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酵母精提物及其制備方法.pdf

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酵母 精提物 及其 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201110387703.0

申請日:

20111130

公開號:

CN103126967B

公開日:

20141008

當前法律狀態:

有效性:

有效

法律詳情:
IPC分類號: A61K8/99,A61Q19/08,A61Q19/02 主分類號: A61K8/99,A61Q19/08,A61Q19/02
申請人: 安琪酵母股份有限公司
發明人: 張彥,俞學鋒,李知洪,余明華,姚鵑,張海波
地址: 443003 湖北省宜昌市城東大道168號
優先權: CN201110387703A
專利代理機構: 北京康信知識產權代理有限責任公司 代理人: 吳貴明;余剛
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201110387703.0

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種酵母精提物及其制備方法。該酵母精提物包括干物質及水,其中干物質包括質量百分含量為20%~70%的蛋白質,5%~30%的核酸及余量的雜質,其中,蛋白質及核酸的分子量為20~500KD。制備方法依次包括制備酵母提取物,膜分離,高溫處理,脫色以及滅菌步驟。通過本發明提供的制備方法制備的酵母精提物,蛋白質及核酸的分子量為20~500KD,不易沉淀,可以用于化妝品的制造。另外,分子量在20~500KD的蛋白質及核酸,具有易被肌膚吸收、不易變性沉淀等優點。

權利要求書

1.一種酵母精提物,其特征在于,包括干物質及水,其中所述干物質包括質量百分含量為20%~70%的蛋白質,5%~30%的核酸及余量的雜質,其中,所述蛋白質及所述核酸的分子量為20~500KD;所述酵母精提物通過以下步驟制備得到:1)制備酵母提取物;2)膜分離,將所述酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為2%~20%的水溶液,然后采用截留分子量為20~500KD的超濾膜進行分離,收集上清液;3)高溫處理,將所述上清液升溫至80~120℃,保持0.5~2小時;4)脫色,使用大孔吸附樹脂對經過高溫處理的所述上清液進行脫色處理,收集透過液;以及5)滅菌,將所述透過液采用高溫和微波進行滅菌處理,得所述酵母精提物。2.根據權利要求1所述的酵母精提物,其特征在于,所述蛋白質及所述核酸的分子量為50~100KD。3.根據權利要求1所述的酵母精提物,其特征在于,當所述干物質質量百分含量為5%時,所述酵母精提物在410nm波長處的吸光度低于0.15。4.一種權利要求1~3中任一項所述的酵母精提物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:1)制備酵母提取物;2)膜分離,將所述酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為2%~20%的水溶液,然后采用截留分子量為20~500KD的超濾膜進行分離,收集上清液;3)高溫處理,將所述上清液升溫至80~120℃,保持0.5~2小時;4)脫色,使用大孔吸附樹脂對經過高溫處理的所述上清液進行脫色處理,收集透過液;以及5)滅菌,將所述透過液采用高溫和微波進行滅菌處理,得所述酵母精提物。5.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述膜分離步驟中,將所述酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為5%~10%的水溶液,然后采用截留分子量為50~100KD的超濾膜進行分離。6.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述高溫處理步驟中,將所述上清液濃縮至干物質的質量百分含量為5%~15%,然后進行高溫處理。7.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,所述高溫處理步驟中,將所述上清液濃縮至干物質的質量百分含量為8%~10%后,然后進行高溫處理。8.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述高溫處理的溫度為90~120℃,時間為0.5~1小時。9.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述脫色步驟包括調節所述上清液的pH為3.0~6.0,溫度為10~50℃,然后將所述上清液過所述大孔吸附樹脂柱,通過對過柱過程的控制使得在所述酵母精提物的干物質質量百分含量為5%時,所述酵母精提物在410nm波長處的吸光度低于0.15。10.根據權利要求9所述的制備方法,其特征在于,所述脫色步驟中所述上清液的pH為4.0~5.0,溫度為20~40℃。

說明書

技術領域

本發明涉及酵母提取物及其制備方法,具體而言,涉及一種應用于化妝品領域的酵母精提物及其制備方法。

背景技術

酵母提取物(yeast extract)是酵母經破壁后將其中蛋白質、核酸、維生素等抽提,再經生物酶解獲得的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、維生素等天然活性成分的物質,主要應用于食品、調味品以及生物發酵等領域。

目前,酵母提取物的生產工藝大致可分為:自溶、酶解、固液分離、清液高溫濃縮等工藝,得到具有特殊風味和色澤的、含有一定量肽、氨基酸的提取物產品。現有技術制備得到的酵母提取物在生產過程中會促進美拉德反應的生成,以提高產品的風味,主要應用于調味品領域。同時部分產品還會添加少量的鹽、蛋白水解物等,以形成特有的風味。

CN1481721公開了一種酵母提取物的制造方法,添加水解蛋白酶和風味蛋白酶,然后保溫24~48小時。在整個自溶過程中,除利用酵母自身酶系和外加酶制劑動力破壁外,還利用高剪切分散乳化機對酵母細胞組織施加高剪切力進行機械強制破碎,使酵母細胞組織內的有效成份溶出更多,其獲得的產品主要應用于微生物培養基和食品添加劑的制作。CN101513247公開了一種酵母抽提物的制造方法,包括:自溶、酶解、高溫處理等步驟,得到的酵母提取物蛋白質含量在60%-85%,其獲得的產品主要應用于食品領域。

現有技術生產得到的酵母提取物產品,色澤較深,具有明顯的特征氣味,產品含有一定量的大分子蛋白或多糖,易產生沉淀,因此,不能滿足化妝品領域對于氣味、色澤以及其他感官指標的要求。

發明內容

本發明旨在提供一種應用于化妝品領域的酵母精提物及其制備方法,以解決現有技術中酵母提取物易沉淀而不滿足化妝品領域應用的技術問題。

為了實現上述目的,根據本發明的一個方面,提供了一種酵母精提物,包括干物質及水,其中干物質包括質量百分含量為20%~70%的蛋白質,5%~30%的核酸及余量的雜質,其中,蛋白質及核酸的分子量為20~500KD。

進一步地,蛋白質及核酸的分子量為50~100KD。

進一步地,當干物質質量百分含量為5%時,酵母精提物在410nm波長處的吸光度低于0.15。

根據本發明的另一個方面,提供一種酵母精提物的制備方法,包括以下步驟:1)制備酵母提取物;2)膜分離,將酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為2%~20%的水溶液,然后采用截留分子量為20~500KD的超濾膜進行分離,收集上清液;3)高溫處理,將上清液升溫至80~120℃,保持0.5~2小時;4)脫色,使用大孔吸附樹脂對經過高溫處理的上清液進行脫色處理,收集透過液;以及5)滅菌,將透過液采用高溫和微波進行滅菌處理,得酵母精提物。

進一步地,膜分離步驟中,將將酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為5%~10%的水溶液,然后采用截留分子量為50~100KD的超濾膜進行分離。

進一步地,高溫處理步驟中,將上清液濃縮至干物質的質量百分含量為5%~15%,然后進行高溫處理。

進一步地,高溫處理步驟中,將上清液濃縮至干物質的質量百分含量為8%~10%后,然后進行高溫處理。

進一步地,高溫處理的溫度為90~120℃,時間為0.5~1小時。

進一步地,脫色步驟包括調節上清液的pH為3.0~6.0,溫度為10~50℃,然后將上清液過大孔吸附樹脂柱,通過對過柱過程的控制使得在酵母精提物的干物質質量百分含量為5%時,酵母精提物在410nm波長處的吸光度低于0.15。

進一步地,脫色步驟中上清液的pH為4.0~5.0,溫度為20~40℃。

通過本發明提供的制備方法制備的酵母精提物,蛋白質及核酸的分子量為20~500KD,不易沉淀,可以用于化妝品的制造。另外,分子量在20~500KD的蛋白質及核酸,具有易被肌膚吸收、不易變性沉淀等優點。而且該酵母精提物富含蛋白質及核酸等成分,對皮膚細胞具有很好的激活效果,能夠增強皮膚免疫機能,增強SOD活性、提高皮膚抗自由基能力,并能夠通過抑制酪氨酸酶的活性達到美白的效果。

具體實施方式

需要說明的是,在不沖突的情況下,本發明中的實施例及實施例中的特征可以相互組合。下面將結合實施例來詳細說明本發明。

根據本發明一種典型的實施方式,酵母精提物包括干物質及水,其中干物質包括質量百分含量為20%~70%的蛋白質,5%~30%的核酸及余量的雜質,其中,蛋白質及核酸的分子量為20~500KD。通過膜分離來進行控制,使得蛋白質及核酸的分子量為20~500KD。分子量在20~500KD的蛋白質及核酸,具有易被肌膚吸收、不易變性沉淀等優點。該酵母精提物富含蛋白質及核酸等成分,對皮膚細胞具有很好的激活效果,能夠增強皮膚免疫機能,增強SOD活性、提高皮膚抗自由基能力,并能夠通過抑制酪氨酸酶的活性達到美白的效果。優選地,蛋白質及核酸的分子量為50~100KD,因為分子量較低的成分主要是肽、氨基酸、核苷酸等成分,能夠快速被皮膚吸收,而更大分子量的物質透皮吸收存在一定的困難。

根據本發明一種典型的實施方式,當干物質質量百分含量為5%時,酵母精提物在410nm波長處的吸光度低于0.15,這就保證了酵母精提物的色澤近于無色、無味,適用于化妝品的調色、調味,具有適用性強、應用領域寬等優點。

本發明還提供了一種上述酵母精提物的制備方法,根據本發明一種典型的實施方式,該制備方法包括以下步驟:1)制備酵母提取物;2)膜分離,將酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為2%~20%的水溶液,然后采用截留分子量為20~500KD的超濾膜進行分離,收集上清液;3)高溫處理,將上清液升溫至80~120℃,保持0.5~2小時;4)脫色,使用大孔吸附樹脂對經過高溫處理的上清液進行脫色處理,收集透過液;以及5)滅菌,將透過液采用高溫和微波進行滅菌處理,得酵母精提物。其中,由于膜分離步驟采用20~500KD的超濾膜對酵母提取物進行分離,保證了酵母精提物中蛋白質及核酸等的分子量在20~500KD。處于此分子量范圍內的蛋白質及核酸具有較穩定的理化性質,不易沉淀,而且具有易被肌膚吸收等優點,適合應用于化妝品領域。

其中,制備酵母提取物可以通過本領域常規的方法制得,也可是市售的酵母提取物。優選地,膜分離步驟中可以將酵母提取物配制成干物質的質量百分含量為5%~10%的水溶液后再采用截留分子量為50~100KD的超濾膜進行分離,因為分子量較低的成分主要是肽、氨基酸、核苷酸等成分,能夠快速的通過皮膚吸收,而更大分子量的物質透皮吸收存在一定的困難。高溫處理的溫度為90~120℃,處理時間為0.5~1小時,此溫度及時間條件,保證了原料脫色前美拉德反應充分、大分子蛋白變性充分以能夠分離去除。

根據本發明一種典型的實施方式,高溫處理步驟中,將上清液濃縮至干物質的質量百分含量為5%~15%,然后進行高溫處理,保證了原料脫色前美拉德反應充分、大分子蛋白變性充分以能夠分離去除。優選地,將上清液濃縮至干物質的質量百分含量為8%~10%。

根據本發明一種典型的實施方式,脫色步驟包括調節上清液的pH為3.0~6.0,溫度為10~50℃,然后將上清液過大孔吸附樹脂柱,通過對過柱過程的控制使得在酵母精提物的干物質質量百分含量為5%時,酵母精提物在410nm波長處的吸光度低于0.15。使得脫色的效率更大)優選地,脫色步驟中上清液的pH為4.0~5.0,溫度為20~40℃。,以保證較高的脫色效率。

下面將結合具體實施例對本發明的技術效果作進一步的說明。

實施例1

1)制備酵母提取物。酵母按質量比加水配制成10%懸浮液,60℃加熱5小時,調節pH至6.0,加入0.5%的木瓜蛋白酶,反應15小時,加熱至90℃處理1.5h,采用離心分離收集上清液,蒸發至干得酵母提取物。

2)膜分離。取酵母提取物100kg加純凈水配制成溶液1噸,采用截留分子量為500KD的陶瓷膜進行膜分離,收集透過上清液,得上清液,干物質4.1%。

3)高溫處理。上清液真空濃縮至干物質10.2%,100℃保溫處理1h。

4)脫色。上清液采用鹽酸調節pH為4.0,溫度調節為20℃,透過大孔吸附樹脂柱脫色,收集脫色液,在線檢測410nm波長吸光度,待脫色液吸光度大于0.1后停止收集。收集得到脫色后上清液,干物質7.9%。

5)滅菌。采用超高溫瞬時滅菌機進行滅菌,135℃,加熱3-5s,滅菌后進行灌裝。

實施例2

1)制備酵母提取物。酵母按質量比加水配制成10%懸浮液,60℃加熱5小時,調節pH至6.0,加入0.5%的木瓜蛋白酶,反應15小時,加熱至90℃處理1.5h,采用離心分離收集上清液,蒸發至干得酵母提取物。

2)膜分離。取酵母提取物50kg加純凈水配制成溶液1噸,采用截留分子量為100KD的陶瓷膜進行膜分離,收集透過上清液,得上清液,干物質3.2%。

3)高溫處理。上清液真空濃縮至干物質8.2%,120℃保溫處理0.5h。

4)脫色。上清液采用鹽酸調節pH為5.0,溫度調節為50℃,透過大孔吸附樹脂柱脫色,收集脫色液,在線檢測410nm波長吸光度,待脫色液吸光度大于0.1后停止收集。收集得到脫色后上清液,干物質7.9%。

5)滅菌。采用超高溫瞬時滅菌機進行滅菌,135℃,加熱3-5s,滅菌后進行灌裝。

實施例3

1)制備酵母提取物。酵母按質量比加水配制成10%懸浮液,60℃加熱5小時,調節pH至6.0,加入0.5%的木瓜蛋白酶,反應15小時,加熱至90℃處理1.5h,采用離心分離收集上清液,蒸發至干得酵母提取物。

2)膜分離。取酵母提取物200kg加純凈水配制成溶液1噸,采用截留分子量為50KD的陶瓷膜進行膜分離,收集透過上清液,得上清液,干物質4.1%。

3)高溫處理。上清液真空濃縮至干物質5.0%,80℃保溫處理1h。

4)脫色。上清液采用鹽酸調節pH為3.1,溫度調節為10℃,透過大孔吸附樹脂柱脫色,收集脫色液,在線檢測410nm波長吸光度,待脫色液吸光度大于0.1后停止收集。收集得到脫色后上清液,干物質4.3%。

5)滅菌。采用超高溫瞬時滅菌機進行滅菌,135℃,加熱3-5s,滅菌后進行灌裝。

實施例4

1)制備酵母提取物。酵母按質量比加水配制成10%懸浮液,60℃加熱5小時,調節pH至6.0,加入0.5%的木瓜蛋白酶,反應15小時,加熱至90℃處理1.5h,采用離心分離收集上清液,蒸發至干得酵母提取物。

2)膜分離。取酵母提取物20kg加純凈水配制成溶液1噸,采用截留分子量為20KD的陶瓷膜進行膜分離,收集透過上清液,得上清液,干物質4.1%。3)高溫處理。上清液真空濃縮至干物質15%,90℃保溫處理2h。

4)脫色。上清液采用鹽酸調節pH為6.0,溫度調節為40℃,透過大孔吸附樹脂柱脫色,收集脫色液,在線檢測410nm波長吸光度,待脫色液吸光度大于0.1后停止收集。收集得到脫色后上清液,干物質11.8%。

5)滅菌。采用超高溫瞬時滅菌機進行滅菌,115℃,加熱3-5s,滅菌后進行灌裝。

對比例

制備酵母提取物。酵母按質量比加水配制成10%懸浮液,60℃加熱5小時,調節pH至6.0,加入0.5%的木瓜蛋白酶,反應15小時,加熱至90℃處理1.5h,采用離心分離收集上清液,蒸發至干得酵母提取物。

酪氨酸酶活性抑制試驗

根據下述方法對本發明實施例1-4及對比例提供的產品進行酪氨酸酶活性抑制率測定。

(1)材料:

酪氨酸酶(或用馬鈴薯制備)、L-酪氨酸、熊果苷、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、恒溫儀、紫外分光光度計、離心機。

(2)試劑配制

1)磷酸鈉緩沖液(1/15mol/L,pH=6.8)

2)L-酪氨酸溶液(7.5mmol/L)

3)受試液

4)陽性對照

精確稱取0.1g熊果苷粉末,溶于20mL的去離子水中,得到5mg/mL的陽性對照母液,再稀釋到2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.3125mg/mL。

5)酪氨酸酶液的制備

以新鮮完好的馬鈴薯制取酪氨酸酶液。具體操作為:將馬鈴薯洗凈,于4℃預冷4h左右。去皮,切成約1.0cm3丁狀,于-20℃冷凍過夜。稱重,按1∶1(W∶V)的比例加入4℃預冷的磷酸鈉緩沖液,用組織搗碎機制成勻漿,3層紗布過濾,濾液于4000r/min離心10min,上清液即為所得的酪氨酸酶粗酶液,4℃保存,2h內用完。

(3)檢測方法

總反應體系為5mL。具體設計見表1。

表1

在此體系中,受試液,包括陽性對照熊果苷的終濃度(mg/mL)梯度為0.03125、0.0625、0.125,0.25、0.5。

實驗時,向試管中依次加入磷酸鹽緩沖液、受試液(包括陽性對照)、酶液,于30℃水浴10min。然后加入底物L-酪氨酸,立即開始計時。測定反應20min時475nm波長下的吸吸光值。測定時,以相應的陰性對照為參比,用下列公式計算受試液(包括陽性對照)對酪氨酸酶的抑制率,并依據濃度一酶抑制率曲線估計半數抑制濃度(IC50)的近似值。

抑制率=[(A-B)/A]×100%

其中,“A”為標準對照的吸光值,“B”為受試液(或陽性對照)的吸光值。每個實驗做3個平行。抑制率高表明其對酪氨酸酶活性的抑制強度高。

羥自由基清除實驗

根據下述方法對本發明實施例1-4及對比例提供的產品進行羥自由基清除率測定。

(1)實驗儀器和試劑

實驗儀器:恒溫水浴鍋,離心機,分光光度計,比色管

試劑:H2O2,FeSO4,水楊酸,去離子水

(2)實驗方法

在比色管中加入一定量的FeSO4、H2O2,搖勻;

加入水楊酸,搖勻,于水浴加熱后取出,測其吸光度A0;

然后分別加入一定濃度的待測液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,然后再分別加入蒸餾水0.8ml、0.6ml、0.4ml、0.2ml、0ml,搖勻,繼續水浴加熱,取出測其吸光度Ax;

為消除后加的共1.0ml待測液和蒸餾水所造成的體系吸光度值的降低,方法同上,恒溫水浴后測其吸光度值A00,加1ml蒸餾水,搖勻后再測一次其吸光度Axx,A降低=A00-Axx。

待測液對·OH清除率為:·OH清除率(%)=100(A0-Ax-A降低)/A0

實施例1-4生產的酵母精提物及對比例的酵母提取物性能指標結果見表2。

表2

通過表2的數據說明:脫色后酵母提取物色澤明顯改善;膜分離能夠去除少量的大分子蛋白,有助于產品的穩定;本產品具有美白、抗衰老等功效。

以上所述僅為本發明的優選實施例而已,并不用于限制本發明,對于本領域的技術人員來說,本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內,所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本發明的保護范圍之內。

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