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一種斑馬魚魚苗開口飼料.pdf

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一種 斑馬 魚苗 開口 飼料
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摘要
申請專利號:

CN201010514931.5

申請日:

20101021

公開號:

CN101965927B

公開日:

20120905

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A23K1/18 主分類號: A23K1/18
申請人: 杭州環特生物科技有限公司
發明人: 張勇,彭恩澤
地址: 311231 浙江省杭州市蕭山區蕭山經濟技術開發區傳化大地(浙江省農業高科技示范園區)
優先權: CN201010514931A
專利代理機構: 浙江翔隆專利事務所 代理人: 張建青
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201010514931.5

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

目前,國內外并沒有專門的斑馬魚魚苗開口飼料,一些國外飼料公司生產的小型魚魚苗開口飼料也比較適合用作斑馬魚魚苗開口飼料,但喂食斑馬魚魚苗的效果不理想,飼料的適口性不好,斑馬魚魚苗的進食積極性不高。本發明提供了一種斑馬魚魚苗開口飼料,其特征在于它含有以下重量百分含量的組分:魚粉30~35%,蝦粉25~30%,玉米粉10~15%,大豆多肽5~10%,豬腦粉3~5%,魚油5~8%,椰子油3~5%,葵花籽油3~5%,海藻粉2~3%,啤酒花粉0.2~0.3%,磷酸氫鈣0.5~1%。使用本發明提供的斑馬魚魚苗開口飼料,極大地提高了斑馬魚魚苗的成活率,并降低了斑馬魚的養殖成本。

權利要求書

1.一種斑馬魚魚苗開口飼料,其特征在于它由以下重量百分含量的組分和輔助成分組成:魚粉30~35%,蝦粉?25~30%,玉米粉?10~15%,大豆多肽?5~10%,豬腦粉?3~5%,魚油?5~8%,椰子油?3~5%,葵花籽油?3~5%,海藻粉?2~3%,啤酒花粉?0.2~0.3%,磷酸氫鈣?0.5~1%;所述的輔助成分包括復合礦物質、免疫多糖和復合低聚糖,每1000g飼料中的添加量如下:復合礦物質:FeSO·HO?90~120mg,CuSO·5HO?7~10mg,MnSO·HO?30~50mg,MgSO·7HO?600~1200mg,ZnSO·HO?50~80mg,KI?0.5~1.0mg,,NaSeO?10~15mg;免疫多糖:β-葡聚糖?150~200?mg,甘露聚糖?80~120?mg,果寡糖30~50mg;復合低聚糖:麥芽低聚糖?50~80?mg,果糖低聚糖?20~35?mg;所述的飼料采用微囊化工藝制成微囊飼料。

說明書

技術領域

本發明涉及水產飼料領域,尤其涉及一種斑馬魚魚苗開口飼料。

背景技術

斑馬魚(Zebrafish)屬于鯉科、丹尼屬,是一種熱帶淡水魚,原產于印度、孟加拉等國,又名藍條魚、花條魚。斑馬魚具有繁殖能力強、體外受精和發育、胚胎透明、性成熟周期短、個體小、易養殖等優點,現在已經成為發育學研究、基因毒性研究、藥物篩選、毒理學研究、環境毒性分析等眾多研究領域的一個重要模式生物。

斑馬魚體型較小,剛孵化出來的斑馬魚魚苗體長不足5mm,成魚體長一般也只有3~5cm。斑馬魚從受精卵開始的發育大致可以分為以下幾個階段:胚胎期(0~48小時),魚苗期(3天~20天),幼魚期(21天~90天),成魚期(90天以后)。斑馬魚一般在第5天就具備了吞咽能力,但前6天不需要進食,因為卵黃囊提供的營養可以滿足魚苗的生長需要;第7天卵黃囊消失,斑馬魚必須通過從外界攝食來獲得生長所需的營養物質。一般把魚苗第一次攝食到開始攝食后一段時間內所吃的飼料叫做開口飼料,魚苗從依靠體內營養物質到從外界攝食有一個適應過程,只有合適的開口飼料才能符合魚苗的進食習慣并滿足魚苗生長的營養需要。斑馬魚魚苗一般在第7~20天需要喂食開口飼料,第21天之后可以喂食成魚飼料。

目前對斑馬魚的營養需求還缺乏系統、全面的研究,無法得知斑馬魚魚苗開口飼料中的營養成分應該滿足那些指標。結果表明,一般熱帶淡水魚飼料中的常規營養成分應該滿足以下指標(質量百分比):粗蛋白≥42%,粗脂肪≥4%,粗纖維≤4%,粗灰分≤12%,水分≤5%,0.8%≤磷≤1.7%,0.9%≤鈣≤1.6%.斑馬魚魚苗生長階段對營養物質和能量的需求比成魚要高,因此斑馬魚魚苗開口飼料中的蛋白和脂肪含量應該高于以上指標,礦物質和維生素也必不可少。

除了營養成分之外,斑馬魚魚苗開口飼料還必須具備很好的適口性,即符合斑馬魚魚苗的攝食習慣,這樣才能誘使魚苗進行攝食。飼料大小,首次開口攝食的斑馬魚魚苗最大口徑僅為100μm,其最適的開口飼料大小以30~50μm為宜。飼料的懸浮性,斑馬魚是翹嘴魚,容易捕食在上層水域中的漂浮食物和懸浮的食物,不易捕食水底的食物,所以其飼料更應具有較好的懸浮性。飼料氣味,斑馬魚魚苗攝食對嗅覺依賴較大,所以飼料應該具有較好的誘食性。

另外,斑馬魚的最適養殖水溫在28℃左右,在這種溫度下,水體中很容易滋生一些危害斑馬魚健康的微生物和原生動物,這些病菌和寄生蟲的生長會導致斑馬魚魚苗的大量死亡。因此,斑馬魚魚苗開口飼料必須具備較好抑菌效果并能增強魚苗的免疫能力。

目前,國內外并沒有專門的斑馬魚魚苗開口飼料,不過有一些國外飼料公司生產的小型魚魚苗開口飼料也比較適合用作斑馬魚魚苗開口飼料,像美國的Argent?Laboratories公司生產的Hatchfry?Encapsulon?Grade?O,Zeigler公司的Larval?AP100和日本的Miyako?Kagaku公司生產的Fry?Feed?Kyowa?N-250等。但這些國外公司的飼料價格很昂貴,像Argent?Laboratories公司生產的500g包裝的Hatchfry?Encapsulon?Grade?O在美國的售價高達54美元;而且,這些公司的飼料現在在國內都沒有銷售。美國AHT公司生產的小型魚魚苗開口飼料在國內有銷售,價格也適中,但該飼料喂食斑馬魚魚苗的效果不理想,飼料的適口性不好,斑馬魚魚苗的進食積極性不高。

國內現在的斑馬魚魚苗開口飼料一般都是養殖者自制的,主要有三種:蛋黃水、草履蟲和魚顆粒飼料粉碎得到的微粒飼料。蛋黃水是普通小型觀賞魚愛好者最常用的開口飼料,來源方便、成本低廉、營養豐富,但用于熱帶魚喂養時存在容易污染水質、水體易滋生病菌的問題,魚苗成活率一般不足10%。草履蟲也是一種常見的小型魚活餌開口飼料,易被斑馬魚魚苗捕食、容易消化、水質污染小,但草履蟲培養過程中容易滋生一些危害魚苗健康的病菌和原生動物,所以對培養條件要求較高,需要保持較好的無菌條件,收集和清洗也較為麻煩。魚顆粒飼料粉碎后制得的微粒飼料大小比較適合斑馬魚魚苗進食,保存方便;但普通飼料的營養成分不能很好地滿足斑馬魚魚苗的生長需要,魚苗的進食積極性不高,而且容易導致水質變壞,魚苗成活率一般不高于20%。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服上述現有技術存在的缺陷,提供一種營養均衡、適口性好、安全可靠、水質污染小的斑馬魚魚苗開口飼料,達到提高斑馬魚魚苗的成活率、降低斑馬魚養殖成本的目的。

本發明所述的斑馬魚魚苗開口飼料,其組分和重量配比如下:

魚粉??????30~35%????蝦粉????????25~30%

玉米粉????10~15%????大豆多肽????5~10%

豬腦粉??????3~5%??????魚油????????5~8%

椰子油??????3~5%??????葵花籽油????3~5%

海藻粉??????2~3%??????啤酒花粉????0.2~0.3%

磷酸氫鈣????0.5~1%????輔助成分????0.1~0.2%

其中輔助成分包括復合礦物質、免疫多糖和復合低聚糖,每1000g飼料中的添加量如下:

復合礦物質:FeSO4·H2O?90~120mg,CuSO4·5H2O?7~10mg,MnSO4·H2O?30~50mg,MgSO4·7H2O?600~1200mg,ZnSO4·H2O?50~80mg,KI?0.5~1.0mg,,Na2Se2O3?10~15mg;

免疫多糖:β-葡聚糖150~200mg,甘露聚糖80~120mg,果寡糖30~50mg;

復合低聚糖:麥芽低聚糖50~80mg,果糖低聚糖20~35mg。

本發明提供的斑馬魚魚苗開口飼料營養豐富、安全可靠。

魚粉和蝦粉含有較高的天然粗蛋白,大豆多肽中則含有豐富大豆蛋白水解多肽,能為魚苗生長提供各種必需氨基酸;粗蛋白和水解多肽的合理搭配既有利于魚苗對氨基酸的吸收,又不會減弱魚苗對蛋白的消化能力。玉米粉不僅可以提供魚苗生長所需的能量,也含有較多的不飽和脂肪酸;魚油、葵花籽油和椰子油中也含有豐富的飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸和中鏈脂肪酸,可以完全滿足魚苗生長過程中對脂肪酸的需求。飼料中不僅含有鈣、磷、鐵等礦物質,也含有鋅、硒、鈷等微量元素。原料的多樣性也保證了飼料含有豐富的維生素。

本發明飼料配方的創新之處在于選擇豬腦粉作為主要的磷脂來源。豬腦粉的原料為新鮮豬腦,來源廣泛,安全可靠,目前已有商業化產品銷售。豬腦中含有較多的腦磷脂,有利于促進魚苗大腦和腦部神經發育,增強其攝食能力。另外,豬腦中含有多種礦物質、幾乎所有種類的氨基酸和除維生素A以外的各種維生素,可以為魚苗的生長提供豐富的營養;豬腦粉的獨特氣味也具有較好的誘食性。雖然蛋黃粉和大豆粉作為常見的飼料原料,也都可以作為磷脂來源,但是如果用作魚苗開口飼料的原料,它們都有明顯的不足之處:在蛋雞的養殖過程中要使用大量的添加劑和抗生素,這使得蛋黃粉作為魚苗開口飼料的安全性很難得到保證。大豆粉中的磷脂種類齊全但含量較低;另外,與豬腦粉相比,大豆粉的誘食性較差。

本發明飼料配方的另一個創新之處在于添加了一種新的天然抗菌成分:啤酒花粉。啤酒花粉由多年生莖蔓草本植物啤酒花制得,目前國內市場已有成品銷售。啤酒花,學名蛇麻花,生長分布廣泛,獲取方便,是啤酒釀造必不可少的原料之一。啤酒花中所含有的律草酮、蛇麻酮、聚蛇麻酮、香葉烯和律草烯等活性物質具有很好的抑菌效果,研究表明其抑菌效果主要表現在兩個方面:一是能有效抑制腸道病菌生長,減少動物消化道疾病;二是對包括結核分支桿菌在內的多數分支桿菌具有明顯的抑菌效果,能降低斑馬魚呼吸系統疾病的發病率。斑馬魚養殖中最常見的病菌是分支桿菌,其中的結核分支桿菌對斑馬魚和人都具有致病性;飼料中添加啤酒花不僅有利于催進斑馬魚的健康,也能降低養殖人員感染疾病的風險。另外,斑馬魚沒有胃,其消化系統對腸道益生菌的依賴較大;啤酒花可以通過抑制腸道致病菌的生長來維持腸道益生菌群落的穩定,減少斑馬魚腸道疾病的發生。

此外,飼料中添加的椰子油含有豐富的中鏈脂肪酸,能夠有效抑制由細菌、病毒和寄生蟲感染引起的多種魚病;免疫多糖和低聚糖提高人和動物(包括魚類)的機體免疫能力的作用也已經得到了廣泛的證實。因此,本飼料中所含有的天然成分在抑制病菌的同時能增強魚苗的免疫能力,不僅有效而且安全。

將本發明所提供的飼料采用微囊化工藝進行生產,生產出微粒大小在30μm左右的飼料,即可得到斑馬魚魚苗開口飼料。微囊飼料具有懸浮性好、防腐性好、水質污染小、營養物質析出少但又不遮蔽氣味散發等優點,很符合斑馬魚魚苗的攝食習慣。飼料的微囊化生產工藝已經較為成熟,在此不做詳細闡述,僅在實施例中加以說明。

綜上所述,本發明提供的斑馬魚魚苗開口飼料具有營養豐富、安全可靠、原料易得、不易變質、水質污染小等優點;使用本發明提供的斑馬魚魚苗開口飼料,極大地提高了斑馬魚魚苗的成活率,并降低了斑馬魚的養殖成本。

以下通過具體實施例對本發明作進一步闡述。

具體實施方式

實施例1

斑馬魚魚苗開口飼料的組分和重量配比如下:

魚粉??????30~35%????蝦粉????????25~30%

玉米粉????10~15%????大豆多肽????5~10%

豬腦粉????3~5%??????魚油????????5~8%

椰子油????3~5%??????葵花籽油????3~5%

海藻粉????2~3%??????啤酒花粉????0.2~0.3%

磷酸氫鈣??0.5~1%????輔助成分????0.1~0.2%

其中輔助成分包括復合礦物質、免疫多糖和復合低聚糖,每1000g飼料中的添加量如下:

復合礦物質:FeSO4·H2O?90~120mg,CuSO4·5H2O?7~10mg,MnSO4·H2O?30~50mg,MgSO4·7H2O?600~1200mg,ZnSO4·H2O?50~80mg,KI?0.5~1.0mg,,Na2Se2O3?10~15mg;

免疫多糖:β-葡聚糖150~200mg,甘露聚糖80~120mg,果寡糖30~50mg;

復合低聚糖:麥芽低聚糖50~80mg,果糖低聚糖20~35mg。

斑馬魚魚苗開口飼料的制作步驟如下:

(一)稱取魚粉140g、蝦粉100g、玉米粉50g、大豆多肽30g、豬腦粉14g海藻粉10g、啤酒花粉1g,共345g,混合后進行超微粉碎,粉碎粒徑:25~30μm。

(二)溶解50g蔗糖酯于1000ml滅菌處理的自來水中,制成5%的蔗糖酯乳化液。

(三)將粉碎后的混合原料345g、魚油20g、椰子油20g、葵花籽油12g、磷酸氫鈣2g、輔助成分0.6g,共計400g飼料原料加入到步驟(二)制得的1000ml蔗糖酯乳化液中,加樣的同時進行攪拌,得到原料乳濁液。

(四)稱取100g明膠,用冷水浸泡60分鐘;將浸泡后的明膠全部加入到1000ml滅菌處理的自來水,同時加入50g麥芽糊精,60℃攪拌溶解,制成15%的水溶膠;冷卻至室溫備用。

(五)將步驟(三)制得的原料乳濁液加入到步驟(四)制得的水溶膠中,二者的體積比為1∶1,加樣的同時進行攪拌;制得2000ml質量濃度比為30%的混合乳濁液,用勻質器充分勻質。

(六)在進料速度為500毫升/小時,進風口溫度為195℃,出風口溫度為85℃,壓縮空氣壓強為1MPa的條件下將步驟(五)制得的2000ml混合乳濁液進行噴霧干燥。

(七)用分離器收集噴霧干燥得到的飼料,自然冷卻后,篩選粒徑在25~35μm的顆粒飼料并包裝。

上述飼料所用的各原料用量可以根據配方作適當調整。

實施例2??不同飼料投加到水體后的性狀變化比較

實驗所用飼料包括:雞蛋黃粉、微粒飼料、開口飼料。雞蛋黃粉是從市場購買的成品;微粒飼料是將從市場購買的熱帶魚顆粒飼料進行超微粉碎所得,粉碎粒徑:≤30μm;開口飼料即為本發明提供的斑馬魚魚苗開口飼料(后面實施例中提到雞蛋黃粉、微粒飼料、開口飼料與本實施例相同)。

在容積為3L的養魚缸內加入1L的斑馬魚養殖用水,靜置,每個魚缸內加入約5mg飼料(以飼料擴散后覆蓋整個水面為準)。觀察水溫為28℃時,飼料投加后的沉底時間、水體變混濁時間、魚缸底部長菌時間。結果見表1。

從表中數據可以看出,與雞蛋黃粉和微粒飼料相比,開口飼料在漂浮性能、減少水質污染和抑制細菌生長方面都具有明顯的優勢。

表1??不同飼料投加到水體后的性狀變化比較

實施例3??喂食不同飼料時的斑馬魚魚苗成活率1

斑馬魚魚苗在第6~7天時需要從外界獲取食物,本實驗選擇在第6天時給魚苗喂食。從3組不同成魚(分別記作Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)繁殖的魚苗中各挑出300尾發育正常斑馬魚,平均分成3組,一共9組(分別記作Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅰ3,Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅱ3,Ⅲ1、Ⅲ2、Ⅲ3),每組各有魚苗100尾。

在容積為3L的養魚缸內加入600ml(水深約3cm)的斑馬魚養殖用水,一共9缸,將上述9組魚分別放入其中一缸,水溫28℃,靜置喂養。從第6天起每天喂食3次(9:00,12:30,16:00),單個魚缸每次的喂食量約5mg,其中Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1喂食雞蛋黃粉,Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2喂食微粒飼料,Ⅰ3、Ⅱ3、Ⅲ3喂食開口飼料。每天更換魚缸內約2/3體積的水,從第10天起魚缸內養殖用水加到1000ml(水深約5cm),從第15天起魚缸內養殖用水加到2000ml(水深約10cm)。每天將魚缸內的死魚撈出并計數,分別統計各魚缸內魚苗在第10天、第15天和第21天的存活率。結果見表2。

表2??喂食不同飼料時的斑馬魚魚苗成活率1

到第21天時,雞蛋黃粉實驗組魚苗成活率為0~2%,微粒飼料實驗組魚苗成活率為12~15%,開口飼料實驗組魚苗成活率為54~57%;開口飼料明顯優于微粒飼料和雞蛋黃粉。這是由水質和飼料營養兩個因素決定的。即使每天換水,雞蛋黃粉實驗組魚缸水體仍然較為混濁,魚缸底部有大量菌體生長;微粒飼料實驗組魚缸水體較為清澈,底部有少量菌體生長;開口飼料實驗組魚缸水體清澈,底部幾乎沒有菌體生長。第15天時雞蛋黃粉實驗組大部分魚苗發生軀干彎曲,微粒飼料實驗組部分魚苗發生軀干彎曲,開口飼料實驗組魚苗沒有發生軀干彎曲;這種軀干彎曲俗稱“塌腰”,是魚苗發育過程中營養不良的典型癥狀。

實施例4??喂食不同飼料時的斑馬魚魚苗成活率2

斑馬魚魚苗的分組、換水條件以及前9天的喂養條件與實施例3相同。從第10天起,每天中午給魚苗加喂一次新鮮的豐年蝦幼蟲。每天將魚缸內的死魚撈出并計數,分別統計各魚缸內魚苗在第10天、第15天和第21天的成活率,結果見表3。

表3??喂食不同飼料時斑馬魚魚苗的成活率2

到第21天時,雞蛋黃粉實驗組魚苗成活率為14~17%,微粒飼料實驗組魚苗成活率為21~26%,開口飼料實驗組魚苗成活率為52~61%.。對比實施例3的實驗結果發現,加喂豐年蝦幼蟲能顯著提高雞蛋黃粉實驗組和微粒飼料實驗組的魚苗成活率,但并沒有顯著提高開口飼料實驗組魚苗成活率。第15天時雞蛋黃粉實驗組魚苗只有少數發生軀干彎曲,微粒飼料和開口飼料實驗組魚苗沒有發生軀干彎曲。實驗過程中,各實驗組魚苗均未出現“塌腰”現象。

實施例5??喂食不同飼料時斑馬魚魚苗成活率和體長比較

從3組不同成魚(分別記作Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)繁殖的魚苗中各挑出200尾發育正常、長到第6天的斑馬魚,平均分成2組,一共6組(分別記作Ⅰ1、Ⅰ2,Ⅱ1、Ⅱ2,Ⅲ1、Ⅲ2),每組各有魚苗100尾。

在容積為3L的養魚缸內加入600ml(水深約3cm)的斑馬魚養殖用水,一共6缸,將上述6組魚分別放入其中一缸,水溫28℃,靜置喂養。每天喂食3次(9:00,12:30,16:00),單個魚缸每次的喂食量約5mg開口飼料(以飼料擴散后覆蓋整個水面為準);Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1只喂食開口飼料,Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2從第10天起,每天中午加喂一次新鮮的豐年蝦幼蟲。每3天更換一次魚缸內的水,每次更換約1/2體積;從第10天起魚缸內養殖用水加到1000ml(水深約5cm),從第15天起魚缸內養殖用水加到2000ml(水深約10cm)。每天將魚缸內的死魚撈出并計數,分別統計每個魚缸內魚苗在第21天的成活率;并測量第21天時魚苗的體長,并計算每個魚缸內魚苗的平均體長。結果見表4。測量魚苗體長時必須用麻醉劑將魚苗麻醉,為了避免使用麻醉劑對后續實驗結果造成干擾,本實驗沒有測量開始喂食時的魚苗體長(即第6天時魚苗的體長)。

表4??喂食不同飼料時斑馬魚魚苗成活率和體長比較

只喂食開口飼料實驗組魚苗的成活率為53~56%,從第10天開始加喂豐年蝦幼蟲實驗組魚苗的成活率為52~61%;加喂豐年蝦幼蟲實驗組魚苗的平均成活率比只喂食開口飼料實驗組魚苗的平均成活率高約3.7%,沒有明顯提高。這一實驗結果與實施例4的實驗結果一致。只喂食開口飼料實驗組魚苗的平均體長約6.4mm,加喂豐年蝦幼蟲實驗組魚苗的平均體長約6.7mm;加喂豐年蝦幼蟲實驗組魚苗的平均體長比只喂食開口飼料實驗組魚苗的平均體長長約4.7%,無明顯效果。

以上實施例僅以斑馬魚魚苗為例進行說明,但本發明提供的飼料不局限于斑馬魚魚苗,適當調整本發明飼料配方中的原料配比并調整生產工藝參數,亦可將本飼料用于斑馬魚幼魚和斑馬魚成魚的養殖。同樣,本發明提供的飼料也可用于發育特征和營養需求與斑馬魚相似的其它硬骨魚,比如青鳉(Medaka)、河豚(Pufferfish)以及波條丹(魚丹)(Giant?Danio)等的養殖。

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