孔的直徑大于斑馬魚魚卵的外徑且小于斑馬魚的外徑。本發明結構簡單,成本低,使用方便,便于維修;褪黑素能通過維持受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白的表達,提高斑馬魚的受精率,為提高魚類繁殖率,提供了理論依據。

權利要求書

1.一種提高斑馬魚受精率的裝置,包括養殖箱(1),其特征在于,所述養殖箱體由水平設置的隔板(2)隔開形成上箱體(3)和下箱體(4),所述隔板設有篩孔(5),所述篩孔的直徑大于斑馬魚魚卵的外徑且小于斑馬魚的外徑。2.根據權利要求1所述的一種提高斑馬魚受精率的裝置,其特征在于,所述提高斑馬魚受精率的裝置還包括換氣機構,所述換氣機構由進氣口(6)通過進氣管(7)與空氣泵(8)連接構成。3.根據權利要求2所述的一種提高斑馬魚受精率的裝置,其特征在于,所述進氣口呈喇叭狀。4.根據權利要求1所述的一種提高斑馬魚受精率的裝置,其特征在于,所述隔板與養殖箱體之間可拆卸連接。5.根據權利要求1或4所述的一種提高斑馬魚受精率的裝置,其特征在于,所述養殖箱體下端內壁周圍設有限位凸起(9),所述隔板水平放置于限位凸起的上表面。6.一種提高斑馬魚受精率的方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,養殖箱體內的養殖水體含有濃度為5~15ng/L的雌激素內分泌干擾物,養殖期間每條雌斑馬魚每天腹腔注射40~60μg/100g的抗氧化劑,打開紫外燈和換氣機構;(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體;(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。7.根據權利要求6所述的一種提高斑馬魚受精率的方法,其特征在于,步驟(1)中,所述抗氧化劑為褪黑素。8.根據權利要求7所述的一種提高斑馬魚受精率的方法,其特征在于,所述提高斑馬魚受精率的裝置內水體的溫度為25~31℃,水質弱堿性pH值控制在7~8。

說明書

技術領域

本發明涉及水產養殖技術領域,尤其涉及一種提高斑馬魚受精率的裝置及方法。

背景技術

斑馬魚是一種亞熱帶淡水魚,由于個體小、周期產卵、產卵周期短、體外受精、體外發育,具有很高的科研價值,是一種模式動物。斑馬魚身體延長而略呈紡錘形,頭小而稍尖,吻較短,全身布滿多條深藍色縱紋似斑馬,與銀白色或金黃色縱紋相間排列紋路比較有條理。在水族箱內成群游動時猶如奔馳于非洲草原的斑馬群,故此得斑馬魚之美稱。斑馬魚和人類基因有著87%的高度同源性,作為模式生物的優勢很突出,這意味著其實驗結果大多數情況下適用于人體。常可用于水質環境的監測。

受精后皮質顆粒中釋放內容物Ovastacin是先鋒成員,它能使透明帶變硬,阻止多余精子進入卵周隙,進而阻止了多精受精,防止產生畸形的胚胎。如果卵子質量下降Ovastacin會在受精之前釋放,從而使透明帶提前變硬導致精子和卵子透明帶結合的能力降低,受精率下降。研究已證明在哺乳動物中,葉酸受體4被命名為Juno位于卵子質膜上,是精子頭部蛋白Izumo1的受體蛋白,如果破壞Juno的定位和表達,就會影響精子和卵母細胞的識別,使受精率下降。在魚類也存在葉酸受體的同系物是精卵識別的關鍵,影響魚類的受精率。

環境類雌激素在水環境中存儲量最大,魚類在發育過程中如果暴露于這種雌激素內分泌干擾物下,會影響其受精和繁殖等行為。但是環境類雌激素的降解與治理現在仍有難度,而且這些污染物對卵母細胞的作用機制還不清楚,對魚類增養殖的危害極大。申請人發現斑馬魚長期生活在雌激素內分泌干擾物的環境中,會導致卵母細胞發生了氧化應激和早期凋亡,從而使受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白異常,導致受精率降低。此外,斑馬魚的習性導致雌、雄魚追逐產卵后有吃卵的習慣,導致斑馬魚的養殖繁殖率低。

發明內容

本發明為了克服傳統養殖方法斑馬魚受精率低的問題,提供了一種結構簡單、易于操作提高斑馬魚受精率的裝置及方法。

為了實現上述目的,本發明采用以下技術方案:

一種提高斑馬魚受精率的裝置,包括養殖箱,所述養殖箱體由水平設置的隔板隔開形成上箱體和下箱體,所述隔板設有篩孔,所述篩孔的直徑大于斑馬魚魚卵的外徑且小于斑馬魚的外徑。

作為優選,所述提高斑馬魚受精率的裝置還包括換氣機構,所述換氣機構由進氣口通過進氣管與空氣泵連接構成。

作為優選,所述進氣口呈喇叭狀。

換氣機構一方面可以保證養殖水體的供氧量,另一方面形成水流,喇叭狀的進氣口使得氣流更為分散,有利于魚卵通過隔板的篩孔沉入養殖箱的下箱體,有效防止魚卵或受精卵被斑馬魚吞食,從而提高斑馬魚的受精率。

作為優選,所述隔板與養殖箱體之間可拆卸連接,方便清洗與更換,降低養殖成本。

作為優選,所述養殖箱體下端內壁周圍設有限位凸起,所述隔板水平放置于限位凸起的上表面。

一種提高斑馬魚受精率的方法,包括以下步驟:

(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,養殖箱體內的養殖水體含有濃度為10ng/L的雌激素內分泌干擾物,養殖期間每條雌斑馬魚每天腹腔注射50μg/100g的抗氧化劑,打開紫外燈和換氣機構;

(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;

(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體,有效防止魚卵被斑馬魚吞食;

(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。

本發明通過抗氧化劑挽救斑馬魚受精率,維持受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白的表達,提高斑馬魚的受精率。

作為優選,步驟(1)中,所述抗氧化劑為褪黑素。

褪黑素一種強大的抗氧化劑,可以通過生物公司購買。以斑馬魚為實驗對象通過注射一種抗氧化劑褪黑素的方法進行挽救,受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白由于氧化應激和細胞凋亡,它們的定位和表達量異常,褪黑素通過維持受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白的表達,從而提高斑馬魚的受精率。

作為優選,所述提高斑馬魚受精率的裝置內水體的溫度為25~31℃,水質弱堿性pH值控制在7~8。

因此,本發明具有如下有益效果:

結構簡單,成本低,使用方便,便于維修;

褪黑素能通過維持受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白的表達,提高斑馬魚的受精率,為提高魚類繁殖率,提供了理論依據。

附圖說明

圖1是本發明裝置的結構示意圖。

圖中:養殖箱體1,隔板2,上箱體3,下箱體4,篩孔5,進氣口6,進氣管7,空氣泵8,限位凸起9,斑馬魚10,魚卵11。

具體實施方式

下面通過具體實施例,并結合附圖,對本發明的技術方案作進一步具體的說明。

在本發明中,若非特指,所有設備和原料均可從市場購得或是本行業常用的,下述實施例中的方法,如無特別說明,均為本領域常規方法。

如圖1所示,一種提高斑馬魚受精率的裝置,包括養殖箱1和由喇叭狀的進氣口6通過進氣管7與空氣泵8連接構成的換氣機構;養殖箱體由水平設置的隔板2隔開形成上箱體3和下箱體4,養殖箱體下端內壁周圍設有限位凸起9,隔板水平放置于限位凸起的上表面;隔板上設有直徑大于斑馬魚魚卵的外徑且小于斑馬魚的外徑的篩孔5。養殖時,斑馬魚10于上箱體中活動,魚卵11通過隔板的篩孔沉入下箱體。

挽救組:

實施例1

(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,養殖箱體內的養殖水體含有濃度為5ng/L的雌激素內分泌干擾物,養殖期間每條雌斑馬魚每天腹腔注射50μg/100g的褪黑素,打開換氣機構,裝置內水體的溫度為25℃,水質弱堿性pH值控制在7;

(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;

(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體;

(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。

實施例2

(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,養殖箱體內的養殖水體含有濃度為10ng/L的雌激素內分泌干擾物,養殖期間每條雌斑馬魚每天腹腔注射60μg/100g的褪黑素,打開換氣機構,裝置內水體的溫度為28℃,水質弱堿性PH值控制在8;

(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;

(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體;

(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。

實施例3

(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,養殖箱體內的養殖水體含有濃度為15ng/L的雌激素內分泌干擾物,養殖期間每條雌斑馬魚每天腹腔注射40μg/100g的褪黑素,打開換氣機構,裝置內水體的溫度為31℃,水質弱堿性pH值控制在7.5;

(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;

(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體;

(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。

空白對照組

(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,打開換氣機構,裝置內水體的溫度為25℃,水質弱堿性pH值控制在7。;

(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;

(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體;

(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。

實驗組

(1)將成熟的雌、雄斑馬魚養殖于上述提高斑馬魚受精率的裝置的上箱體中,打開換氣機構,養殖箱體內的養殖水體含有濃度為10ng/L的雌激素內分泌干擾物,裝置內水體的溫度為25℃,水質弱堿性pH值控制在7;

(2)次日早上,雌、雄斑馬魚互相追逐,雌斑馬魚產下魚卵;

(3)魚卵受精后,通過篩孔沉入下箱體;

(4)試驗養殖周期一個月,統計斑馬魚的受精率。

對挽救組、空白對照組和實驗組的斑馬魚的受精率進行統計,結果如表1所示:

表1.檢測結果

由表1可以看出,空白對照組的斑馬魚的受精率最高,因為養殖水環境中不含有雌激素;實驗組的斑馬魚的受精率最低,這是因為養殖水體中雌激素內分泌干擾物導致卵母細胞發生了氧化應激和早期凋亡,從而使受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白異常,導致受精率降低;挽救組通過體內注射抗氧化劑褪黑素,維持受精關鍵蛋白Ovastacin和葉酸受體蛋白的表達,從而提高斑馬魚的受精率。

以上所述僅為本發明的較佳實施例,并非對本發明作任何形式上的限制,在不超出權利要求所記載的技術方案的前提下還有其它的變體及改型。

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