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草果精油及其乳劑作為農藥的用途.pdf

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草果 精油 及其 乳劑 作為 農藥 用途
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摘要
申請專利號:

CN201810019834.5

申請日:

20180109

公開號:

CN108244103A

公開日:

20180706

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01N25/04,A01N43/90,A01N27/00,A01N49/00,A01N35/02,A01P3/00 主分類號: A01N25/04,A01N43/90,A01N27/00,A01N49/00,A01N35/02,A01P3/00
申請人: 中國醫學科學院藥用植物研究所
發明人: 高微微,焦曉林,羅毅,胡永建,樊瑛,畢艷孟
地址: 100193 北京市海淀區馬連洼北路151號
優先權: CN201810019834A
專利代理機構: 北京卓孚知識產權代理事務所(普通合伙) 代理人: 張穎;李亞
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201810019834.5

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及草果精油及其乳劑作為農藥的用途,可廣泛用于農林牧作物病原菌的防治。所述草果精油含有以重量計如下含量的特征成分:(1)1,8?桉葉油素:45?65%;以及(2)檸檬醛:1?3.5%。所述草果精油乳劑按重量計的組成如下:(1)草果精油10份;(2)溶劑20?35份;(3)助劑5?15份;和(4)水40?55份。

權利要求書

1.草果精油作為植物源農藥的用途,所述草果精油含有以重量計如下含量的特征成分:(1)1,8-桉葉油素:45-65%;(2)檸檬醛:1-3.5%。2.根據權利要求1的用途,其中以重量計1,8-桉葉油素的含量為50-63%。優選地,以重量計1,8-桉葉油素的含量為58-63%。3.以如下方法制備的草果精油作為植物源農藥的用途,所述方法包括:(1)稱取一定量的干燥草果,敲成小塊或粉碎成粗粉;(2)以干燥草果小塊或粗粉作為原料提取草果精油;以及(3)用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率;其中提取草果精油的方法選自:水蒸氣蒸餾法、溶劑提取法、CO超臨界萃取技術、亞臨界水萃取和微波輔助萃取法。4.根據權利要求3的用途,其中在采用水蒸氣蒸餾法的提取方法中:干燥草果小塊或粗粉和水的重量比為1:3-1:20,將干燥草果小塊或粗粉在水中浸泡0-24小時;然后水蒸氣蒸餾提取0.5-10小時;用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率,所述得油率以重量計在1.0%-2.5%的范圍內,優選地,以干燥草果小塊或粗粉和水的重量比為1:4-1:10,將干燥草果小塊或粗粉在水中浸泡0-4小時;然后水蒸氣蒸餾提取3-8小時;用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率;所述干燥草果可以是經晾干獲得的干燥草果,或者是經烤干獲得的干燥草果,優選地,以干燥草果小塊或粗粉和水的重量比為1:7,將干燥草果小塊或粗粉在水中浸泡1小時;然后水蒸氣蒸餾提取7小時;用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率,所述得油率以重量計在1.0%-2.5%的范圍內,所述干燥草果可以是經晾干獲得的干燥草果,或者是經烤干獲得的干燥草果。5.草果精油乳劑作為植物源農藥的用途,所述草果精油乳劑按重量計的組成如下:(1)草果精油10份;(2)溶劑20-35份;(3)助劑5-15份;和(4)水40-55份。6.根據權利要求5的用途,所述溶劑選自:甲醇、乙醇、正丁醇、正丙醇、異丙醇、異丁醇、正戊醇、異戊醇、正己醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲亞砜、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、環己酮、吡咯烷酮、N-甲基吡咯烷酮,或是其中兩種或多種的混合物;優選地,所述溶劑選自:乙醇、甲醇、丙醇、異丙醇、丁醇、丙三醇、丙酮等,或是其中兩種或多種的混合物;優選地,所述溶劑為甲醇、乙醇或二者的混合物。7.根據權利要求5或6的用途,所述助劑為表面活性劑、載體和/或分散劑,所述表面活性劑選自吐溫類、司盤類、十二烷基硫酸鈉、醇類、丙二醇、聚乙二醇和甘油,所述分散劑選自六偏磷酸鈉、焦磷酸鈉、聚丙烯酸鈉鹽和聚乙烯醇,所述載體選自脂質體、環糊精和微囊;優選地,所述助劑為表面活性劑和/或載體,所述表面活性劑選自吐溫類、烷基酚聚氧乙烯醚類、司盤類、十二烷基硫酸鈉,所述載體選自脂質體、環糊精和微囊。8.根據權利要求5的用途,所述草果精油乳劑選自:由草果精油1份,乙醇3.5份,吐溫類表面活性劑1.5份和水4份攪拌均勻獲得的乳劑;由草果精油1份,乙醇2份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑1.5份和水5.5份攪拌均勻獲得的乳劑;由草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑0.5份和水4份攪拌均勻獲得的乳劑;由草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑1.5份和水4份攪拌均勻獲得的乳劑;和由草果精油1份,乙醇2.5份,甲醇1份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑1.5份和水4份攪拌均勻獲得的乳劑。9.根據權利要求1-8任一項的用途,其中所述植物源農藥能用于防治由選自以下植物病原菌引起的植物病害:青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)、鐮刀屬(Fusarium)、土赤殼屬(Ilyonectria)、鏈格孢屬(Alternaria)、枝孢屬(Cladosporium)、立枯絲核(Rhizoctoniasolani)和/或灰葡萄孢菌(Botrytiscinerea)。10.根據權利要求10的用途,所述曲霉屬的病原菌為黃曲霉(Aspergillusflavus),所述青霉屬的病原菌為波蘭青霉(Penicilliumpolonicum)和產黃青霉(Penicilliumchrysogenum),所述鐮刀屬的病原菌為茄病鐮刀(Fusariumsolani)和尖孢鐮刀(Fusariumoxysporum),所述土赤殼屬的病原菌為擬參土赤殼(Ilyonectriamors-panacis)和強壯土赤殼(Ilyonectriarobusta),所述鏈格孢屬的病原菌為人參鏈格孢(Alternariapanax),所述枝孢屬的病原菌為枝狀枝孢霉(Cladosporiumcladosporioides)。11.根據權利要求1-10任一項的用途,其中所述植物源農藥能施用于以下的對象:選自人參、西洋參、三七、貝母、黃芪、甘草、桔梗、款冬花、板藍根、丹參、紅花、麥冬、白及、川芎、白術、百合、紅景天、牡丹和蘆薈的藥用植物;選自小麥、玉米、水稻、花生和大豆的大田作物;選自馬鈴薯、番茄、黃瓜、芹菜、辣椒、茄子、洋蔥的蔬菜作物;選自煙草等經濟作物;選自葡萄、柑橘、草莓、蘋果、香蕉、枇杷和西番蓮的水果作物。12.根據權利要求1-10任一項的用途,其中所述植物源農藥能用于防治由以下植物病原菌引起的植物病害:人參、西洋參、三七的立枯病、灰霉病、黑斑病和根腐病;貝母灰霉病和鱗莖腐爛病;黃芪、甘草、桔梗、款冬花、板藍根、丹參、紅花、麥冬、白及、川芎、紅景天、白術、牡丹和蘆薈根腐病;百合枯萎病;小麥莖基腐病和根腐病;玉米穗腐病和粒腐病;水稻穗腐病;花生根腐病和爛果病;大豆根腐病;馬鈴薯干腐病;番茄灰霉病、立枯病、枯萎病和葉斑病;黃瓜灰霉病、立枯病和根腐病;芹菜、辣椒和茄子的根腐病和立枯病;洋蔥青霉病;煙草根腐病;葡萄灰霉病和黑根病;柑橘青霉菌;草莓灰霉病和根腐病;蘋果霉心病和灰霉病;香蕉枯萎病枇杷腐爛病;西番蓮果腐病。

說明書

技術領域

本發明涉及植物源的草果精油及其乳劑作為農藥的用途,可廣泛用于農林牧作物病原菌的防治。

背景技術

農藥在農林牧業生產中發揮著十分重要的作用,可用于防治危害農林牧業生產的有害生物。目前常用的農藥主要是化學合成的農藥,其中殺菌劑農藥主要是有機磷類,二硫化氨甲酸鹽類,氨基磺酸類,硫代磺酸酯類,三氯甲硫基類,有機磷酸酯類,有機砷類,有機錫類,有機硫類,苯類,雜環類等。這些類型的化學殺菌劑在具有殺菌、抑菌效果的同時常常伴隨著一定的毒性。

長期食用受農藥污染的蔬菜是導致癌癥、動脈硬化、心血管疾病、胎兒畸形、死胎、早夭、早衰等疾病的重要原因。因此,世界上越來越多的國家都非常重視農產品的安全性,對農藥殘留的限制十分嚴格,因為農產品的安全性關系到國計民生。同時,農藥殘留超標也是農產品進出口經常遇到的問題,影響著農產品在國際市場的競爭力。隨著人們健康意識的提高,降低農藥殘留量、努力開發新型農藥已經成為當務之急。

天然植物是地球上的資源寶庫,人類對天然植物源物質的研究已有幾千年的歷史,是藥物的主要來源。近年來,隨著人們對植物源制劑天然、健康、低毒、無化學殘留等特點的認識,全球市場對天然健康原料產品的需求也日益增加,植物提取物行業的發展越來越快。因此,近年來,植物源制劑的研究開發和應用逐步得到業內人士的重視,并得到了長足的發展。

植物源農藥是利用植物資源開發的農藥,來源于自然,如果植物本身沒有毒性,通常由植物所制備的植物源農藥不會污染環境及農產品,在環境和人體中不會累積毒性,對人和牲畜相對安全。而且,植物源農藥通常不是單一的一種化合物,是植物有機體的全部或者一部分有機物質,成分復雜,害蟲或者有害微生物對其難以產生抗性,具有低毒、低殘留的特點,因此,植物源農藥有廣闊的市場前景。

目前植物源抑菌劑農藥的開發主要集中在菊科、豆科、傘形科、禾本科、唇形科、木蘭科、馬兜鈴科、蓼科、木犀科、百合科、葫蘆科、莎草科、十字花科和樟科等科。其中,具有抑菌活性的物質為萜烯類、生物堿、酚類、聚乙炔類、獨特的多肽和多糖等。

草果(Amomum tsaoko)是姜科(Zingiberaceae)、豆蔻屬(Amomum)多年生草本植物,主要分布于我國的云南、廣西、貴州等省區。草果具有特殊濃郁的辛辣香味,主要作調味香料,是烹調佐料中的佳品。目前,鮮有從姜科植物獲得植物提取物作為植物源農藥的報道。

發明內容

本發明涉及從干燥成熟草果的果實提取的草果精油及其乳劑作為植物源農藥的用途。

第一方面,本發明提供了草果精油作為植物源農藥的用途,所述草果精油含有以重量計如下含量的特征成分:

(1)1,8-桉葉油素:45-65%;

(2)α-蒎烯:2-4%;

(3)香葉醇:0-4%;和

(4)香葉醛:5-8%。

優選地,以重量計,1,8-桉葉油素的含量為50-63%。優選地,以重量計,1,8-桉葉油素的含量為58-63%。

第二方面,本發明提供了以如下制備方法制備的草果精油作為植物源的用途,所述方法包括:

(1)稱取一定量的干燥草果,敲成小塊或粉碎成粗粉;

(2)以干燥草果小塊或粗粉作為原料提取草果精油;以及

(3)用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率。

提取草果精油的方法選自:水蒸氣蒸餾法、溶劑提取法、CO2超臨界萃取技術、亞臨界水萃取和微波輔助萃取法。

在采用水蒸氣蒸餾法的提取方法中:

干燥草果小塊或粗粉和水的重量比為1:3-1:20,將干燥草果小塊或粗粉在水中浸泡0-24小時;然后水蒸氣蒸餾提取0.5-10小時;用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率。

優選地,以干燥草果小塊或粗粉和水的重量比為1:3-1:10,將干燥草果小塊或粗粉在水中浸泡0-4小時;然后水蒸氣蒸餾提取3-8小時;用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率。

優選地,可以干燥草果小塊或粗粉和水的重量比為1:4,將干燥草果小塊或粗粉在水中浸泡1小時;然后水蒸氣蒸餾提取7小時;用揮發油提取器收集草果精油,并計算得油率。

干燥草果可以是經晾干獲得的干燥草果,或者是經烤干獲得的干燥草果。

本發明的草果精油的得油率以重量計在1.0%-2.5%的范圍內。本發明的草果精油為淡黃色透明油狀物,具有特殊的濃郁香味、醇香異常、沁人心脾。

本發明的草果精油作為農藥的活性成分,可以配制成固體、液體、乳劑、噴霧劑和氣霧劑型。例如,液體可以直接利用,也可以通過包埋等工藝制成固體制劑。在噴霧劑的情況,所用的拋射劑選自氟氯烷烴類、碳氫化合物和壓縮氣體。

以本發明的草果精油作為活性成分的農藥可以用于防治由以下植物病原菌引起的植物病害:黃曲霉(Aspergillus flavus)、枝狀枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)、波蘭青霉(Penicillium polonicum)、產黃青霉(Penicillium chrysogenum)、立枯絲核(Rhizoctonia solani)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、人參鏈格孢(Alternaria panax)、茄病鐮刀(Fusarium solani)、尖孢鐮刀(Fusarium oxysporum)、擬參土赤殼(Ilyonectria mors-panacis)和/或強壯土赤殼(Ilyonectria robusta)。

具體而言,以本發明的草果精油作為活性成分的農藥可以用于防治以下植物病害:選自人參、西洋參、三七、貝母、黃芪、甘草、桔梗、款冬花、板藍根、丹參、紅花、麥冬、白及、川芎、白術、百合、紅景天、牡丹和蘆薈的藥用植物;選自小麥、玉米、水稻、花生和大豆的大田作物;選自馬鈴薯、番茄、黃瓜、芹菜、辣椒、茄子、洋蔥的蔬菜作物;選自煙草等經濟作物;選自葡萄、柑橘、草莓、蘋果、香蕉、枇杷和西番蓮的水果作物。

具體而言,以本發明的草果精油作為活性成分的農藥可以用于防治以下植物病害:

人參、西洋參、三七的立枯病、灰霉病、黑斑病和根腐病;貝母灰霉病和鱗莖腐爛病;黃芪、甘草、桔梗、款冬花、板藍根、丹參、紅花、麥冬、白及、川芎、紅景天、白術、牡丹和蘆薈根腐病;百合枯萎病;小麥莖基腐病和根腐病;玉米穗腐病和粒腐病;水稻穗腐病;花生根腐病和爛果病;大豆根腐病;馬鈴薯干腐病;番茄灰霉病、立枯病、枯萎病和葉斑病;黃瓜灰霉病、立枯病和根腐病;芹菜、辣椒和茄子的根腐病和立枯病;洋蔥青霉病;煙草根腐病;葡萄灰霉病和黑根病;柑橘青霉菌;草莓灰霉病和根腐病;蘋果霉心病和灰霉病;香蕉枯萎病;枇杷腐爛病;西番蓮果腐病。

第三方面,本發明提供了草果精油乳劑作為植物源農藥的用途,所述草果精油乳劑按重量計的組成如下:

(1)草果精油10份;

(2)溶劑20-35份;

(3)助劑5-15份;和

(4)水40-55份。

所述溶劑選自:甲醇、乙醇、正丁醇、正丙醇、異丙醇、異丁醇、正戊醇、異戊醇、正己醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲亞砜、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、環己酮、吡咯烷酮、N-甲基吡咯烷酮,或是其中兩種或多種的混合物。優選地,所述溶劑選自:乙醇、甲醇、丙醇、異丙醇、丁醇、丙三醇、丙酮等,或是其中兩種或多種的混合物。優選地,所述溶劑為甲醇、乙醇或二者的混合物。

所述助劑為表面活性劑、載體和/或分散劑,所述表面活性劑選自吐溫類、司盤類、十二烷基硫酸鈉、醇類、丙二醇、聚乙二醇和甘油,所述分散劑選自六偏磷酸鈉、焦磷酸鈉、聚丙烯酸鈉鹽和聚乙烯醇,所述載體選自脂質體、環糊精和微囊。優選地,所述表面活性劑選自吐溫類、烷基酚聚氧乙烯醚類、司盤類、十二烷基硫酸鈉。優選地,所述表面活性劑選自吐溫類、烷基酚聚氧乙烯醚類。

本發明的草果精油的乳劑選自:

草果精油1份,乙醇3.5份,吐溫類表面活性劑1.5份,水4份,攪拌均勻,即得;

草果精油1份,乙醇2份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑1.5份,水5.5份,攪拌均勻,即得;

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑0.5份,水4份,攪拌均勻,即得;

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑1.5份,水4份,攪拌均勻,即得;以及

草果精油1份,乙醇2.5份,甲醇1份,烷基酚聚氧乙烯醚類表面活性劑1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

以本發明的草果精油乳劑作為活性成分的農藥可以適用于以下的對象:選自人參、西洋參、三七、貝母、黃芪、甘草、桔梗、款冬花、板藍根、丹參、紅花、麥冬、白及、川芎、白術、百合、紅景天、牡丹和蘆薈的藥用植物;選自小麥、玉米、水稻、花生和大豆的大田作物;選自馬鈴薯、番茄、黃瓜、芹菜、辣椒、茄子、洋蔥的蔬菜作物;選自煙草等經濟作物;選自葡萄、柑橘、草莓、蘋果、香蕉、枇杷和西番蓮的水果作物。

以本發明的草果精油乳劑作為活性成分的農藥可以用于防治由以下植物病原菌引起的植物病害:黃曲霉(Aspergillus flavus)、枝狀枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)、波蘭青霉(Penicillium polonicum)、產黃青霉(Penicillium chrysogenum)、立枯絲核(Rhizoctonia solani)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、人參鏈格孢(Alternaria panax)、茄病鐮刀(Fusarium solani)、尖孢鐮刀(Fusarium oxysporum)、擬參土赤殼(Ilyonectria mors-panacis)和/或強壯土赤殼(Ilyonectria robusta)。草果精油乳劑對上述病原真菌均表現出抑制作用,特別是針對鐮刀屬和土赤殼屬這樣難以防治的真菌也表現出優良的抑菌效果。

具體而言,以本發明的草果精油乳劑作為活性成分的農藥可以用于防治以下植物病害:

人參、西洋參、三七的立枯病、灰霉病、黑斑病和根腐病;貝母灰霉病和鱗莖腐爛病;黃芪、甘草、桔梗、款冬花、板藍根、丹參、紅花、麥冬、白及、川芎、紅景天、白術、牡丹和蘆薈根腐病;百合枯萎病;小麥莖基腐病和根腐病;玉米穗腐病和粒腐病;水稻穗腐病;花生根腐病和爛果病;大豆根腐病;馬鈴薯干腐病;番茄灰霉病、立枯病、枯萎病和葉斑病;黃瓜灰霉病、立枯病和根腐病;芹菜、辣椒和茄子的根腐病和立枯病;洋蔥青霉病;煙草根腐病;葡萄灰霉病和黑根病;柑橘青霉菌;草莓灰霉病和根腐病;蘋果霉心病和灰霉病;香蕉枯萎病;枇杷腐爛病;西番蓮果腐病。

上述真菌所引起的植物病害具體可以為:

1.黃曲霉:玉米穗腐病、粒腐病,花生爛果病;

2.波蘭青霉:柑橘青霉菌,洋蔥青霉病;

3.產黃青霉:柑橘青霉菌;

4.枝狀枝孢霉:番茄葉斑病,蘋果霉心病;

5.茄病鐮刀菌:人參、西洋參、三七、黃芪、百合,牡丹,甘草,桔梗,丹參,紅花,蘆薈根腐病,貝母鱗莖腐爛病;小麥莖基腐病和根腐病,大豆根腐病;辣椒、茄子、黃瓜、紅薯、花生、芹菜根腐病,番茄枯萎病和根腐病,馬鈴薯枯萎病;煙草根腐病;西瓜、柑橘、草莓根腐病;

6.尖孢鐮刀菌:人參、西洋參、三七、川芎,黃芪,甘草,紅景天、麥冬,白及,白術,款冬花,板藍根根腐病,百合枯萎病;小麥莖基腐病和根腐病,水稻穗腐病;番茄枯萎病和根腐病,黃瓜枯萎病和根腐病,洋蔥干腐病,馬鈴薯干腐病;煙草根腐病;草莓根腐病,香蕉枯萎病;

7.擬參土赤殼:人參紅皮病,西洋參根腐病;

8.強壯土赤殼:人參紅皮病,西洋參、三七根腐病,葡萄黑根病;

9.灰葡萄孢菌:人參、西洋參、三七、貝母、蘋果、番茄、葡萄、草莓灰霉病,枇杷腐爛病,西番蓮果腐病;

10.立枯絲核:人參、西洋參、三七、芹菜、辣椒、茄子、番茄立枯病;

11.人參鏈格孢:人參、西洋參、三七的黑斑病。

附圖說明:

圖1圖示了本發明的草果精油的GC-MS色譜圖。

圖2圖示了草果精油乳劑對6種植物病原菌的抑制效果比較。

圖3圖示了草果精油乳劑對鐮刀菌Fusarium sp.侵染西洋參根20天的防治效果。

具體實施方式

下面結合實施例及說明書附圖對本發明的技術方案做進一步描述。這些實施例僅用于說明本發明而不用于限定本發明的保護范圍。

實施例1:草果精油的制備

分別稱取晾干及烤干的草果各0.5kg,粉碎成粗粉,在3.5L水中浸泡1h。水蒸氣蒸餾提取7h,用揮發油提取器收集草果精油,計算得油率=(得油量/稱取草果量)×100%,結果為晾干草果的得油率為2.0%,烤干草果的得油率為1.3%。

實施例2:草果精油的表征

草果精油的成分分析

采用GC/MS法分析由晾干及烤干草果提取的草果精油的成分及含量。將草果精油用正己烷稀釋10000倍,進樣1μl。GC條件:采用Thermo TR-5MS(30m*0.32mm,0.25μm)色譜柱,柱初溫50℃,程序升溫6℃/min,升至220℃,然后以10℃/min升至250℃,恒溫5min。進樣口溫度250℃,載氣He,載氣流量2.0ml/min,分流比20:1。MS條件:EI離子源,掃描模式full scan,掃描范圍m/z 50-600amu,離子源溫度250℃,GC/MS接口溫度250℃。

草果精油的GC-MS色譜圖參見附圖1。結果表明,晾干草果提取的草果精油中共檢出色譜峰29個,其中鑒定出25種揮發物,占精油總相對含量98.7%,其中1,8-桉葉油素的相對含量為58.11%,檸檬醛的相對含量為3.33%。烤干草果提取的草果精油中第一份樣品共檢出色譜峰33個,其中鑒定出30種揮發物,占精油總相對含量97.75%,其中1,8-桉葉油素的相對含量為62.73%,檸檬醛的相對含量為2.92%。第二份烤干草果樣品提取的草果精油共檢出色譜峰32個,其中鑒定出30種揮發物,占精油總相對含量97.12%,其中1,8-桉葉油素的相對含量為50.29%,檸檬醛的相對含量為3.34%。

具體的成分以及含量參見下表1:

表1晾干與烤干草果提取的草果精油的化學成分比較:

由上表可以看出,由三種草果樣品獲得的三種草果精油中,兩種主要成分和含量組成如下:

1,8-桉葉油素:50-63%

檸檬醛:2.9-3.4%。

草果精油的氣味評價:特殊的、濃郁的辛香味,醇香異常、沁人心脾。

實施例3:草果精油乳劑的制備

草果精油1份,乙醇3.5份,吐溫80 1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

草果精油1份,乙醇2份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水5.5份,攪拌均勻,即得。

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)0.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

草果精油1份,乙醇2.5份,甲醇1份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

草果精油乳劑的氣味評價:特殊的、濃郁的辛香味,醇香異常、沁人心脾。

實施例4:草果精油與草果精油乳劑抑真菌試驗

實驗菌種:黃曲霉(Aspergillus flavus)和枝狀枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)。

草果精油乳劑:采用實施例3中配方如下的乳劑:

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

毒力測定試驗----菌絲生長速率法

1)將草果精油按照5000倍的稀釋倍數添加至培養基,混勻,冷卻,類似地,將草果精油乳劑按500倍(其中草果精油乳劑中草果精油的濃度與草果精油本身稀釋5000倍時相同)的稀釋倍數添加至培養基,混勻,冷卻;

2)將草果精油按照4000倍的稀釋倍數添加至培養基,混勻,冷卻,類似地,將草果精油乳劑按500倍(其中草果精油乳劑中草果精油的濃度低于草果精油本身稀釋4000倍時的濃度)的稀釋倍數添加至培養基,混勻,冷卻;

3)在以上1)的培養基中接種黃曲霉,在以上2)的培養基中接種枝狀枝孢霉,每板接種10μL孢子懸液,6個重復,作為試驗樣本組;

3)不含藥劑的平板分別接種3個菌種,每板接種10μL孢子懸液,6個重復,作為空白對照組;

4)于培養箱25℃培養7天。

評判規定:

測定菌落直徑(mm),計算抑菌率,抑菌率=((對照組菌落直徑-試驗組菌落直徑)/對照組菌落直徑)×100%。

表2草果精油與草果精油乳劑抑真菌效果的比較

從上述表2結果可以看出,草果精油稀釋5000倍時對黃曲霉的抑制率為39.8%,含草果精油10%的乳劑稀釋500倍時達到相同濃度,對黃曲霉的抑制率高達72.2%,抑菌效果優于草果精油本身。草果精油稀釋4000倍時對枝狀枝孢霉的抑制率為70.19%,含草果精油10%的乳劑稀釋500倍時低于此濃度,而對枝狀枝孢霉的抑制率高達100%,抑菌效果也優于草果精油本身。

實施例5:草果精油乳劑對真菌的抑菌作用

實驗菌種:

波蘭青霉(Penicillium polonicum)。

培養基:馬鈴薯瓊脂培養基

草果精油乳劑的配方如下:

草果精油1份,乙醇3.5份,吐溫80 1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

毒力測定試驗----EC50(半最大效應濃度):

1)配制波蘭青霉菌懸液,菌液濃度為108cfu/mL;

2)將草果精油乳劑以500、200、100、50、25μL/L的濃度梯度,添加至PDA培養基,混勻,冷卻;

3)每個濃度分別接種波蘭青霉,每板接種10μL,6個重復,作為試驗樣本組;

4)不含草果精油制劑的平板分別接種波蘭青霉,每板接種10μL,6個重復,作為空白對照組;

5)于培養箱25℃培養7天。

評判規定:

測定菌落直徑(mm),計算抑菌率,抑菌率=((對照組菌落直徑-試驗組菌落直徑)/對照組菌落直徑)×100%。將抑菌率換算成幾率值(Y)、藥劑質量濃度(μL/L)換算成對數值(X),求出毒力回歸方程(Y=a+bX)和相關系數(R),計算抑制供試菌種生長50%的藥劑濃度(EC50)。

草果精油乳劑對波蘭青霉的抑菌結果如下表3所示。

表3草果精油乳劑抑菌劑對波蘭青霉的抑菌效果

實施例6:草果精油乳劑對真菌的抑菌作用

實驗菌種:

黃曲霉(Aspergillus flavus)、枝狀枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)和產黃青霉(Penicillium chrysogenum)。

培養基:馬鈴薯瓊脂培養基

草果精油乳劑的配方如下:

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

毒力測定試驗----菌絲生長速率法

1)將草果精油乳劑按500倍、1000倍的稀釋倍數添加至培養基,混勻,冷卻;

2)每個濃度分別接種3個菌種,每板接種10μL,6個重復,作為試驗樣本組;

3)不含藥劑的平板分別接種3個菌種,每板接種10μL,6個重復,作為空白對照組;

4)于培養箱25℃培養7天。

評判規定:

測定菌落直徑(mm),計算抑菌率,抑菌率=((對照組菌落直徑-試驗組菌落直徑)/對照組菌落直徑)×100%。

實驗結果表明(表4),草果精油乳劑對植物病原菌黃曲霉(Aspergillus flavus)、枝狀枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)、產黃青霉(Penicillium chrysogenum)均有較強的抑制作用。

表4草果精油乳劑對真菌的抑菌效果

實施例4-6的結果顯示,本發明的草果精油和草果精油乳劑對植物病原真菌黃曲霉、枝狀枝孢霉、波蘭青霉和產黃青霉均表現出抑菌效果。

實施例7:草果精油乳劑對7種植物病原菌的抑制作用

實驗菌種:立枯絲核(Rhizoctonia solani),灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea),人參鏈格孢(Alternaria panax),茄病鐮刀(Fusarium solani),尖孢鐮刀(Fusarium oxysporum),擬參土赤殼(Ilyonectria mors-panacis),強壯土赤殼(Ilyonectria robusta)分離自發病西洋參或人參。

草果精油乳劑:采用實施例3中如下配方的乳劑:

草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

培養基:馬鈴薯瓊脂培養基

毒力測定試驗----菌絲生長速率法

1)將培養7天的病原菌打成直徑6mm的菌餅;

2)將草果精油乳劑按500倍的稀釋倍數添加至培養基,混勻,冷卻;

3)每板接種1個菌餅,每個濃度5個重復,作為試驗樣本組;

4)不含藥劑的平板分別接種7個菌種,5個重復,作為空白對照組;

5)于培養箱25℃培養5天。

評判規定

測定菌落直徑(mm),計算抑菌率,抑菌率=(對照組菌落直徑-試驗組菌落直徑)/(對照組菌落直徑-菌餅直徑)×100%。

實驗結果如下表5所示:

表5草果精油乳劑對7種植物病原菌的抑菌效果:

#表示對照組菌落直徑在該時間點前達到9cm。

上表5顯示草果精油乳劑對7種病原真菌均表現出抑制作用,特別是針對鐮刀屬和土赤殼屬這樣難以防治的真菌也表現出優良的抑菌效果。

實施例8:草果精油乳劑對西洋參根腐病的防治效果

草果精油乳劑的配方如下:草果精油1份,乙醇3.5份,烷基酚聚氧乙烯醚(OP10)1.5份,水4份,攪拌均勻,即得。

樣品:

健康4年生西洋參根。

抑菌效果評價

1)將西洋參根表面消毒,放置于鋪2層滅菌濾紙的培養皿中,制備鐮刀菌(Fusarium sp.)孢子懸液,將西洋參根在孢子懸液中浸泡2min進行接種;

2)用1ml草果精油乳劑噴霧接種后的西洋參根作為藥劑處理樣品,用1ml無菌水替代草果精油乳劑作為對照,每組設3株西洋參根重復;

3)每個培養皿中加1ml無菌水,于培養箱25℃培養20天。依照下表6西洋參根病病情分級標準,每隔10天計算病情指數,公式為:

病情指數=100×∑(各級病根數×發病級別)/(總根數×病級最高值)×100%;

防治效果(%)=(對照病情指數-處理病情指數)/對照病情指數×100%

表6病情分級標準:

實驗結果表明(表7),草果精油乳劑噴霧處理10天后,對鐮刀菌(Fusarium sp.)引起的西洋參根腐病防效為75%,20天后達到80%,表明草果精油乳劑對西洋參根腐病有較好的防治效果。

表7草果精油乳劑對鐮刀菌(Fusarium sp.)侵染西洋參根的防治效果:

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