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一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑及其制備方法.pdf

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一種 魚類 復合 免疫 增強 及其 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201010553094.7

申請日:

20101122

公開號:

CN102090514B

公開日:

20121121

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A23K1/16,A23K1/18 主分類號: A23K1/16,A23K1/18
申請人: 國家海洋局第一海洋研究所
發明人: 郝林華,孫丕喜
地址: 266061 山東省青島市高科技工業園仙霞嶺路
優先權: CN201010553094A
專利代理機構: 代理人:
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201010553094.7

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑,包括牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉。其中,每百份該復合免疫增強劑重,所述牛蒡寡糖的重量份數占25~35份,所述殼聚糖的重量份數占20~30份,所述綠原酸的重量份數占15~25份,所述維生素C的重量份數占5~15份,所述維生素E的重量份數占5~15份,所述褐藻酸鈉的重量份數占2~8份。本發明的有益效果為:性能好,添加量僅為0.1~1.0%;能明顯增強魚類的免疫力和抗病力,提高成活率和生長率;免疫效果顯著高于其他增強劑,還克服了單一產品長期使用所表現的免疫抑制現象,能全周期使用;克服了現有病害防治技術的化學消毒劑和抗生素給養殖水產品和人體帶來的危害,又解決了現有水產疫苗所存在的特異性強、成本高的問題。

權利要求書

1.一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑,其特征在于:所述免疫增強劑包括牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉,所述牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉的重量份數如下:牛蒡寡糖:25~35份;殼聚糖:20~30份;綠原酸:15~25份;維生素C:5~15份;維生素E:5~15份;褐藻酸鈉:2~8份,其中,所述殼聚糖為將甲殼質進行生物技術處理制備出而得的、平均分子量在10000~50000Da、脫乙酰度為85%的殼聚糖。2.根據權利要求1所述的鲆鰈魚類用復合免疫增強劑,其特征在于:所述牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉的重量份數如下:牛蒡寡糖:30份;殼聚糖:25份;綠原酸:20份;維生素C:10份;維生素E:10份;褐藻酸鈉:5份。3.根據權利要求1或2所述的鲆鰈魚類用復合免疫增強劑,其特征在于:所述牛蒡寡糖為將牛蒡根進行生物技術處理制備出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖,所述牛蒡寡糖中寡糖含量大于或等于95%,所述牛蒡寡糖的平均分子量在2134Da,所述牛蒡寡糖為由12個呋喃型的果糖以β(2-1)糖苷鍵相連,末端為一個吡喃型葡萄糖以α(1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13的低聚糖。4.權利要求1所述的鲆鰈魚類用復合免疫增強劑的制備方法,其特征在于:所述方法的步驟及工藝條件如下:步驟1:固體原料粉碎、過篩、混勻分別將25~35重量份數的牛蒡寡糖、20~30重量份數的殼聚糖、15~25重量份數的綠原酸、5~15重量份數的維生素C和5~15重量份數的維生素E磨成細粉,過200目篩,加入攪拌設備,充分混合均勻得到固體初始混合物;步驟2:原料的配制向步驟1中所得的固體初始混合物中加入3~6重量份數的褐藻酸鈉作為粘合劑;步驟3:制粒將步驟2中所得的原料混合物壓制成粒,得到100重量份數的成品,其中,所述殼聚糖為將甲殼質進行生物技術處理制備出而得的、平均分子量在10000~50000Da、脫乙酰度為85%的殼聚糖。5.根據權利要求4所述的鲆鰈魚類用復合免疫增強劑的制備方法,其特征在于:所述牛蒡寡糖為將牛蒡根進行生物技術處理制備出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖,所述牛蒡寡糖中寡糖含量大于或等于95%,所述牛蒡寡糖的平均分子量在2134Da,所述牛蒡寡糖為由12個呋喃型的果糖以β(2-1)糖苷鍵相連,末端為一個吡喃型葡萄糖以α(1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13的低聚糖。

說明書

技術領域

本發明涉及一種復合免疫增強劑及其制備方法,尤其涉及一種水產飼養中的鲆鰈魚類用復合免疫增強劑及其制備方法。

背景技術

我國鲆鰈魚類的養殖始于20世紀80年代中后期,目前鲆鰈魚類如牙鲆、大菱鲆等是我國北方地區工廠化養殖的主要魚種。鲆鰈魚類生長快,肉質好,經濟價值高。隨著鲆鰈魚類養殖業在我國的蓬勃發展,特別是工廠化養殖規模的快速增長,養殖環境不斷惡化,隨之帶來的病害日趨嚴重,已成為制約鲆鰈魚類養殖業可持續發展的瓶頸。

為了防治病害頻生而帶來的損失,人們只能廣泛使用各種消毒和殺菌藥物及水產疫苗,但是卻存在著以下缺點:

隨著人們對水產品的安全要求越來越高,許多用于消毒的化學藥劑已被禁用,抗生素殺菌不僅會使耐藥菌株增多,藥效降低,而且還會在魚體內富集,對人體的健康產生危害;

水產疫苗特異性強,只能對一種病菌引起的疾病有保護效力,況且現有疫苗的種類甚少、成本較高,實際作用也非常有限,無法滿足水產養殖的實際需求。

免疫機制的研究是合理、有效防治各類病害的根本和依據。近年來,免疫學研究已成為水產動物病害研究的熱點之一。因此,開發有效的免疫增強劑是提高魚體免疫力和抗病力一個重要舉措。

免疫增強劑可以通過提高水產養殖動物機體自身的免疫力,從而增強其個體抗病能力。單一成分的免疫增強劑在水產上的應用國內外已有不少報道,但現有的單一成分的免疫增強劑不僅作用效果有限,而且在養殖上長期使用往往還會出現負反饋抑制問題。復合免疫增強劑在魚類養殖上的應用也有報道,但大多數是指中草藥類。如申請號為200910132064.6的中國專利指出一種復方中草藥作為淡水魚和海水魚的免疫增強劑;申請號為200510047347.2的中國專利也指出一種復方中草藥作為鲆鰈魚類的免疫增強劑。中草藥作為免疫增強劑雖然能克服現有單一成分免疫增強劑的上述缺點,但其發揮作用時間周期長,而且對飼料的適口性會產生一定的影響。

據此,在現有的鲆鰈魚類飼養中,作為飼料添加劑使用的各種材料,都有或多或少的不足,如性能不好、不能明顯增強魚類的免疫力或抗病力,或者會給人體造成損害等等。

因此,在飼養鲆鰈魚類的技術中,急需提供一種兼具營養和藥物雙重功能的復合免疫增強劑,以提高魚類的免疫力、提高魚類成活率、生長率及其水產養殖業的健康發展。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有飼養鲆鰈魚類的技術中存在的諸多不足,如病害防治技術欠缺、各種飼料添加劑性能不好、不能明顯增強魚類的免疫力或抗病力,或者會給人體造成損害以及因能引起魚類的抑制而失去作用等等,從而提供一種具有下列功效的鲆鰈魚類用復合免疫增強劑及其制備方法:

本發明所述的復合免疫增強劑是一種集促生、提高免疫力、補充營養和防治病原菌等多種功能于一體的飼料添加劑新產品,而且無污染、無殘留、價格低廉、使用方法簡便可行。從而減少化學消毒藥物和抗生素的使用,確保飼料和水產品安全與衛生,為水產養殖的疾病預防提供新的途徑。

本發明是通過下述技術方案實現上述目的:

一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑,其特征在于:所述免疫增強劑包括牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉,所述牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉的重量份數如下:

牛蒡寡糖:25~35份;

殼聚糖:20~30份;

綠原酸:15~25份;

維生素C:5~15份;

維生素E:5~15份;

褐藻酸鈉:2~8份。

優選地,所述牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉的重量份數如下:

牛蒡寡糖:30份;

殼聚糖:25份;

綠原酸:20份;

維生素C:10份;

維生素E:10份;

褐藻酸鈉:5份。

本發明還涉及一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑的制備方法,其特征在于:所述方法的步驟及工藝條件如下:

步驟1:固體原料粉碎、過篩、混勻

分別將25~35重量份數的牛蒡寡糖、20~30重量份數的殼聚糖、15~25重量份數的綠原酸、5~15重量份數的維生素C和5~15重量份數的維生素E磨成細粉,過200目篩,加入攪拌設備,充分混合均勻得到固體初始混合物;

步驟2:原料的配制

向步驟1中所得的固體初始混合物中加入3~6重量份數的褐藻酸鈉作為粘合劑;

步驟3:制粒

將步驟2中所得的原料混合物壓制成粒,得到100重量份數的成品。

優選地,所述牛蒡寡糖為將牛蒡根進行生物技術處理制備出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖,所述牛蒡寡糖中寡糖含量大于或等于95%,所述牛蒡寡糖的平均分子量在2134Da,所述牛蒡寡糖為由12個呋喃型的果糖以β(2-1)糖苷鍵相連,末端為一個吡喃型葡萄糖以α(1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13的低聚糖。

優選地,所述殼聚糖為將甲殼質進行生物技術處理制備出而得的、平均分子量在10000~50000Da、脫乙酰度為85%的殼聚糖。

本發明的復合免疫增強劑與現有技術相比具有如下有益效果:

(1)在鲆鰈魚類飼料中作為飼料添加劑使用,性能好,添加量僅為0.1~1.0%,可節省飼料添加劑的成本;

(2)能明顯增強魚類的免疫力和抗病力,提高成活率和生長率;

(3)免疫效果顯著高于單一免疫增強劑,而且還克服了單一產品長期使用所表現的免疫抑制現象,可以在動物養殖的全周期使用;

(4)克服了現有病害防治技術的化學消毒劑和抗生素給養殖水產品和人體帶來的危害,又解決了現有水產疫苗所存在的特異性強、成本高的問題;

(5)兼有營養和藥物兩種屬性,即含有營養物質,又具有生物學活性的成分,能改善魚類機體代謝,促進生長發育,提高其免疫力和抗病力等;

(6)制備方法簡單易行、工藝合理、價格低廉、所用的原料來源穩定、有利于工業化生產。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。

一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑,包括牛蒡寡糖、殼聚糖、綠原酸、維生素C、維生素E和褐藻酸鈉。其中,每百份該復合免疫增強劑重,所述牛蒡寡糖的重量份數占25~35份,所述殼聚糖的重量份數占20~30份,所述綠原酸的重量份數占15~25份,所述維生素C的重量份數占5~15份,所述維生素E的重量份數占5~15份,所述褐藻酸鈉的重量份數占2~8份。

在優選實施例中,每百份該復合免疫增強劑重,所述牛蒡寡糖的重量份數占30份,所述殼聚糖的重量份數占25份,所述綠原酸的重量份數占20份,所述維生素C的重量份數占10份,所述維生素E的重量份數占10份,所述褐藻酸鈉的重量份數占5份。

本發明還涉及一種鲆鰈魚類用復合免疫增強劑的制備方法,其特征在于:所述方法的步驟及工藝條件如下:

步驟1:固體原料粉碎、過篩、混勻

分別將25~35重量份數的牛蒡寡糖、20~30重量份數的殼聚糖、15~25重量份數的綠原酸、5~15重量份數的維生素C和5~15重量份數的維生素E磨成細粉,過200目篩,加入攪拌設備,充分混合均勻得到固體初始混合物;

步驟2:原料的配制

向步驟1中所得的固體初始混合物中加入3~6重量份數的褐藻酸鈉作為粘合劑;

步驟3:制粒

將步驟2中所得的原料混合物壓制成粒,得到100重量份數的成品。

優選地,所述牛蒡寡糖為將牛蒡根進行生物技術處理制備出的一種水溶性和穩定性較好、純度較高的天然寡糖,所述牛蒡寡糖中寡糖含量大于或等于95%,所述牛蒡寡糖的平均分子量在2134Da,所述牛蒡寡糖為由12個呋喃型的果糖以β(2-1)糖苷鍵相連,末端為一個吡喃型葡萄糖以α(1-2)糖苷鍵連接在果糖上的線性直鏈結構的、聚合度為13的低聚糖。

優選地,所述殼聚糖為將甲殼質進行生物技術處理制備出而得的、平均分子量在10000~50000Da、脫乙酰度為85%的殼聚糖。

本發明的復合免疫增強劑經養殖試驗證實作為新型免疫增強劑在水產養殖中具有促生長、提高成活率和生長率,明顯增強魚類的免疫力和抗病力等多種功能。

試驗用大菱鲆幼魚由煙臺開發區天源水產有限公司提供。試驗在天源水產有限公司養殖車間內進行。選擇健康均勻馴化后的大菱鲆隨機分為4組,各設1平行組,分別使用不同的飼料,按正常的飼養管理程序進行。

試驗用大菱鲆800尾,平均體重23g左右,平均體長13cm左右,于網箱(120cm×100cm×100cm)中進行循環海水充氣養殖。

循環海水經過砂濾、臭氧等處理系統后進入養殖網箱,其流量為0.8L/min。試驗期間水質狀況:溶解氧DO為6.0~8.0mg/L,pH為7.8~8.1,溫度T為18~22℃,鹽度S為30~31。

每日投餌2次,吸殘污處理1次。

對照組中,所投放的飼料中不添加本發明的復合免疫增強劑;試驗組中,所投放的飼料中分別添加0.1%、0.5%和1.0%的本發明產品。進行3個月的飼養試驗,每隔30天對大菱鲆的非特異性免疫指標、成活率、增重率指標進行測定。投喂試驗結束后,用愛德華氏菌進行細菌感染實驗。

(1)對大菱鲆的非特異性免疫指標測定

由表1可以看出:試驗期間,大菱鲆飼料中添加本發明所述的復合免疫增強劑與對照組相比,魚體內的主要免疫指標包括免疫相關酶活力、血細胞的吞噬率、血液白細胞總數和血清補體活力等,均有明顯提高,而且隨著時間的推移,各免疫指標有逐漸增加的趨勢。

表1飼料中添加復合免疫增強劑對大菱鲆免疫力的影響

(2)對大菱鲆的成活率、增重率和生長率指標測定

試驗期間,大菱鲆成活率、增重率如表2所示,添加免疫增強劑的試驗組增重率明顯優于對照組,說明所用的本發明的復合免疫增強劑對大菱鲆增重有促進作用。試驗后期增重率降低可能是溫度降低所致。另外,試驗期間試驗組大菱鲆成活率較對照組也有所增加,故使用免疫增強劑對大菱鲆成活率同樣有促進作用。

表2飼料中添加復合免疫增強劑對大菱鲆生長性能的影響

(3)對大菱鲆抵抗細菌感染的觀察實驗

表3飼料中添加復合免疫增強劑對大菱鲆抵抗細菌感染的影響

復合免疫增強劑對大菱鲆抵抗細菌感染的觀察實驗結果表明(表3),未投喂免疫增強劑的大菱鲆在注射細菌51.5h內全部死亡,而投喂免疫增強劑的各組都顯示出推遲死亡的現象。投喂飼料中含0.5%免疫增強劑的大菱鲆在感染87h后,還有17%的成活率;投喂飼料中含1.0%免疫增強劑的大菱鲆在試驗結束后,仍有33%的成活率。由此可以看出,該復合免疫增強劑對魚類抵抗細菌感染有較好效果。

綜上所述,在大菱鲆飼料中添加0.1~1.0%的本發明的復合免疫增強劑對大菱鲆機體的免疫力、抗病力和生長性能均有較好效果,可顯著提高魚類的非特異性免疫力,增加抵抗細菌感染的活性,還可以明顯加快其生長、增重,可使大菱鲆的養殖成活率提高10%左右,增重率提高22~56%,有效地提高大菱鲆的產量,降低養殖成本,從而進一步推動大菱鲆養殖業的健康發展,滿足市場的需求。

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