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一種提高母本綿羊產奶量的方法.pdf

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一種 提高 母本 綿羊 產奶量 方法
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摘要
申請專利號:

CN201710086939.8

申請日:

20170217

公開號:

CN106818639A

公開日:

20170613

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01K67/02,G01N1/28,G01N1/30,G01N1/36,G01N21/84 主分類號: A01K67/02,G01N1/28,G01N1/30,G01N1/36,G01N21/84
申請人: 西北農林科技大學
發明人: 周占琴,張愛平,宋宇軒,張磊,張希云,高義祖
地址: 712100 陜西省咸陽市楊凌示范區邰城路3號
優先權: CN201710086939A
專利代理機構: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 代理人: 董芙蓉
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201710086939.8

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法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種提高母本綿羊產奶量的方法,該方法包括以下步驟:試驗動物的選擇、雜交、體重測定、產奶量測定、乳腺組織受體基因的mRNA表達量測定。本發明的試驗方法通過東弗里森公羊與湖羊母羊雜交生產高產奶量東湖F1,用作三元雜交母本羊,從根本上解決母本羊泌乳量不足、羔羊生長緩慢以及肉羊養殖效益不高等問題。結果證明:雜種一代羊母羊是理想的母本羊,與杜泊羊雜交后,可哺育3只羔羊,養殖效益提高30%以上。

權利要求書

1.一種提高母本綿羊產奶量的方法,其特征在于,包括以下步驟:步驟1、試驗動物的選擇(1)雜交父本羊為東弗里森奶綿羊;(2)雜交母本湖羊為成年湖羊;步驟2、雜交東湖一代,即F1,含1/2東弗里森羊血液,是純種東弗里森公羊與純種湖羊雜交后代;含1/4東弗里森羊血液湖羊為東湖一代公羊與純種湖羊母羊交配后代;所有母羊均利用人工授精技術配種;步驟3、體重測定對相同飼養管理條件下同期出生的湖羊、東湖一代羊、含1/4東弗里森羊血液湖羊的初生重、2月齡重、4月齡重進行測定、記錄;步驟4、產奶量測定分別選擇相同飼養管理條件下同期產羔母羊3只,用羔羊體重稱重法對產奶量進行測定、記錄;步驟5、乳腺組織受體基因的mRNA表達量測定5.1采樣用手術法采集哺乳期東湖一代羊試驗組和湖羊對照組乳腺組織樣,置于多聚甲醛中帶回實驗室,固定48h后,修樣至1cm;5.2制樣5.2.1脫水將固定后的組織樣依次置于70%酒精30min、80%酒精1h、90%酒精1h、100%酒精1h,1h后換一次酒精;5.2.2透明用等比列配制的無水乙醇、二甲苯混合溶液浸泡2h,再用二甲苯I浸泡10min,換二甲苯,再泡5min;5.2.3浸蠟在等比列配制的二甲苯、石蠟液的混合液中浸2h,石蠟I液中浸2h、石蠟II液中浸2h,然后置于60℃烤箱中烘干;5.2.4包埋將預熱包埋劑倒入簡易紙盒,然后將浸蠟后的組織樣放在室溫下靜置;5.2.5切片將包埋好的蠟塊置于石蠟切片機上,切成5um薄片,再進行展片、粘片、標記后,置于切片架上,在37℃條件下烘干;5.3染色(1)HE染色脫蠟依次將石蠟切片置于二甲苯I液10min、二甲苯II液5min、100%乙醇I液3min、100%乙醇II液3min、90%乙醇3min、80%乙醇3min、70%乙醇3min;(2)染色蘇木精染色2min,水洗除去染液,加5%冰醋酸分化30s,用蒸餾水洗5min,再用伊紅染色1min,然后在顯微鏡下觀察;(3)脫色將玻片依次置于70%酒精、80%酒精、90%酒精、100%酒精I液、100%酒精II液中脫色各1min,然后分別在二甲苯I液和二甲苯II液脫色5min;(4)封片取出切片,擦干二甲苯,滴上樹膠,蓋上蓋玻片,在室溫條件下晾干;(5)照相:用顯微照相機照相后,進行圖像分析;5.4數據統計與分析通過HE染色對東湖一代羊和湖羊乳腺組織結構進行比較。

說明書

技術領域

本發明屬于畜牧技術領域,具體地說,涉及一種提高母本綿羊產奶量的方法。

背景技術

綿羊是約11000年前在西南亞地區被最早馴化的動物,主要用于肉食來源。現在世界各地均有飼養。中國是世界上綿羊飼養量最多的國家,其中以內蒙和西北地區飼養量最大,全國飼養量達到1.6億只。綿羊性情溫順,易管理。綿羊肉質鮮美,各民族都喜食。大多數綿羊品種為常年發情,有些地方品種則為季節發情,多在秋季發情、配種,春季產羔。母羊的懷孕期為145~152天,每胎產羔1~5只,羔羊的成活率取決于母羊的產奶量,但中國大多數綿羊品種產奶量不高,通常只能養活1~2只羔羊。母羊本身的初生重、斷奶重、乳房容積和形狀、產羔月份、產羔數、泌乳期間的營養水平、產羔前的營養狀況等都對產奶量有一定影響。

湖羊具有繁殖力高、適應性好、母性強、易管理等特點,深受廣大養殖場(戶)的歡迎,被廣泛用作肉羊雜交母本。該品種平均產羔率高達270%~280%,窩產3~4只羔羊的母羊較常見,但其產奶量通常只夠哺育2只羔羊,多胎羔羊會被餓死,成活率不到70%,嚴重影響了肉羊養殖效益。因此,急需開發一種提高母本綿羊產奶量的方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提高母本綿羊產奶量的方法,本發明通過導入東弗里森血液,用東弗里森公羊與湖羊母羊雜交,生產的東湖F1具有較高的產奶量,可用作三元雜交母本羊,從根本上解決母本羊泌乳量不足、羔羊生長緩慢以及肉羊養殖效益不高等問題;該方法通過解決同窩多胎羔羊的吮乳量問題,提高羔羊的成活率和肉羊效益。

其具體技術方案為:

一種提高母本綿羊產奶量的方法,包括以下步驟:

步驟1、試驗動物的選擇

(1)雜交父本羊為東弗里森奶綿羊,購自澳大利亞;

(2)雜交母本為本地湖羊;

步驟2、雜交

東湖一代,即F1,含1/2東弗里森羊血液,是純種東弗里森公羊與純種湖羊雜交后代;含1/4東弗里森羊血液湖羊為東湖一代公羊與純種湖羊母羊交配后代;所有母羊均利用人工授精技術配種;

步驟3、體重測定

對相同飼養管理條件下同期出生的湖羊、東湖一代羊、含1/4東弗里森羊血液湖羊的初生重、2月齡重、4月齡重進行測定、記錄;

步驟4、產奶量測定

分別選擇相同飼養管理條件下同期產羔母羊3只,用羔羊體重稱重法對產奶量進行測定、記錄;

步驟5、乳腺組織受體基因的mRNA表達量測定

5.1采樣

用手術法采集哺乳期東湖一代羊試驗組和湖羊對照組乳腺組織樣,置于多聚甲醛中帶回實驗室,固定48h后,修樣至1cm3;

5.2制樣

5.2.1脫水將固定后的組織樣依次置于70%酒精30min、80%酒精1h、90%酒精1h、100%酒精1h,1h后換一次酒精;

5.2.2透明用等比列配制的無水乙醇、二甲苯混合溶液浸泡2h,再用二甲苯I浸泡10min,換二甲苯,再泡5min;

5.2.3浸蠟在等比列配制的二甲苯、石蠟液的混合液中浸2h,石蠟I液中浸2h、石蠟II液中浸2h,然后置于60℃烤箱中烘干;

5.2.4包埋將預熱包埋劑倒入簡易紙盒,然后將浸蠟后的組織樣放在室溫下靜置;

5.2.5切片將包埋好的蠟塊置于石蠟切片機上,切成5um薄片,再進行展片、粘片、標記后,置于切片架上,在37℃條件下烘干;

5.3染色

(1)HE染色脫蠟依次將石蠟切片置于二甲苯I液10min、二甲苯II液5min、100%乙醇I液3min、100%乙醇II液3min、90%乙醇3min、80%乙醇3min、70%乙醇3min;

(2)染色蘇木精染色2min,水洗除去染液,加5%冰醋酸分化30s,用蒸餾水洗5min,再用伊紅染色1min,然后在顯微鏡下觀察;

(3)脫色將玻片依次置于70%酒精、80%酒精、90%酒精、100%酒精I液、100%酒精II液中脫色各1min,然后分別在二甲苯I液和二甲苯II液脫色5min;

(4)封片取出切片,擦干二甲苯,滴上樹膠,蓋上蓋玻片,在室溫條件下晾干;

(5)照相:用顯微照相機照相后,進行圖像分析;

5.4數據統計與分析

通過HE染色對東湖一代羊和湖羊乳腺組織結構進行比較。

與現有技術相比,本發明的有益效果:

本發明的試驗方法通過東弗里森公羊與湖羊母羊雜交生產高產奶量東湖F1,用作三元雜交母本羊,從根本上解決母本羊泌乳量不足、羔羊生長緩慢以及肉羊養殖效益不高等問題。結果證明:雜種一代羊母羊是較理想的母本羊,與杜泊羊雜交后,可哺育3只羔羊,養殖效益提高30%以上。

附圖說明

圖1是不同品種妊娠綿羊乳腺組織受體基因mRNA表達量。

具體實施方式

下面結合附圖和具體實施方案對本發明的技術方案作進一步詳細地說明。

一、體重和產奶量測定

1材料與方法

1.1試驗動物的選擇

(1)雜交父本羊東弗里森奶綿羊購自澳大利亞。

(2)雜交母本湖羊為本地飼養的成年湖羊。

1.2雜交東湖一代,即F1,含1/2東弗里森羊血液,是純種東弗里森公羊與純種湖羊雜交后代;含1/4東弗里森羊血液湖羊為東湖一代公羊與純種湖羊母羊交配后代。所有母羊均利用人工授精技術配種。

1.3體重測定用常規方法對相同飼養管理條件下同期出生的湖羊、東湖一代羊、含1/4東弗里森羊血液湖羊的初生重、2月齡重、4月齡重進行測定、記錄。

1.4產奶量測定分別選擇相同飼養管理條件下同期產羔母羊3只,用羔羊體重稱重法對產奶量進行測定、記錄。

二、乳腺組織受體基因的mRNA表達量測定

1采樣

用手術法采集哺乳期東湖一代羊(試驗組)和湖羊(對照組)乳腺組織樣,置于多聚甲醛中帶回實驗室,固定48h后,修樣至1cm3即可。

2制樣

2.1脫水將固定后的組織樣依次置于70%酒精30min、80%酒精1h、90%酒精1h、100%酒精1h(1h后換一次酒精)。

2.2透明用等比列配制的無水乙醇、二甲苯混合溶液浸泡2h,再用二甲苯I浸泡10min,換二甲苯,再泡5min。

2.3浸蠟在等比列配制的二甲苯、石蠟液的混合液中浸2h,石蠟I液中浸2h、石蠟II液中浸2h,然后置于60℃烤箱中烘干。

2.4包埋將預熱包埋劑倒入簡易紙盒,然后將浸蠟后的組織樣放在室溫下靜置。

2.5切片將包埋好的蠟塊置于石蠟切片機上,切成5um薄片,再進行展片、粘片、標記后,置于切片架上,在37℃條件下烘干。

3染色

(1)HE染色脫蠟依次將石蠟切片置于二甲苯I液10min、二甲苯II液5min、100%乙醇I液3min、100%乙醇II液3min、90%乙醇3min、80%乙醇3min、70%乙醇3min。

(2)染色蘇木精染色2min,水洗除去染液,加5%冰醋酸分化30s,用蒸餾水洗5min,再用伊紅染色1min,然后在顯微鏡下觀察。

(3)脫色將玻片依次置于70%酒精、80%酒精、90%酒精、100%酒精I液、100%酒精II液中脫色各1min,然后分別在二甲苯I液和二甲苯II液脫色5min。

(4)封片取出切片,擦干二甲苯,滴上樹膠,蓋上蓋玻片,在室溫條件下晾干。

(5)照相:用顯微照相機照相后,進行圖像分析。

4數據統計與分析

通過HE染色對東湖一代羊和湖羊乳腺組織結構進行比較。

三、試驗結果

湖羊母羊與東弗里森公羊雜交,其雜種一代羊(簡稱東湖F1)初生重、2月齡斷奶重和4月齡體重分別比相同飼養管理條件下的湖羊高0.25kg、3.74kg和3.65kg,而且體型外貌更趨于肉用型。東湖F1成年母羊產后50天內平均日奶量達到2.36kg,比相同飼養管理條件下的湖羊高0.46k kg。但雜種羊的產奶量會隨東弗里森含血量的下降而下降(見表1)。

表1東湖F1生長速度和產奶量(kg)

*指第三胎產雙羔母羊產后1~50天平均產奶量。

東湖F1妊娠母羊乳腺組織GHR(生長激素受體)、PR(孕激素受體)、PRLR(催乳素受體)、IGF-IR(胰島素樣生長因子I受體)基因的mRNA表達量均顯著高于湖羊(見圖1),這表明東湖F1母羊具有較高的泌乳性能。

以上所述,僅為本發明較佳的具體實施方式,本發明的保護范圍不限于此,任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內,可顯而易見地得到的技術方案的簡單變化或等效替換均落入本發明的保護范圍內。

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