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益生元組合物及其應用.pdf

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益生元 組合 及其 應用
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CN201711318933.5

申請日:

20171212

公開號:

CN107981359A

公開日:

20180504

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A23L33/125,A23C9/156,A61K31/702,A61K31/733,A61K31/715,A61P1/00,A61P37/04 主分類號: A23L33/125,A23C9/156,A61K31/702,A61K31/733,A61K31/715,A61P1/00,A61P37/04
申請人: 河北三元食品有限公司
發明人: 李朝旭,張天博,楊凱,賈云虹,薛江超
地址: 050000 河北省石家莊市新樂市三元路6號
優先權: CN201711318933A
專利代理機構: 石家莊輕拓知識產權代理事務所(普通合伙) 代理人: 張培元
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法律狀態
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法律狀態類型:

摘要

本發明公開了益生元組合物及其應用,該組合物包含低聚半乳糖(GOS)、低聚果糖(FOS)及異構化乳糖(LOS),所述低聚半乳糖、低聚果糖、異構化乳糖的重量份數比為(5?10):(0.5?1.5):(0.5?1.5),其中所述的低聚果糖的聚合度范圍在2?9之間。本發明的益生元組合物可應用于營養食品和藥劑中,用于增強人體腸道菌群中有益于健康的微生物,同時抑制有害菌的生長,從而增強機體免疫力及機體的整體機能。

權利要求書

1.益生元組合物,該組合物包含低聚半乳糖、低聚果糖及異構化乳糖,其特征在于:所述低聚半乳糖、低聚果糖、異構化乳糖的重量份數比為(5-10):(0.5-1.5):(0.5-1.5),其中所述的低聚果糖的聚合度范圍在2-9之間。2.根據權利要求1所述的益生元組合物,其特征在于:所述低聚半乳糖、低聚果糖、異構化乳糖的重量份數比為6:(0.5-1.5):(0.5-1.5)。3.根據權利要求1所述的益生元組合物,其特征在于:所述低聚半乳糖、低聚果糖、異構化乳糖的重量份數比為6:1:1。4.益生元奶粉,其特征在于:該奶粉包含權利要求1所述的益生元組合物。5.根據權利要求4所述的益生元奶粉,其特征在于:所述奶粉中包含1-10%wt的益生元組合物。6.根據權利要求4所述的益生元奶粉,其特征在于:所述奶粉中包含2-6.5%wt的益生元組合物。7.權利要求1所述益生元組合物的用途,其特征在于:所述益生元組合物用于優化腸道菌群結構、優化腸道中短鏈脂肪酸的組成及含量、提高腸道黏膜表面分泌型IgA的含量、提升血清中細胞因子IL-10和IL-17的含量,從而增強機體免疫力及綜合機能。8.根據權利要求7所述的用途,其特征在于:所述益生元組合物添加到嬰幼兒配方食品、嬰幼兒輔助食品、特殊醫學用途配方食品中使用。9.根據權利要求7所述的用途,其特征在于:所述益生元組合物添加到成人食品、飲品、藥劑中使用。

說明書

技術領域

本發明涉及營養和健康相關技術領域,尤其涉及嬰幼兒食品中的低聚糖營養組合物及相關技術。

背景技術

母乳是新生嬰兒最理想的食品,它含有適當比例的蛋白質、脂肪、碳水化合物、維生素和礦物質等營養物質,易于被嬰兒所消化和吸收,能滿足它們生長發育的需要;此外,母乳中富含乳鐵蛋白、雙歧因子等免疫因子,可以預防嬰兒發生腸道感染性疾病。其中,母乳低聚糖(Human milk oligosaccharides,HMOs)是母乳中僅次于乳糖和脂肪的第三大營養素,它不被人體的胃酸破壞,也不被消化酶分解,能直接達到大腸,刺激腸道中的有益菌群(雙歧桿菌和乳桿菌)生長,間接抑制有害菌群生長,維持腸道微生態平衡。

當母乳不足時,嬰幼兒配方奶粉是母乳最好的替代品。它以牛乳或羊乳為基礎,通過調整乳清蛋白/酪蛋白比例,添加必需脂肪酸亞油酸和亞麻酸,和強化維生素和礦物質,可以滿足嬰幼兒快速生長發育的需要。但由于牛乳中的低聚糖含量很低,人們結合對母乳低聚糖的認識,將現有的低聚糖添加到嬰幼兒配方奶粉中,盡可能模擬母乳低聚糖的功能。

嬰兒剛出生時的腸道呈無菌狀態,之后的一周內便有細菌的植入。新生嬰兒特別是早產兒的腸道屏障功能尚不成熟,腸黏膜容易受到損害使嬰兒受到感染。滲透性的增加導致腸道菌群失衡,也容易引起嬰兒對食物的過敏反應。因此及早建全嬰兒的腸道屏障功能至關重要。

隨著新型分析技術的發展,我們對于母乳低聚糖的結構愈加了解。此外,人們研制出的新制備方法使得我們能夠純化低聚糖,以此為基礎我們才能識別它們的生物作用。研究發現人類母乳中的HMOS由3~14個單糖組成,為直鏈或支鏈結構,目前已發現超過200種結構,均在核心結構的基礎上變換而來。如圖1所示,母乳低聚糖的5種基本單體分別為D-葡萄糖(Glc)、D-半乳糖(Gal)、N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)、L-巖藻糖(Fuc)和唾液酸(N-乙酰神經氨酸,Neu5AC)。通常核心結構的還原端為乳糖基[Gal(β1-4) Glc],通過β1-3鍵與GlcNAc連接(I型)或通過β1-4鍵與GlcNAc連接(Ⅱ型)至15個N-乙酰氨基乳糖,核心結構進一步通過α2-3或α2-6鍵與Neu5Ac殘基連接和(或)通過α1-2或α1-3或α1-4鍵與Fuc殘基連接。

研究表明,人初乳中HMOs含量為22~23 g/L,成熟乳中為12~13 g/L;早產兒母親的乳汁中HMOs比足月兒的濃度高。不同來源的母乳,低聚糖種類和含量也有很大差異。目前已經鑒定出人母乳中有200多種低聚糖,而牛乳中有50多種低聚糖,且含量很少,見下表。

成熟母乳和牛乳中宏量營養素與HMOs的含量約值營養成分人乳牛乳蛋白質/(g/L)832脂肪/(g/L)4137乳糖/(g/L)70 48低聚糖/(g/L)5~150.05確定的低聚糖種類100+ ~40巖藻基化的比例/%50~80~1唾液酸化的比例/%10~20~70

然而,關于低聚糖的結構同它們的生物學功能之間的關系,還有許多問題尚未得到解決。未來很重要的一點是,我們要了解母乳低聚糖中哪些結構成分是它們發揮作用的關鍵因素;這將作為從動物母乳或其他來源選擇低聚糖的科學基礎。但由于母乳低聚糖的復雜性,不可能找到與母乳低聚糖完全相同的天然低聚糖。因此,必須分析現有的低聚糖以識別那些雖然結構同母乳低聚糖有差異,但功能與其接近的低聚糖。

動物母乳來源的低聚糖可以作為生物功能接近母乳低聚糖分子的可以接受和可用來源的首選。此外,還應考慮非乳來源的低聚糖。低聚半乳糖(GOS,以乳糖為底物通過酶合成工藝制得)、低聚果糖和多聚果糖(來源于植物)、異構化乳糖等是常見的非乳來源益生元,在成年人和嬰兒中已經證明了其益生元作用。GOS的結構是基于乳糖的,同母乳低聚糖的核心分子有相似之處,而在母乳低聚糖中不存在低聚果糖和多聚果糖。GB 14880中規定,在嬰幼兒配方奶粉中允許使用的益生元有低聚半乳糖、低聚果糖、多聚果糖、棉籽糖、聚葡萄糖等。

低聚半乳糖( Galactooligosaccharides,GOS)是以乳糖為原料,通過β-半乳糖苷酶的轉糖苷作用制得低聚β-半乳糖,所以低聚半乳糖的分子結構一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接1-7個半乳糖基,即Gal-(Gal) n-Glc/Gal(n為0-6)。商業化生產的低聚半乳糖通常是葡萄糖、乳糖、乳糖、半乳二糖、半乳三聚糖、半乳四聚糖和半乳五聚糖的混合物。影響形成的低聚糖結構和比例的主要因素依賴于生產使用的β-半乳糖苷酶的來源和生產工藝。Carlos Sierra等評估在健康嬰兒的生命第一年內喂養含有低聚半乳糖的嬰兒配方食品(0.44g/dl GOS)以及有GOS的較大嬰兒配方食品(0.50g/dl GOS)是否對腸道菌群有益生元作用,結果發現在喂養添加低聚半乳糖的配方奶粉中嬰兒GOS組表現出較低的糞便pH值(P=0.019),分泌的免疫球蛋白A有較低的減少趨勢(P=0.078),丁酸濃度較低(P=0.040)和雙歧桿菌數量增加(P=0.010)。可以看出喂養添加GOS的嬰兒配方食品具有明確的益生元作用。

低聚果糖是指果糖基經β-2,1糖苷鍵連接而成的聚合度為2~9的功能性低聚糖,屬于食品配料。按結構,低聚果糖可分為蔗-果型和果-果型兩種。工業上生產低聚果糖有兩種方法:以菊粉為原料的酶水解法和以蔗糖為原料的酶轉化法。前者所得低聚果糖聚合度范圍較大(DP2-DP9),屬果-果型;后者所得低聚果糖聚合度范圍較小(DP3-DP6),屬蔗-果型。低聚果糖是一種益生元,優良的理化特性和生理功效使其得到了廣泛的應用。趙紅玲等通過體外試驗研究發現,在對雙歧桿菌和大腸桿菌進行分別培養時,培養基中添加2%的雪蓮果低聚果糖可促進雙歧桿菌的增殖,抑制大腸桿菌的生長。張澤生等通過試驗研究發現,無論是菊粉還是蔗糖來源的低聚果糖均能促進雙歧桿菌的體外增殖,但菊粉來源的低聚果糖對雙歧桿菌的體外促生長作用優于蔗糖來源的低聚果糖。Damien Paineau等研究證實,補充低聚果糖可提高嬰兒糞便中雙歧桿菌的數量。糞便中的雙歧桿菌來源于腸道,糞便中雙歧桿菌數量的增加說明低聚果糖可促進腸道中雙歧桿菌的增殖。Sirimu Celestin 等研究發現,在羊乳或牛乳中添加低聚果糖可促進發酵過程中雙歧桿菌等益生菌的增殖。

異構化乳糖是一種新型功能性雙糖,GB2760中規定可以在嬰幼兒奶粉中使用。異構化乳糖是雙歧桿菌生長的糖源,它在小腸內不被分解,移到大腸內可被雙歧桿菌利用,使雙歧桿菌增長占優勢、抑制腐敗細菌及病原菌的生長,對改變腸內菌群、保持腸道正常功能起重要作用,有足夠證據表明它在人類腸道中有益生元的作用,在GB8816-88中也提到它是一種雙歧桿菌的增殖因子。

益生元不僅選擇性刺激大腸中微生物的生長,還通過發酵影響腸功能的很多方面。益生元分解過程中除了產生短鏈脂肪酸之外,還不可避免的要產生一些氣體,這是食用益生元的主要障礙。DAVID C. HERNOT等的研究表明,中短鏈低聚糖產生較多數量的氣體和短鏈脂肪酸意味著發酵速度快,達到最高生產速度需要的時間更早;長鏈低聚糖產生較少數量的氣體和短鏈脂肪酸意味著發酵速度慢,達到最高生產速度需要的時間更長。此外,將短鏈低聚糖和長鏈低聚糖相混合,降低了短鏈低聚糖的發酵速度和發酵能力。為此,在嬰幼兒配方奶粉中經常使用短鏈低聚糖和長鏈低聚糖的混合物。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供益生元組合物及益生元奶粉,同時提供并驗證其用途。

為解決上述技術問題,本發明所采取的技術方案如下。

益生元組合物,該組合物包含低聚半乳糖(GOS)、低聚果糖(FOS)及異構化乳糖(LOS),所述低聚半乳糖(純品)、低聚果糖(純品)、異構化乳糖(純品)的凈含量重量份數比為(5-10):(0.5-1.5):(0.5-1.5),其中所述的低聚果糖的聚合度范圍在2-9之間。

作為本發明的一種優選技術方案,所述低聚半乳糖、低聚果糖、異構化乳糖的重量份數比為6:(0.5-1.5):(0.5-1.5)。

作為本發明的一種優選技術方案,所述低聚半乳糖、低聚果糖、異構化乳糖的重量份數比為6:1:1。

益生元奶粉,該奶粉包含權利要求1所述的益生元組合物。

作為本發明的一種優選技術方案,所述奶粉中包含1-10% wt的益生元組合物。

作為本發明的一種優選技術方案,所述奶粉中包含2-6.5% wt的益生元組合物。

上述益生元組合物用于優化腸道菌群結構、優化腸道中短鏈脂肪酸的組成及含量、提高腸道黏膜表面分泌型IgA(sIgA)的含量、提升血清中細胞因子IL-10和IL-17的含量,從而增強機體免疫力及綜合機能。

上述益生元組合物添加到嬰幼兒配方食品、嬰幼兒輔助食品、特殊醫學用途配方食品中使用。

上述益生元組合物添加到成人食品、飲品、藥劑中使用。

采用上述技術方案所產生的有益效果在于:本發明提供了低聚糖的營養組合物,它包含低聚半乳糖(GOS)、低聚果糖(FOS)和異構化乳糖(LOS)三種益生元,它們在上消化道中不會被消化,在大腸中能夠被腸道中的微生物所利用。它們可應用于營養食品和藥劑中,用于增強人體腸道菌群中有益于健康的微生物,同時抑制有害菌的生長,從而增強機體免疫力及機體的整體機能。本發明提供的益生元碳水化合物用于全喂養嬰兒配方粉或部分喂養嬰兒奶粉時,對嬰幼兒的健康和成長具有良好的助益作用,當用于含有炎性腸病(IBD)或腸易激綜合征(IBS)等腸道問題的成人攝入時,也具有促進健康的效果。

尤其是,本發明對不同低聚糖之間的協調比例進行了大量的分析和試驗研究工作,摸索出了全新的配比方案,不僅突破了國外現有技術資料的配比界限及專利封鎖,尤其是取得了非常良好的實用效果。經試驗驗證,本發明配方下的益生元組合物,能夠有效的優化腸道菌群結構、優化腸道中短鏈脂肪酸的組成及含量、提高腸道黏膜表面分泌型IgA(sIgA)的含量、提升血清中細胞因子IL-10和IL-17的含量,從而增強機體免疫力及綜合機能,具有十分突出的實用效果,不僅在國內具有開創性,在國際上也具有重要的學術及使用價值和意義。詳細的試驗方法及結果數據可參見下文的實施例。

附圖說明

圖1是實施例2中16S/18S/ITS rDNA擴增子測序的實驗流程示意圖。

圖2是實施例2中16sRNA檢測方法測得的基于OUT的heatmap圖。

具體實施方式

以下實施例詳細說明了本發明。本發明所使用的各種原料及各項設備均為常規市售產品,均能夠通過市場購買直接獲得。其中,低聚半乳糖(57%),來源于云浮市新金山生物科技股份有限公司或量子高科(中國)生物股份有限公司,低聚果糖為BENEO Qrafti P95;異構化乳糖(50%)為森永乳業株式會社或法國Solactis公司。

實施例1、實驗目的及材料。

實驗目的:比較低聚半乳糖、低聚果糖和異構化乳糖的益生元組合以不同添加量喂養小鼠時的益生元效果,以不含益生元的嬰兒配方奶粉作為對照,并與作母乳比較。

實驗材料:40只3周大的清潔級雄性昆明小鼠(購于河北醫大實驗動物中心),按體重隨機分為5組,如下所示。實驗為期3周。每只小鼠每天灌喂2.8mL奶粉沖調液或母乳。組別內容陰性對照不添加益生元的奶粉(以下省略為奶粉)益生元1組奶粉+1.85% GOS+0.3% FOS+0.5% LOS益生元2組奶粉+3.08% GOS+0.5% FOS+0.5% LOS益生元3組奶粉+ 4.85% GOS+0.8% FOS+0.8% LOS母乳對照母乳

其中,不添加益生元的嬰兒配方奶粉由在河北三元食品有限公司中試制得。

實施例2、腸道微生物檢測。

每個實驗周期結束前,清晨經肛門取新鮮糞便樣品,進行腸道菌群檢測。本方法的檢測原理如下:

16S/18S/ITS rDNA,序列包括保守區域和高變區域,其中保守區在微生物菌種間差異不大,高變區具有屬或種的特異性,隨親緣關系不同而有一定的差異。因此,16S/18S/ITSrDNA可以做作為揭示生物物種的特征核酸序列,被認為是適于微生物系統發育和分類鑒定的指標。如今,16S/18S/ITS rDNA擴增子測序技術已成為研究環境樣本中微生物群落組成結構的重要手段。

16S rDNA擴增子測序,是通過特異性引物擴增樣本中原核生物16S rDNA的可變區,構建高通量測序文庫并對16S rDNA可變區序列進行分析,從而鑒定環境中原核微生物的組成與豐度的方法。GENEWIZ自主研發的引物體系能有效擴增出16S rDNA的多個可變區(V3,V4),能夠準確鑒定出包含古生菌在內的多個物種。18S/ITS rDNA擴增子測序,是通過特異性引物擴增樣本中真核生物18S/ITS rDNA的可變區,構建高通量測序文庫并對18S/ITS rDNA可變區序列進行分析,從而鑒定環境中真核微生物的組成與豐度的方法。Illumina MiSeq測序平臺由于在測序深度、通量、運行周期、測序準確性及價格方面的優勢,廣泛應用于16S/18S/ITS rDNA擴增子測序;近年來,Paired-end Reads拼接方法使MiSeq測序平臺的讀長達到了600bp,從而使分析準確性得到進一步提高。

16S/18S/ITS rDNA擴增子測序的實驗流程包括樣本基因組DNA的提取與質檢,16S/18S/ITS rDNA可變區擴增與測序文庫構建,高通量測序等多個步驟。其中每一個環節都會對數據質量和數量產生影響,而數據質量又會直接影響后續信息分析的結果,為了保證源頭數據的準確性與可靠性,我們對每一步實驗過程都進行嚴格質控,檢測合格后,按照目標數據量調整文庫體積,將多個文庫混合后進行Illumina MiSeq測序。具體實驗流程參見附圖1。

附圖2為16sRNA檢測方法測得的基于OUT的heatmap圖。圖中,A為實驗開始前的對照,D1、D2、D3、D4和D5分別為實驗三周時動物糞便中微生物的測定情況。

從圖中可以看出,益生元奶粉組中的雙歧桿菌高于陰性對照組和母乳對照組,因此,本實驗中采用益生元組合對于雙歧桿菌具有較強的增殖作用。

實施例3、短鏈脂肪酸檢測。

糞便樣品的制備:為了測定SCFA,將1g樣品在冰水中融化,10X稀釋于MilliQ中,并使用stomacher(IUL Instruments,Barcelona,西班牙) 均質化10分鐘。將350μL均質糞便與200μl5%(v/v)甲酸,100μL1.25g/L 2-乙基丁酸(Sigma-Aldrich,Zwijindrecht,荷蘭) 和350μl MilliQ 混合。將樣品在14,000rpm 離心5分鐘以除去大的顆粒并將上清液存儲在-20℃。為了FISH分析和乳酸測量,將樣品在冰水中融化,10X(w/v) 稀釋于磷酸鹽緩沖鹽水,pH7.4(PBS)中并使用stomacher 均質化10 分鐘。將均質糞便存儲于-20℃。

短鏈脂肪酸分析:通過配備有火焰電離檢測儀的Marian 3800 氣相色譜儀(GC) (Varian Inc.,Walnut Creek,U.S.A.)定量測定短鏈脂肪酸(SCFA),甲酸、乙酸、丙酸、正丁酸。將0.5μL樣品在80℃注射于柱子(Stabilwax,5X0.53nm,膜厚度1.00μm,Restek Co.,U.S.A.)中,使用氦作為載氣(3.0psi)。注射樣品后,以16℃/分鐘的速度將烘箱加熱至160℃,接著以20℃/分鐘的速度加熱至220℃并最終維持于220℃的溫度1.5分鐘。注射器和檢測儀的溫度是200℃。將2-乙基丁酸用作內標。

下表中的數據分別為實驗第三周結束時小鼠糞便中短鏈脂肪酸的測定情況。我們使用采用SPSS18.0的One Way ANOVA程序分析數據,對數據進行顯著性差異的分析,P<0.05代表顯著性差異。

實驗結束時各實驗組小鼠糞便中短鏈脂肪酸的變化情況(單位:μg/g)組別短鏈脂肪酸總和陰性對照2218.82±9.95a 益生元1組2239.36±9.31a益生元2組2428.90±5.15c益生元3組2279.62±8.12b母乳對照2496.28±9.48d

注:同一列中,不同字母表示存在顯著性差異(P<0.05)

從表中可以看出,益生元2和3組小鼠糞便中的短鏈脂肪酸顯著高于陰性對照組,益生元1組小鼠糞便中短鏈脂肪酸雖然與陰性對照組沒有顯著性差異,但高于陰性對照組。實驗結束時益生元2組小鼠糞便中短鏈脂肪酸總和顯著增加,僅次于母乳對照組小鼠糞便中的短鏈脂肪酸含量。

實施例4、ELISA檢測乳酸。

糞便樣品的制備:將樣品在冰水中融化,10X(w/v) 稀釋于磷酸鹽緩沖鹽水,pH7.4(PBS)中并使用stomacher 均質化10 分鐘。將均質糞便存儲于-20℃。

設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μL,然后再加待測樣品10μL(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。每孔加入酶標試劑100μL,空白孔除外。用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。每孔先加入顯色劑A50μL,再加入顯色劑B50μL,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。每孔加終止液50μL,終止反應(此時藍色立轉黃色)。以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

檢測結果見下表。

實驗前后各實驗組小鼠糞便中乳酸的變化情況(單位:mmol/mL)

注:同一列中,不同字母表示存在顯著性差異(P<0.05)

從表中可以看出,益生元2和3組小鼠糞便中乳酸顯著高于陰性對照組,益生元1組小鼠糞便中乳酸雖然與陰性對照組沒有顯著性差異,但高于陰性對照組。在益生元奶粉動物實驗過程中,隨著時間的延長小鼠糞便中乳酸的含量不斷增加。其中,益生元2組小鼠糞便中的乳酸含量最高。

實施例5、ELISA檢測SIgA。

采用實施例4的檢測方法。檢測結果見下表。

實驗前后各實驗組小鼠糞便中sIgA的變化情況(單位:μg/mL)

注:同一列中,不同字母表示存在顯著性差異(P<0.05)

從表中可以看出,在益生元奶粉動物實驗結束時,各益生元實驗組小鼠糞便中sIgA,與陰性對照組相比,有顯著性差異。隨著益生元添加量的增加,小鼠糞便中sIgA的含量也呈不斷增加的趨勢。這表明本研究所采用的益生元組合能增加小鼠糞便中sIgA,對黏膜免疫有積極作用。

實施例6、ELISA檢測IL-10。

現在已知,GOS可顯著增加有益菌,尤其是雙歧桿菌的數量。GOS與免疫應答呈正性相關,即NK細胞活性及細胞吞噬活性增強,PBMCs分泌的抗炎因子IL-10分泌增加,致炎因子IL-6、IL-1β及TNF-α分泌減少。因此,使用GOS作為膳食調節可幫助增強胃腸道及免疫系統功能。

采用實施例4的檢測方法。檢測結果見下表。

各實驗組小鼠血清中的IL-10(單位:pg/mL)組別IL-10陰性對照257.51±36.85a益生元1組309.59±33.91b益生元2組338.84±33.99bc益生元3組357.50±35.50c母乳對照376.01±36.58c

注:同一列中,不同字母表示存在顯著性差異(P<0.05)

從表中可以看出,各益生元實驗組與陰性對照組相比,有顯著性差異。隨著益生元添加量的增加,IL-10的含量增加,益生元3組中的IL-10數量略低于母乳組中IL-10數量。在本研究中,益生元導致IL-10分泌增加,與上述研究結果相一致。

實施例7、ELISA法測定IL-17。

IL-17是CD4+T細胞亞群Th17分泌的細胞因子。Th17的發育、擴增及分泌IL-17主要受TGF-β、IL-6、IL-15、IL-23等細胞因子的調控。IL-17調節前炎性因子、趨化因子等的產生及分泌,在白細胞的遷移、破骨細胞的活化和骨質的吸收等方面發揮重要作用。研究證實,IL-17在自身免疫性疾病的發生、發展中也具有一定的影響和作用。

采用實施例4的檢測方法。檢測結果見下表。

各實驗組小鼠血清中的IL-17(單位:pg/mL)組別IL-17陰性對照26.07±6.66a益生元1組35.67±6.61b益生元2組35.92±4.93b益生元3組36.72±4.14b母乳對照29.21±3.74a

注:同一列中,不同字母表示存在顯著性差異(P<0.05)

從表中可以看出,三個益生元組中IL-17的含量與陰性對照組和母乳對照組有顯著性差異。我們可以看到,本實驗中使用的益生元組合導致IL-17分泌增加,在免疫調節中發揮提升和助益效用。

上述描述僅作為本發明可實施的技術方案提出,不作為對其技術方案本身的單一限制條件。

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