鬼佬大哥大
  • / 12
  • 下載費用:30 金幣  

一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物.pdf

關 鍵 詞:
一種 保護 肝臟 防治 肝癌 藥物 組合
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
摘要
申請專利號:

CN200410067494.1

申請日:

20041026

公開號:

CN1634094A

公開日:

20050706

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K31/704,A61K9/16,A61K9/20,A61K9/48,A61P1/16,A61P35/00,// 主分類號: A61K31/704,A61K9/16,A61K9/20,A61K9/48,A61P1/16,A61P35/00,//
申請人: 賀平,李曉冬
發明人: 賀平,李曉冬
地址: 200433上海市楊浦區雙陽北路228弄128號802室
優先權: CN200410067494A
專利代理機構: 上海天翔知識產權代理有限公司 代理人: 黃靜
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN200410067494.1

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物,是甘草甜素和苦參堿組成的藥物組合物。現有甘草甜素類藥物口服有鈉水潴留、高血壓和低血鉀等嚴重不良反應。靜脈注射,因療程長,病人難以接受。苦參堿類藥物口服給藥療效不確切,并有利尿等副作用。本發明將甘草甜素和苦參堿組成復方組分,其含量比是1∶(0.25~4)。該藥物組合物可口服給藥,用于保護肝臟、防治肝癌。實驗結果證明,該藥物組合物不僅療效好,而且不良反應明顯減少。

權利要求書

1.一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物,其特征在于它主要是由甘草甜素和苦參堿組成的復方制成,其中甘草甜素和苦參堿的含量重量比為甘草甜素∶苦參堿等于1∶(0.25-4)或苦參堿∶甘草甜素等于1∶(0.25-4)。2.根據權利要求1所述的一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物是口服制劑。3.根據權利要求1或2所述的一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物的口服劑型為膠囊、片劑或顆粒劑。4.根據權利要求1或2所述的一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物是采用常規方法來制備成各種口服劑型。

說明書

?

技術領域

本發明涉及一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物,主要是由甘草甜素 和苦參堿組成的藥物組合物,屬于藥物復方制劑。

背景技術

在我國,肝臟疾病是常見病和多發病。僅乙型肝炎病毒攜帶者就高達 一億多人,占我國人口的10%以上。每年有100萬新生兒由于母嬰垂直轉播, 可能會感染乙肝病毒。另外,飲酒、藥物、環境污染以及自身免疫性疾病 也是引起肝損害的常見原因。

肝臟疾病的發病機理極為復雜。目前臨床上多采用辯證施治,并加用 肝臟疾病輔助治療藥物以提高療效。但是這些藥物的效果不理想,部分病 人的預后很差。由于慢性肝損害主要發生在青壯年,一旦轉變成肝硬化, 除誘發肝癌外,其自身也是一種不可逆轉的病理過程,給社會和家庭在經 濟和精神上造成極大的負擔和痛苦。

甘草甜素雖然可以作為治療肝臟疾病的輔助藥物,但長期口服有鈉水 潴留、高血壓和低血鉀等嚴重不良反應。靜脈注射給藥,因療程太長,患 者難以接受。苦參堿也可用作治療肝臟疾病的輔助藥物,但單獨使用療效 不確切,并有利尿等副作用。

發明內容

因此,人們對療效更好的保護肝臟和防冶肝癌的藥物有很大需求。本 發明的目的就是提供一種保護肝臟和防冶肝癌的復方制劑。本發明人經過 反復研究,并通過動物試驗的反復驗證,終于找到了有更好療效保護肝臟 和防治肝癌的口服藥物,即將甘草甜素和苦參堿組成復方組分,該復方組 分能口服給藥,并增加其療效,降低其不良反應。從而完成了本發明。本 發明的技術方案是將甘草甜素(glycyrrhizin,分子式C42H62O16)和苦參堿 (matrine,分子式C15H24N2O)的含量重量比為甘草甜素:苦參堿等于1∶ (0.25-4)或苦參堿∶甘草甜素值等于1∶(0.25-4)組成藥物組合物。該藥物 組合物可口服給藥,用于保護肝臟、防治肝癌。

甘草甜素結構式????????????????????????????????????????????????苦參堿結構式

本發明研究了甘草甜素和苦參堿組成的藥物組合物在保護肝臟中的應 用。

醋氨酚肝損害模型是研究和篩選保肝藥物最常用的模型方法之一。其 機理是中毒量醋氨酚在肝臟CYP450氧化酶作用下,生成活性中間產物,使 肝臟還原型谷胱甘肽耗竭,并與生物大分子結合,產生大量TNF-α,引 起肝細胞壞死。甘草甜素和苦參堿組成的藥物組合物(以下用《GS》表示) 能明顯降低中毒量醋氨酚所致的小鼠死亡率,對醋氨酚引起的肝臟還原型 谷胱甘肽耗竭也有明顯保護作用。該作用不僅與對照組有顯著差異,也優 于單獨使用甘草甜素或單獨使用苦參堿。這一結果表明,《GS》具有明顯保 護肝臟的作用,其療效比口服甘草甜素或苦參堿單一成分好。

本發明研究了保護肝臟的甘草甜素和苦參堿的藥物組合物復方組分的 劑量比。

本發明采用醋氨酚模型,以肝臟還原型谷胱甘肽含量變化為指標,研 究了《GS》中甘草甜素與苦參堿的劑量比。實驗結果表明,甘草甜素∶苦參 堿或苦參堿∶甘草甜素的比值等于1∶(0.25-4)時,對肝臟還原型谷胱甘肽 的保護作用明顯優于單獨使用甘草甜素或單獨使用苦參堿。比值為1∶0.125 時,療效增加不明顯。比值為1∶5時,療效不再增加。

本發明研究了甘草甜素和苦參堿復方組分在防治肝癌中的應用。

二乙基亞硝胺已被證明能誘發人和動物肝臟腫瘤,也是食物和環境中 常見的致癌物質。本發明采用二乙基亞硝胺誘發大鼠肝臟癌前期病變,驗 證了《GS》的防治肝癌作用。結果表明,《GS》除能降低二乙基亞硝胺引起 的大鼠肝/體重比增加外,并能明顯抑制γ一谷氨酰肽酶陽性灶的個數(個 /cm2),使單位體積的陽性灶面積(mm2/cm3)和陽性灶的平均面積(mm2/個) 也明顯縮小。說明《GS》不僅能保護肝臟,而且對二乙基亞硝胺誘發的大 鼠肝臟癌前期病變有明顯防治作用。《GS》的這一作用也明顯優于單獨使用 甘草甜素或苦參堿單一成分。

實驗結果證明,該復方組分不僅可口服給藥,而且療效好,不良反應 明顯減少。

長期大量口服甘草甜素可引起鈉水潴留、高血壓和低血鉀等嚴重不良 反應,限制了該類藥物的臨床應用。苦參堿的主要不良反應是利尿排鈉。 所以,尿量過多的病人不宜選用苦參堿類藥物。本發明比較了《GS》與甘 草甜素或苦參堿單一成分給藥對小鼠尿量、鈉、鉀和氯離子累積排泄量的 影響。發現給予甘草甜素一周后,小鼠9h累積排尿量明顯減少,尿液中 鉀離子含量增加,鈉離子含量降低。而《GS》組小鼠,無論尿量,還是鈉、 鉀離子濃度與對照組比,均無顯著差異。說明《GS》無潴鈉排鉀的不良反 應。

本發明的另外一個目的是提供了該藥物復方制劑的制備方法。

本發明藥物可以采用常規方法制備成任何口服制劑。例如可以將甘草 甜素和苦參堿分別制粒,然后按配比混合均勻制成顆粒劑。可以將甘草甜 素和苦參堿分別制粒,然后按配比混合均勻加入適量輔料制成片劑。也可 以將甘草甜素和苦參堿分別制粒,然后按配比混合均勻制成膠囊劑或制成 各種緩釋制劑。但是這些不能用于限制本發明的保護范圍。

本發明研究了甘草甜素和苦參堿組成的復方組分對水及電介質代謝的 影響。

本發明將甘草甜素和苦參堿分別制粒,然后按1∶0.25、1∶1和1∶4重 量比混合,制備片劑、膠囊劑和顆粒劑,考察了這三種不同劑型在常溫下6 個月和恒溫40℃3個月的穩定性。實驗結果表明,無論室溫下6個月還是 恒溫40℃3個月,《GS》片劑、膠囊劑和顆粒劑的顏色及重量無明顯改變。 采用高效液相色譜測定甘草甜素和苦參堿含量,結果顯示,甘草甜素:苦 參堿或苦參堿:甘草甜素含量比為1∶(0.25-4)時,三種劑型中甘草甜素和 苦參堿的降解率均小于5%。說明由《GS》制備的片劑、膠囊劑和顆粒劑穩 定性好,符合《中華人民共和國藥典》規定。

實驗結果證明,該藥物組合物不僅可口服給藥,而且療效好,不良反 應明顯減少。

具體實施方式

以下通過試驗例來進一步闡明本發明所述藥物的有益效果,這些試驗例 包括了本發明藥物的藥效學試驗和藥劑學試驗。

試驗例1:《GS》對醋氨酚所致小鼠肝毒性的保護作用

80只昆明種小鼠(購于中科院上海實驗動物中心,清潔級),♀♂兼用, 隨機分成四組,每組20只。甘草甜素組:給予0.1%甘草甜素(連云港正大 天晴制藥公司,批號980414)25mg/kg,ig;苦參堿組:給予0.1%苦參堿(上 海第一生化藥業公司,批號9804215)25mg/kg,ig;《GS》組:給予含甘草 甜素和苦參堿各1mg/ml的《GS》0.5ml/20g,ig;對照組給予等量注射用水, ig。上述各組每天給藥一次,連續七天。于第七次給藥后,腹腔注射2%醋 氨酚500mg/kg,觀察其48h死亡率。結果見表1。

表1《GS》對醋氨酚致小鼠肝毒性的保護作用(n=20)

組別??????????死亡數(只)????死亡率(%)

甘草甜素組????11????????????55.0

苦參堿組??????12????????????60.0

《GS》組??????6*???????????30.0*

對照組????????16????????????80.0

*與對照組比,P<0.05

實驗結果表明,《GS》能明顯降低中毒量醋氨酚所致的小鼠死亡率, 該作用不僅與對照組比有顯著差異(P<0.05),而且比甘草甜素組和苦參堿 組分別提高了25%和30%,說明《GS》的保肝作用明顯優于單獨使用甘草甜 素或苦參堿單一成分。

試驗例2:《GS》對小鼠尿量及K+、Na+、Cl-累積排泄量的影響

40只昆明種小鼠,♀♂兼用,隨機分成四組,每組10只。按第一實施 例所述劑量和方法處理。于第七次給藥后,將小鼠分別置于代謝籠中,收 集9h尿液,測定其體積及尿液中K+、Na+、Cl-離子含量。結果見表2。

表2《GS》對小鼠尿量及K+、Na+、Cl-累積排泄量的影響( x±SD,mg,n=10)

組別??????????尿量??????????Na+?????????K+?????????Cl-

甘草甜素組????1.6±0.44*???3.2±0.7*??8.0±2.6????19.6±4.3

苦參堿組??????2.5±0.68?????4.6±1.5?????6.1±2.0????17.2±4.2

《GS》組??????2.2±0.68?????4.4±1.3?????6.2±2.3????16.2±5.3

對照組????????2.3±0.59?????4.3±1.2?????5.8±1.9????16.8±5.2

*與對照組比,P<0.05

實驗結果顯示,給予甘草甜素一周后,小鼠9h累積排尿量明顯減少, 尿液中鉀離子含量增加,鈉離子含量降低。而《GS》組小鼠,無論尿量, 還是鈉、鉀離子濃度與對照組比,均無顯著差異。說明《GS》無潴鈉排鉀 的不良反應。

試驗例3:《GS》對醋氨酚致小鼠肝臟還原型谷胱甘肽耗竭的保護作用

50只昆明種小鼠,♀♂參半,隨機分成5組,每組10只。按第一實 施例所述劑量和方法處理。于第七次給藥后,甘草甜素組,苦參堿組、《GS》 組和模型對照組腹腔注射0.8%醋氨酚200mg/kg,正常對照組給予等量注射 用水。45min后,解剖肝臟,測定其還原型谷胱甘肽(GSH)含量,結果見表 3。

表3《GS》對醋氨酚致小鼠肝臟還原型谷胱甘肽耗竭的保護作用

?????????????(x±SD,μmol/g肝臟組織,n=10)

組別??????????????????????????肝GSH含量

甘草甜素組????????????????????103.1±21.0

苦參堿組??????????????????????81.7±17.3

《GS》組??????????????????????147.6±32.6**

模型對照組????????????????????41.8±10.4

正常對照組????????????????????244.8±50.6

**與甘草甜素組或苦參堿組比,P<0.01

實驗結果表明,《GS》對醋氨酚引起的肝臟還原型谷胱甘肽耗竭有明顯 保護作用,該作用不僅與對照組有顯著差異,也優于單獨使用甘草甜素或 單獨使用苦參堿。

試驗例4:不同劑量比的《GS》對醋氨酚致小鼠肝臟還原型谷胱甘肽耗竭的 保護作用

180只小鼠,♀♂不限,隨機分成18組,每組10只。甘草甜素+苦參 堿組共8組,除一組只給甘草甜素25mg/kg,ig外,另外七組同時分別給予 苦參堿2.5、5、10、20、40、80、100mg/kg,ig。苦參堿+甘草甜素組也分 8組,除一組只給苦參堿25mg/kg;ig外,另外七組同時分別給予甘草甜素 2.5、5、10、20、40、80、100mg/kg,ig。于第七次給藥后,甘草甜素+苦 參堿組、苦參堿+甘草甜素組和模型對照組腹腔注射0.8%醋氨酚200mg/kg, 正常對照組給予等量注射用水。45min后,解剖肝臟,測定其還原型GSH含量, 結果見表4。

表4不同劑量比的《GS》對醋氨酚致小鼠肝臟還原型谷胱甘肽耗竭的保護作用

?????????????????( x±SD,μmol/g肝臟組織,

??????????????????????肝GSH含量(GS劑量比mg.kg-1/mg.kg-1)

組別

????????????(20/0)????(20/2.5)??(20/5)????(20/10)????(20/20)????(20/40)????(20/80)???(20/100)

甘草甜素

????????????90.3±???????????????????????????????108.5?????117.6??????138.1??????159.3??????178.0?????180.7

+?????????????????????89.1±18.4

????????????17.6

?????????????????????????±20.7*??±20.4**??±28.3**??±32.6**??±39.4*??±41.3**

苦參堿組

苦參堿

????????????73.4±???????????????????????????????90.8??????110.4??????138.1??????164.0??????189.5?????191.6

+?????????????????????77.4±16.1

????????????14.8

?????????????????????????±18.2*??±21.4**??±28.3**??±35.6**??±43.3**?±47.7**

甘草甜素組

正常對照組??????????????????????????????????269.0±52.5

模型對照組??????????????????????????????????45.6±8.4△△

△△P<0.01與正常對照組比;

P<0.01,與模型對照組比;*P<0.05,**P<0.01,與甘草甜素 或苦參堿單一組分比。

實驗結果表明,模型對照組小鼠肝臟還原型GSH含量僅為正常對照組的 16.9%,說明本發明建立的醋氨酚肝損害模型是成功的。雖然甘草甜素或苦 參堿單一成分對肝臟還原型GSH有保護作用,但其作用強度明顯低于甘草 甜素和苦參堿組成的復方組分。如表4所示。當甘草甜素:苦參堿或苦參 堿∶甘草甜素的劑量比等于1∶(0.25-4)時,對肝臟還原型GSH的保護作用 明顯優于單獨使用甘草甜素或單獨使用苦參堿。比值為1∶0.125時,療效 增加不明顯。比值為1∶5時,療效不再增加。

試驗例5:《GS》對二乙基亞硝胺誘發大鼠肝癌的防治作用

40只Waster大鼠(購于中科院上海實驗動物中心,清潔級),♀♂兼用, 隨機分成4組,每組10只。適應一周后,按第一實施例所述劑量和方法給 藥,對照組給予等量注射用水。同時腹腔注射二乙基亞硝胺(DEN)100mg/kg; 給予DEN二周后,飼以含0.015%的二乙酰氨基芴(2-AAF)飼料二周。停用 2-AAF一周后,行左和中葉肝切除術。術后第三天將大鼠斷頭處死,解剖 肝臟,統一取右肝葉,4℃丙酮∶酒精(1∶1?v/v)固定。參照文獻報道的 方法測定γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)陽性灶面灶,然后計算每平方厘米肝切 面上GGT陽性灶個數(個/cm2),面積(mm2/cm3)及灶的平均面積(m2/個), 結果見表5。

表5《GS》對二乙基亞硝胺誘發大鼠肝癌的防治作用( x±SD,n=10)

??????????????肝/體重?????????????????GGT陽性情況

組別

??????????????(g/100g)????個/cm2???????mm2/cm3??mm2/個

對照組????????3.6±0.6????25.7±18.1????4.3±2.8????0.25±0.21

甘草甜素組????3.2±0.5????17.8±11.6????2.8±1.9????0.20±0.18

苦參堿組??????3.7±0.6????23.4±17.4????3.8±2.6????0.24±0.27

《GS》組??????2.7±0.5*???10.2±4.8**???1.1±0.8*???0.12±0.12**

與對照組比,*P<0.05;**P<0.01

實驗結果表明,《GS》除能降低二乙基亞硝胺引起的大鼠肝/體重比增加 外,并能明顯抑制γ一谷氨酰轉肽酶陽性灶的個數(個/cm2),使單位體積 的陽性灶面積(mm2/cm3)和陽性灶的平均面積(mm2/個)也明顯縮小。說明 《GS》不僅能保護肝臟,而且對二乙基亞硝胺誘發的大鼠肝臟癌前期病變 有明顯防治作用。《GS》的這一作用也明顯優于單獨使用甘草甜素或苦參堿 單一成分。

實施例1:不同劑量比的《GS》片劑、膠囊劑和顆粒劑的制備及其穩定性研 究

按《中華人民共和國藥典》2000年版關于片劑、膠囊劑和顆粒劑的有 關規定,首先將甘草甜素(藥用原料,由連云港正大天晴制藥公司提供) 和苦參堿(藥用原料,由上海第一生化藥業公司提供)分別與藥用淀粉制 粒,兩者使用同一目數的篩網,確保具有較好的均質性。制粒后,按1∶0.25、 1∶1和1∶4的含量比常規壓片,或制備膠囊劑與顆粒劑。片劑的規格為 每片0.3g,甘草甜素∶苦參堿或苦參堿∶甘草甜素=25mg∶6.25mg、25mg∶25 mg和25mg∶100mg。每片誤差小于±5%,每板12粒,鋁鉑包裝。膠囊劑為 1號膠囊,每粒0.3g,甘草甜素與苦參堿的含量比同片劑,每粒誤差小于 ±7.5%,每板12粒,鋁鉑包裝。顆粒劑的規格是每袋10g,甘草甜素與苦參 堿的含量同片劑和膠囊劑。整粒后,采用PVC袋密閉包裝,每袋誤差小于 ±7.5%

不同劑量比的三種劑型分別生產三批,每批每種6份,分成室溫組和 40℃加速實驗組。室溫組置于室內,溫度為18-25℃。加速實驗組置于40 ℃恒溫箱內,相對濕度為75%。室溫組放置6個月,加速實驗組放置3個月。 界時,精密稱量試藥,研細后加水,充分震蕩。過濾后,置于1000毫升的 容量瓶內定容。按文獻報道方法,采用高效液相色譜測定甘草甜素和苦參 堿含量。結果見表6。

實驗結果表明,無論室溫下6個月還是恒溫40℃3個月,《GS》片劑、 膠囊劑和顆粒劑的顏色無明顯改變,片劑的重量誤差小于5%,膠囊劑和顆 粒劑的重量誤差小于7.5%。采用高效液相色譜測定甘草甜素和苦參堿含量, 結果顯示,甘草甜素∶苦參堿或苦參堿∶甘草甜素含量比為1∶(0.25-4) 時,三種劑型中甘草甜素和苦參堿的降解率均小于5%。說明由《GS》制備的 片劑、膠囊劑和顆粒劑穩定性好,符合《中華人民共和國藥典》規定。

表6不同劑量《GS》片劑、膠囊劑和顆粒劑的穩定性實驗( x±SE,n=9)

??????????????????25mg/6.25mg?????????????25mg/25mg???????????????25mg/100mg

?????????????室溫6個月???60℃3個月???室溫6個月???60℃3個月???室溫6個月???60℃3個月

(甘草甜素+???24.2±0.5???23.9±0.4???24.0±0.4???23.8±0.4???24.2±0.4???23.8±0.4

苦參堿)片????/6.1±0.1???/6.0±0.1???/24.3±0.3??/24.0±0.4??/97.1±1.9??/95.8±1.7

(苦參堿+甘???24.4±0.4???24.1±0.4???24.5±0.4???24.0±0.4???24.3±0.4???24.0±0.4

草甜素)片????/6.0±0.1???/5.9±0.1???/23.9±0.5??/23.8±0.4??/97.0±1.9??/95.1±1.7

(甘草甜素+???24.1±0.4???23.7±0.4???24.2±0.4???23.8±0.4???24.0±0.4???23.8±0.4

苦參堿)膠囊??/6.1±0.1???/5.9±0.1???/24.3±0.5??/23.9±0.4??/97.2±1.8??/95.8±1.8

(苦參堿+甘???24.5±0.4???24.1±0.4???24.3±0.4???24.0±0.4???24.4±0.4???24.1±0.5

草甜素)膠囊??/6.0±0.1???/6.0±0.1???/24.1±0.4??/23.8±0.4??/97.7±1.8??/96.3±1.6

(甘草甜素+???24.3±0.4???24.0±0.4???24.1±0.5???24.9±0.4???24.1±0.4???23.9±0.4

苦參堿)顆粒??/6.1±0.1???/6.0±0.1???/24.4±0.4??/24.2±0.3??/97.4±1.9??/96.6±1.8

(苦參堿+甘???24.4±0.4???24.2±0.4???24.1±0.4???24.0±0.4???24.3±0.4???24.1±0.4

草甜素)顆粒??/6.0±0.1???/5.9±0.1???/23.9±0.4??/23.7±0.4??/96.5±1.9??/95.9±1.9

關于本文
本文標題:一種保護肝臟防治肝癌的藥物組合物.pdf
鏈接地址:http://www.wwszu.club/p-6770160.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開
鬼佬大哥大