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一種防治麥類赤霉病的含腈菌唑農藥組合物及其用途.pdf

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一種 防治 赤霉病 含腈菌唑 農藥 組合 及其 用途
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摘要
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CN201610244422.2

申請日:

20160419

公開號:

CN105685058A

公開日:

20160622

當前法律狀態:

有效性:

有效

法律詳情:
IPC分類號: A01N43/653,A01N43/16,A01P3/00 主分類號: A01N43/653,A01N43/16,A01P3/00
申請人: 南京吉星生物技術開發有限公司
發明人: 潘建碧,周明國,段亞冰,王建新,侯毅平
地址: 211100 江蘇省南京市江寧區江寧經濟技術開發區勝太路59號
優先權: CN201610244422A
專利代理機構: 北京君智知識產權代理事務所(普通合伙) 代理人: 向華
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法律狀態
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CN201610244422.2

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摘要

本發明涉及一種用于防治麥類赤霉病的農藥組合物及其用途。它含有1~120重量份井岡霉素與1~50重量份腈菌唑。本發明的農藥組合物用于防治麥類赤霉病具有明顯的增效作用,每畝使用10~40克有效成分即可有效控制赤霉病的危害。使用該組合物防治麥類作物赤霉病,還具有顯著降低谷物DON毒素的污染水平,提高食品安全質量;減少用藥量、降低成本、減少環境污染和農藥殘留;延緩抗藥性和延長井岡霉素的持效期、兼治麥類白粉病、銹病、葉枯病和紋枯病,減少農藥使用的用工成本的優點。

權利要求書

1.一種用于防治麥類赤霉病的農藥組合物,其特征在于所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比1~120:1~50組成的。2.根據權利要求1所述的農藥組合物,其特征在于所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比5~60:3~25組成的。3.根據權利要求1所述的農藥組合物,其特征在于所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比8~20:6~20組成的。4.一種用于防治麥類赤霉病的農用殺菌劑,其特征在于它含有以重量計0.1~90.0%權利要求1-3中任一權利要求所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。5.根據權利要求4所述的農用殺菌劑,其特征在于它含有以重量計10~75.0%權利要求1-3中任一權利要求所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。6.根據權利要求4所述的農用殺菌劑,其特征在于它含有以重量計15~60.0%權利要求1-3中任一權利要求所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。7.根據權利要求4-7中任一項權利要求所述的農用殺菌劑,其特征在于它為懸浮劑、水乳劑、微乳劑、可濕性粉劑或水分散顆粒劑。8.根據權利要求4-7中任一項權利要求所述的農用殺菌劑,其特征在于所述的載體是一種或多種選自水、凹凸棒土、高嶺土或輕質碳酸鈣的載體。9.根據權利要求4-7中任一項權利要求所述的農用殺菌劑,其特征在于所述的助劑選自乙醇、甲醇、乙二醇、丙二醇、NNO-1、NNO-7、黃原膠、聚乙二醇、甘油、拉開粉、十二烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、硫酸銨、烷基酚聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、苯甲酸、木質素磺酸鈉、羧甲基纖維素或聚乙烯醇。10.根據權利要求1所述的農藥組合物或4所述的農用殺菌劑,其特征在于所述的麥類赤霉病是小麥赤霉病和大麥赤霉病,由包括多菌靈抗性鐮刀菌的鐮刀菌屬病原真菌(Fusariumspp.)引起的麥類作物芽腐、苗枯、穗腐或枯穗,并兼治麥類作物紋枯病、銹病、白粉病和葉枯病。

說明書

【技術領域】

本發明屬于農藥技術領域。更具體地,本發明涉及一種用于防治麥類赤霉病的農藥組合物,還涉及所述農藥組合物的用途。

【背景技術】

小麥和大麥是世界上最重要的谷類栽培作物,也是中國的主要糧食作物之一。谷類作物常常面臨黑穗病、赤霉病、白粉病、紋枯病、銹病和葉枯病等真菌病害的威脅。在世界谷類種植區均會發生這些病害,嚴重影響谷類農產品的產量和品質,尤其是由鐮刀菌引起的麥類赤霉病不僅能夠造成毀滅性的產量損失,而且在感染的谷粒中還會產生脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Trichothecenes,DON)和玉米赤霉烯酮(Zearalenon)等毒素,因此嚴重影響發酵、釀酒等食品質量,危害人和動物的健康。

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇毒素,包括DON、3ADON和15ADON毒素,對人和動物均有急、慢性毒性。其中DON毒素因其化學性質穩定,受熱不分解,而在感染赤霉病菌的大、小麥及其加工食品和以感染赤霉病菌的病谷為飼料的動物制品中廣泛存在。已知DON毒素引起人畜中毒的主要癥狀有惡心、嘔吐、眩暈、嗜睡、頭痛、手足發麻、全身乏力、免疫力下降,嚴重者可見呼吸、脈搏、體溫、血壓的波動,及出血、流產、甚至導致死亡,并可引起人類大骨節病(Kaschin-Beckdisease,KBD)和具有明顯的胚胎毒性和致畸、致癌作用。由于DON毒素對人類健康的嚴重危害性,1973年10月聯合國世界糧農組織(FAO)和世界衛生組織(WHO)在日內瓦召開的關于食品添加劑和污染物的聯席會議上,決定將鐮刀菌毒素列入優先研究的16項課題中的第5項,許多國家也一直把赤霉病的防治作為重要的研究課題。

同時,許多國際組織和國家的衛生組織制定了相應的法律法規嚴格限制食品中DON毒素含量。FAO規定糧食中DON的含量必須小于1mg/kg,WHO規定糧食和飼料中的DON毒素含量分別不能超過1mg/kg和5mg/kg的標準。歐盟食品安全標準要求DON毒素含量在食用麥粒中不超過0.75mg/kg,在面包和其他食品中不超過0.5mg/kg。我國衛生部制定的國家標準規定在食用小麥面粉和玉米中DON的毒素含量不得超過1mg/kg。

麥類赤霉病是一種可由多種鐮刀菌或稱鐮孢菌(Fusariumspp.)引起的芽腐、苗枯和穗腐/穗枯的子囊菌病害。其病原包括禾谷鐮刀菌(F.graminearum)、亞洲鐮刀菌(F.asiaticum)、黃色鐮刀菌(F.culmorum)、燕麥鐮刀菌(F.avenaceum)、串珠鐮刀菌(F.moniliforme)、雪腐鐮刀菌(F.nivale)等近20個種。我國大部分地區的小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌(F.graminearum)和亞洲鐮刀菌(F.asiaticum)混合種群引起的,其中南方麥區以亞洲鐮刀菌為主,北方麥區以禾谷鐮刀菌為主。

由于至今沒有能夠發現對鐮刀菌具有免疫或高抗的谷類作物品種或基因資源,使用殺菌劑成為唯一有效的麥類赤霉病防控技術。近一個世紀以來,人們開展了大量用于麥類真菌病害防治的殺菌劑研發工作,先后開發出無機殺菌劑、有機硫殺菌劑和芳烴類等保護性殺菌劑,特別是20世紀60年代以后開發出的苯并咪唑類殺菌劑、麥角甾醇生物合成抑制劑、細胞色素b抑制劑和琥珀酸脫氫酶抑制劑等選擇性殺菌劑,使許多麥類作物重要病害的流行危害得到有效控制,如谷類作物黑穗病、白粉病、銹病、葉枯病、眼斑病等。然而,由于鐮刀菌(Fusariumspp.)產生的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)毒素具有致病因子的功能,增加對多種殺菌劑的耐藥性作用,以致絕大多數殺菌劑對麥類赤霉病的防治效果并不十分理想。因此,如何有效控制谷類作物赤霉病,是當今保障糧食安全和食品安全的重大社會需求。

罹病谷物的DON毒素污染水平取決于谷物被感染的病原菌菌量及菌體毒素生物合成能力。本發明針對當今國內外防治麥類赤霉病的主要殺菌劑防效并不十分理想、DON毒素污染常常超過可食用安全標準的狀況,研究并首次發現鐮刀菌存在苯并咪唑類殺菌劑的兩種β-微管蛋白(β1-和β2-)受體,以及對抗藥性和藥敏性的遺傳負調控機制,發現其中組成β2-微管蛋白受體的240位氨基酸苯丙氨酸是降低藥敏性的主要原因,167位氨基酸點突變會導致多菌靈喪失防治效果,并大幅度增強菌體DON毒素合成能力、菌絲蔓延速度和致病能力,降低殺菌劑的防治效果;另外,研究還發現鐮刀菌的麥角甾醇生物合成抑制劑(EBI)受體-細胞色素P450單加氧酶,也可以通過編碼基因過表達和點突變降低對EBI的藥敏性或產生抗藥性。因此,盡管一些殺菌劑在實驗室雖然表現很高活性,但在田間應用則需要較高劑量,如每畝需要使用40~50克(600-750ga.i./hm2)以上有效成分的苯并咪唑類殺菌劑或15~20克(225-300ga.i./hm2)以上有效成分的EBI,才能獲得70%左右的麥類赤霉病控制效果。

隨著長期大量使用這些作用機理單一的選擇性殺菌劑,自然界的病原真菌群體中出現了抗藥性,使用效果逐年下降。發明人通過近30年的抗藥性監測,發現中國華東地區對多菌靈等苯并咪唑類殺菌劑產生抗藥性的鐮刀菌已經形成優勢群體,常用的多菌靈、硫菌靈等苯并咪唑類殺菌劑基本喪失了對麥類赤霉病的防治價值。同時還因為抗藥性病菌產生DON毒素的能力是敏感菌株的5倍以上,日益加重了中國麥類赤霉病的危害和食品安全的風險。農民為了減少產量損失,往往加倍使用多菌靈等殺菌劑,進一步加劇了抗藥性、農藥殘留、環境污染和食品安全問題。

為此,本發明人在總結現有技術的基礎之上,通過大量實驗研究與分析,終于完成了本發明。

【發明內容】

[要解決的技術問題]

本發明的目的是提供一種用于防治麥類赤霉病的農藥組合物。

本發明的另一個目的是提供所述農藥組合物的用途。

[技術方案]

本發明是通過下述技術方案實現的。

本發明涉及一種用于防治麥類赤霉病的農藥組合物。

所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比1~120:1~50組成的。

根據本發明的一種優選實施方式,所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比5~60:3~25組成的。

根據本發明的另一種優選實施方式,所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比8~20:6~20組成的。

本發明還涉及一種用于防治麥類赤霉病的農用殺菌劑。所述的農用殺菌劑含有以重量計0.1~90.0%所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。

根據本發明的一種優選實施方式,所述的農用殺菌劑含有以重量計10~75.0%所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。

根據本發明的另一種優選實施方式,所述的農用殺菌劑含有以重量計15~60.0%所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。

根據本發明的另一種優選實施方式,所述的農用殺菌劑為懸浮劑、水乳劑、微乳劑、可濕性粉劑或水分散顆粒劑。

根據本發明的另一種優選實施方式,所述的載體是一種或多種選自水、凹凸棒土、高嶺土或輕質碳酸鈣。

根據本發明的另一種優選實施方式,所述的助劑選自乙醇、甲醇、乙二醇、丙二醇、NNO-1、NNO-7、黃原膠、聚乙二醇、甘油、拉開粉、十二烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、硫酸銨、烷基酚聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、苯甲酸、木質素磺酸鈉、羧甲基纖維素或聚乙烯醇。

根據本發明的另一種優選實施方式,所述的麥類赤霉病是小麥赤霉病和大麥赤霉病,由包括多菌靈抗性鐮刀菌的鐮刀菌屬病原真菌(Fusariumspp.)引起的麥類作物芽腐、苗枯、穗腐或枯穗。

下面將更詳細地描述本發明。

本發明涉及一種用于防治麥類赤霉病的農藥組合物。

所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比1~150:1~50組成的。

本發明使用的腈菌唑,英文通用名Myclobutanil,其化學結構式如下:

它是一類具保護和治療活性的內吸性三唑類殺菌劑。腈菌唑主要通過抑制病原菌麥角甾醇的生物合成,破壞真菌細胞膜透性和膜結構而強烈抑制真菌菌絲生長,對子囊菌、擔子菌均具有良好的防治效果。腈菌唑具有強內吸性、藥效高,持效期長,對作物安全,刺激其生長的特點。該殺菌劑可用于防治蘋果、梨等仁果類植物的白粉病、銹病和黑星病,防治核果類植物的白粉病、褐銹病、污點病、腐爛病,防治麥類散黑穗病、堅黑穗病、網腥黑穗病、小麥粳枯病、大麥條紋病,對苗期麥類白粉病、銹病和紋枯病也有防治作用,但對麥類赤霉病的防治尚無登記和鮮見報道。

本發明使用的井岡霉素(有效霉素),英文通用名Validamycin或jinggangmycin,其化學結構式如下:

井岡霉素是一種放線菌的次生代謝物,含有A、B、C、D、E、F六種類似氨基葡聚糖苷類衍生物。國內外大量研究表明,A組分是井岡霉素的主要活性組分。因此,在本發明中涉及的井岡霉素是井岡霉素A。

井岡霉素在離體條件下表現專一性干擾擔子菌中的絲核菌屬真菌(Rhizoctoniaspp.)頂端菌絲發育。因此,井岡霉素自20世紀70年代被發現以來,一直作為農用抗生素專一性地防治絲核菌引起的植物病害,或與防治其他植物有害生物的農藥加工成復配劑兼治絲核菌(Rhizoctoniaspp.)病害。這些絲核菌病害主要包括水稻紋枯病、小麥紋枯病和其他作物紋枯病或立枯病。近年,井岡霉素又被發現還可以用于防治一種難以培養的半知菌(Ustilaginoideavirens)引起的稻曲病。

由于有效霉素或井岡霉素在離體下只表現對絲核菌具有專化性抗菌活性,對引起赤霉病的鐮刀菌沒有抗菌活性,因此,幾十年來人們一直以絲核菌為對象,研究井岡霉素的選擇性機制,發現有效霉素/井岡霉素干擾絲核菌肌醇和海藻糖代謝,從而破壞細胞壁的構造,阻止絲核菌侵染植物,具有良好的保護作用。數十年來該抗生素一直被局限于用來防治農作物絲核菌病害,尤其是水稻紋枯病。

眾所周知,作用單一的專化性殺菌劑極易篩選出抗藥性病原菌,在廣泛應用后不久便會失去應用價值。本發明人自20世紀80年代研究絲核菌對選擇性井岡霉素的抗藥性風險,發現井岡霉素不同于抗性風險極高的其它任何選擇性抗生素和化學殺菌劑,在實驗室和田間條件下均無法篩選到井岡霉素抗性絲核菌。由此推斷,井岡霉素除干擾已知的肌醇和海藻糖生物合成以外,可能還存在其他特殊的抗病作用機制。

本發明人在研究鐮刀菌DON毒素生物合成途徑及調控機制的基礎上,開展了抑制DON毒素生物合成的大量化合物篩選。在篩選過程中,令人驚訝地發現井岡霉素在一定處理劑量下,能夠強烈抑制小麥赤霉病菌DON毒素生物合成早期途徑中的生物化學反應。因此,提供一種降低DON污染的井岡霉素與腈菌唑組合物防治麥類赤霉病技術,成為本發明的重要目的。

本發明人在國際上首次開展了井岡霉素/有效霉素抑制鐮刀菌致病因子DON合成,及其與其他各種殺菌劑的混合物在田間防治麥類赤霉病的增效配方篩選,發現井岡霉素與腈菌唑組合物防治麥類作物赤霉病具有顯著增效、降低DON毒素污染和大幅度減少腈菌唑用量的有益效果。

在本發明的農藥組合物中,如果井岡霉素的量在1~120重量份范圍內,而腈菌唑的量小于1重量份時,則會降低對赤霉病的防治效果;腈菌唑的量大于50重量份時,則會對小麥生長具有抑制作用。因此,腈菌唑的量為1~50重量份是合理的。

同樣地,如果腈菌唑的量在1~50重量份范圍內,而井岡霉素的量小于1重量份時,則會失去與腈菌唑協同防治赤霉病、降低毒素污染水平的增效作用;井岡霉素的量大于120重量份時,則會增加成本,降低與腈菌唑協同防治赤霉病和降低毒素污染的增效作用;因此,井岡霉素的量為1~120重量份是恰當的。

優選地,所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比5~60:3~25組成的。

更優選地,所述的農藥組合物是由井岡霉素與腈菌唑按照重量比8~20:6~20組成的。

本發明使用的井岡霉素與腈菌唑都是目前市場上銷售的產品,例如由浙江錢江生物化學股份有限公司3%、5%A、20%、40%A、60%A井岡霉素粉劑和水劑;由美國陶氏益農公司生產的40%腈菌唑可濕性粉劑等。

本發明還涉及一種用于防治麥類赤霉病的農用殺菌劑制劑。所述的農用殺菌劑含有以重量計0.1~90.0%所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。

在本發明中,農藥載體或助劑應該理解是在農藥制劑加工或使用中用于改善藥劑理化性質,提高藥效,便于運輸貯藏等性能的輔助物質,例如潤濕劑、乳化劑、分散劑、粘著劑、穩定劑或增效劑。根據本發明,凡是具有這些性能且對本發明的農用殺菌劑沒有任何負面影響的化學物質都可以用于本發明,它們都在本發明的保護范圍之內。

本發明使用的載體例如是一種或多種選自水、凹凸棒土、高嶺土或輕質碳酸鈣。除此之外,本發明也可以使用符合本發明要求的在本技術領域里通常使用的其它載體。

本發明使用的助劑例如選自乙醇、甲醇、乙二醇、丙二醇、NNO-1(化學名稱:萘磺酸甲醛縮合物鈉鹽)、NNO-7(化學名稱:萘磺酸甲醛縮合物鈣鹽)、黃原膠、聚乙二醇、甘油、拉開粉、十二烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、硫酸銨、烷基酚聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、苯甲酸、木質素磺酸鈉、羧甲基纖維素或聚乙烯醇、有機硅消泡劑(聚硅氧烷與硅樹脂縮合物,或聚硅氧烷和聚醚共聚物)。本發明使用的助劑是目前市場上廣泛銷售的產品,例如由新沂市飛皇化工有限公司以商品名NNO-1、NNO-7銷售的擴散劑、由湖北興銀河化工有限公司以商品名拉開粉銷售的丁基萘磺酸鈉乳化、擴散和滲透劑、由上海忠誠精細化工有限公司銷售的烷基酚聚氧乙烯醚、由廣州市西陸化工有限公司銷售的烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、由山東省梁山宏泰環氧大豆油有限公司銷售的脂肪酸聚氧乙烯酯、由江西省萍鄉麻山助劑廠銷售的羧甲基纖維素、南京華興消泡劑有限公司銷售的有機硅消泡劑。除此之外,本發明也可以使用符合本發明要求的在本技術領域里通常使用的其它助劑。

在本發明中,在所述的農用殺菌劑中,所述的農藥組合物的量小于0.1%時,則會降低防病效果、失去增效作用和增加成本;所述的農藥組合物的量大于90.0%時,則會降低制劑理化質量、失去增效作用或降低防病效果;因此,所述農藥組合物的量為0.1~90.0%是合理的。

優選地,所述的農用殺菌劑含有以重量計10~75.0%所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。

更優選地,所述的農用殺菌劑含有以重量計15~60.0%所述的農藥組合物,余量為在農藥中可接受的載體和/或助劑。

在實際應用中,可以按照本領域技術人員熟知的方法將本發明的殺菌組合物與載體和/或助劑配制成在農業上通常采用的劑型,例如懸浮劑、水乳劑、微乳劑、可濕性粉劑或水分散粒劑。

在制備懸浮劑時,可以使用的載體或助劑例如是選自烷基萘磺酸鹽、聚羧酸鹽或木質素磺酸鹽的分散劑;選自烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基硫酸鹽、烷基磺酸鹽或萘磺酸鹽的潤濕劑;選自黃原膠、硅酸鎂鋁、膨潤土的增稠劑;選自苯甲酸或苯甲酸鈉的防腐劑;有機硅類消泡劑;選自甘油、尿素、乙二醇或丙二醇的防凍劑。

在制備水乳劑時,可以使用的載體或助劑例如是選自農乳700、農乳2201、Span-60或乳化劑T-60的乳化劑;選自二甲苯、甲苯或環己酮的溶劑;選自亞磷酸三苯酯或環氧氯丙烷的穩定劑;選自乙二醇、丙二醇、甘油或尿素的防凍劑;選自硅酸鎂鋁、膨潤土或黃原膠的增稠劑;選自苯甲酸或苯甲酸鈉的防腐劑。

在制備微乳劑時,可以使用的載體或助劑例如是選自十二烷基苯磺酸鈣(農乳500)、農乳700、農乳2201、斯盤-60、吐溫-80或TX-10的乳化劑;選自甲醇、異丙醇、正丁醇或乙醇的助溶劑;選自二甲苯、甲苯、環己酮或N-甲基吡咯烷酮的溶劑;選自亞磷酸三苯酯或環氧氯丙烷的穩定劑。

在制備可濕性粉劑時,可以使用的載體或助劑例如是選自聚羧酸鹽、木質素磺酸鹽或烷基萘磺酸鹽的分散劑;選自烷基磺酸鹽、烷基硫酸鹽或萘磺酸鹽的潤濕劑;選自輕質碳酸鈣、滑石粉、硅藻土、高嶺土或凹凸棒土的填料。

在制備水分散粒劑時,可以使用的載體或助劑例如是選自聚羧酸鹽、木質素磺酸鹽或烷基萘磺酸鹽的分散劑;選自烷基硫酸鹽、聚氧乙烯醇、烷基磺酸鹽或萘磺酸鹽的潤濕劑;選自檸檬酸、硫酸銨、葡萄糖、尿素或碳酸氫鈉的崩解劑;選自玉米淀粉、微晶纖維素類或硅藻土粘結劑;選自輕質碳酸鈣、海泡石、硅藻土、高嶺土、凹凸棒土或滑石粉的填料。

下面將分別進行詳細說明其研究結果。

I、抑制鐮刀菌生長的活性化合物篩選

本發明采用殺菌劑生物測定的常規方法,將井岡霉素和腈菌唑分別用滅菌水及甲醇配制成2mg/mL母液,對照藥劑多菌靈原藥溶于0.1M/L鹽酸溶液、氰烯菌酯溶于甲醇,制成2mg/mL母液。在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)冷卻至溫度約45℃時,分別加入井岡霉素和腈菌唑至設計濃度(見表1),然后倒入培養皿制成不同藥劑處理的平板,每處理3皿重復,接種引起麥類赤霉病的常見禾谷鐮刀菌Fusariumgraminearum和亞洲鐮刀菌Fusariumasiaticum野生敏感菌株(簡稱敏感菌株)及多菌靈和氰烯菌酯抗性菌株(簡稱抗藥性菌株)的菌絲塊,在溫度25℃下培養4天,十字交叉法量取菌落直徑,計算不同處理抑制病菌生長50%的有效中劑量(EC50值),并比較抗菌活性。

試驗結果表明,井岡霉素在離體下無論是單劑還是與腈菌唑混用對引起赤霉病的這兩種鐮刀菌敏感菌株和抗藥性菌株的生長基本沒有抑制活性,只有井岡霉素高達50g/mL濃度時,對兩種鐮刀菌生長才有6.5%~7.8%的抑制作用。但腈菌唑對兩種鐮刀菌的敏感菌株及抗藥性菌株的菌絲生長具有相似的強烈抑制作用,0.05g/mL腈菌唑處理對菌絲生長的抑制作用即可達50%。井岡霉素在離體條件下對腈菌唑抑制菌絲生長沒有增效作用(參見表1)。

根據亞洲鐮刀菌和禾谷鐮刀菌野生敏感菌株及多菌靈和氰烯菌酯抗性菌株在腈菌唑不同劑量處理下的生長抑制率,計算腈菌唑對不同藥敏性菌株生長抑制的有效中劑量(EC50),結果發現野生型敏感菌株、多菌靈抗性菌株、氰烯菌酯抗性菌株對腈菌唑的敏感性相似,EC50為0.056~0.068g/mL,試驗結果列于表2中。

以藥劑EC50為參數,比較不同殺菌劑抑制鐮刀菌生長的活性,發現腈菌唑的活性約是多菌靈對敏感菌株活性(對兩種鐮刀菌EC50均為0.45g/mL)的7~8倍,約是氰烯菌酯對敏感菌株活性(對兩種鐮刀菌EC50均為0.165g/mL)的2~3倍。該結果說明腈菌唑具有強烈抑制野生敏感菌株和多菌靈及氰烯菌酯抗性鐮刀菌生長的活性,利于降低侵染谷物的DON毒素污染水平和防治抗藥性病害。

表1:井岡霉素和腈菌唑在離體條件下對兩種鐮刀菌敏感菌株生長的影響

*F.g和F.a分別是Fusariumgraminearum和Fusariumasiaticum的縮寫,下同。

表2:腈菌唑對兩種鐮刀菌敏感及多菌靈和氰烯菌酯抗性菌株的生長抑制活性

II.井岡霉素對鐮刀菌毒素生物合成能力的抑制活性

由于禾谷鐮刀菌與亞洲鐮刀菌對井岡霉素和腈菌唑的藥敏性相同,本發明人選用毒素合成能力(單位菌量合成DON重量,gDON/g干重菌絲)較強的亞洲鐮刀菌Fusariumasiaticum作為進一步研究毒素合成的材料。將引起麥類赤霉病的多菌靈抗性亞洲鐮刀菌接種于滅菌的3%綠豆湯中,在溫度25℃和12/24小時散射光下搖培10天,離心收集分生孢子。將分生孢子按照最終為106/mL接種于含井岡霉素不同劑量的馬鈴薯蔗糖(PS)培養液中,在溫度25℃和12/24小時散射光下搖培,在7和14天后過濾培養物,分別檢測培養液中毒素含量和測量菌絲干重,分析毒素合成能力(單位重菌絲產生的毒素量)。

毒素測定方法:培養濾液分別與乙酸乙酯等體積萃取2次,合并萃取液,減壓蒸餾干燥,用1mL乙腈溶解轉移到新離心管中,再蒸餾干燥,在溫度-20℃下保存待測。在檢測時加入100μLTMS衍生化試劑(TMSI:TMCS=100:1),混勻10min,加入1mL超純水,震蕩分層,再吸取上清液并加到GC進樣瓶中,用裝有電子捕獲監測器的氣相色譜(GC-ECD)進行毒素含量檢測。以Sigma的DON試劑為標樣,建立標準曲線,計算培養液中的DON含量,其中包括DON、3ADON和15ADON。同時將濾出菌絲在溫度80℃下烘至恒重,稱量菌絲干重。此外,在搖培7天時,移取菌絲檢測毒素合成關鍵基因Tri5的表達水平。其試驗結果列于表3中。

從表3實驗結果可以發現赤霉病菌的菌絲生長量隨著培養時間延長而增加,但在含有不同劑量井岡霉素處理的培養基中搖培,菌絲生長量與空白對照沒有顯著變化,說明井岡霉素對液體培養赤霉病菌的生長沒有抑制作用,與在PDA平板上的線性生長速率測定結果一致。但是,首次發現單位菌絲重量合成DON毒素的量(μgDON/g干重菌絲)則隨井岡霉素處理劑量增加而顯著減少。而且,井岡霉素對DON合成的抑制作用隨培養時間延長而下降,尤其是在低濃度處理時降幅度更大。這些結果說明井岡霉素隨著試驗時間的延長可能發生降解,從而降低了對毒素生物合成的抑制作用。

根據處理7天時的毒素合成基因表達水平分析,發現井岡霉素在離體條件下雖然對鐮刀菌的生長及菌絲形態沒有不良影響,但在很低處理劑量下能夠強烈抑制DON毒素合成關鍵基因tri5表達,降低菌體毒素生物合成能力,減少DON生物合成,其試驗結果列于表4中。

表3:井岡霉素抑制鐮刀菌DON毒素合成能力試驗結果

表4:井岡霉素對鐮刀菌DON合成基因Tri5基因表達影響試驗結果

III.腈菌唑對井岡霉素抑制鐮刀菌DON毒素生物合成能力的增效作用

腈菌唑處理能夠破壞赤霉病菌的細胞膜透性,抑制菌絲生長。腈菌唑與井岡霉素組合物處理能夠增加病菌對井岡霉素的吸收利用。在研究內容II測定井岡霉素抑制鐮刀菌DON毒素生物合成的同時,還測定了在0.05g/mL腈菌唑存在下,在培養7天和14天時井岡霉素對Fusariumasiaticum的DON毒素生物合成能力的抑制作用,分析腈菌唑對井岡霉素抑制DON毒素生物合成的增效作用。DON檢測方法與研究內容II相同。

由研究內容I和II知道,0.05μg/ml腈菌唑單獨處理對赤霉病菌的菌絲生長具有約50%的抑制率。從表5結果可以看出,0.05μg/ml腈菌唑處理在7天和14天時對鐮刀菌毒素生物合成能力與空白對照毒素合成能力沒有顯著的抑制作用,說明腈菌唑只有抑制菌絲生長活性,沒有抑制毒素合成能力的作用。但是,在0.05μg/ml腈菌唑的存在下,各處理濃度的井岡霉素對DON毒素生物合成能力抑制作用大幅度提高。而且隨著培養時間延長,井岡霉素對毒素合成能力抑制作用下降速度顯著低于沒有腈菌唑的對照處理,在低濃度井岡霉素處理的增效及延長作用時間尤其更加明顯。根據表3列出結果計算,在0.05μg/mL腈菌唑時,井岡霉素處理在7天和14天時對抑制鐮刀菌毒素生物合成的增效作用結果列于表5中。由這些結果清楚說明:(1)井岡霉素具有強烈降低鐮刀菌DON毒素生物合成能力的作用,腈菌唑則沒有這種作用;(2)腈菌唑對井岡霉素抑制鐮刀菌毒素生物合成具有明顯的增效作用,并隨井岡霉素處理劑量降低,增效作用增強;(3)腈菌唑能夠延長井岡霉素對鐮刀菌毒素合成的抑制作用時間,增效作用隨處理時間延長而增強。

表5:0.05μg/mL腈菌唑對井岡霉素抑制小麥赤霉病菌DON毒素合成增效作用試驗結果

*增效系數計算方法:在0.05μg/ml腈菌唑時,井岡霉素對毒素合成抑制率除以井岡霉素單獨處理時相應劑量毒素合成抑制率,再乘以100。

IV.本發明農用殺菌劑懸浮劑處理小麥種子防治小麥苗期赤霉病和其它病害的效果及增效作用

按照井岡霉素與腈菌唑的重量比1:1.5、10:1.5、100:1.5、1:1、10:1、100:1、2:1、20:1、200:1、5:1和50:1,分別制備含量為3%(1:1.5、1:1、2:1、)、5%(10:1.5、10:1、5:1、)、10%(50:1、100:1、20:1、)、20%(100:1.5、200:1)的農用殺菌劑懸浮劑樣品。樣品制備方法是腈菌唑和井岡霉素原藥按照上述重量比混合,加入含以重量計40%水、8%乙二醇和丙二醇混合溶劑(體積比1:1)、1.0%NNO-1和1.5%NNO-7分散劑(新沂市飛皇化工有限公司生產)、1%有機硅消泡劑、0.5%黃原膠粘著劑與1%聚乙二醇的溶液中,最后用水補充至100%,經砂磨機粉碎至90%的藥劑顆粒直徑≦5m。

按每100kg種子處理使用所述農用殺菌劑懸浮劑中的單劑用量,設計相應劑量的井岡霉素和腈菌唑單劑用量(見表6),在播種前分別按100kg種子用藥液5升將這些藥液兌水稀釋,然后拌種處理已感染小麥赤霉病菌的小麥種子。每個直徑20cm盆缽播種25粒種子,各處理重復10盆,置于溫室培養。出苗后10天檢查出苗率和死苗率,計算對赤霉病菌引起芽腐和苗枯的防治效果。同時保留10株長勢一致的麥苗,并在基質中接種含有小麥紋枯病菌(Rhizoctoniacerealis)的麥麩培養基,和對葉片接種白粉病菌和葉銹菌孢子,接種后14天各處理調查100株麥苗,計算紋枯病、白粉病和銹病的株發病率和防治效果。同時根據單劑對赤霉病菌引起的芽腐和苗枯防效,按Abbott(1925)方法計算組合物的理論防效〔E=X+(100-X)Y/100,其中E為理論防效,X為井岡霉素單劑防效,Y為腈菌唑單劑防效〕及增效系數(組合物實際防效除以理論防效乘以100),其結果見表6。

表6:本發明農用殺菌劑懸浮劑處理小麥種子防治小麥病害效果及增效作用試驗結果

*Abbott認為組合物實際防效與理論防效之比大于1(或增效系數大于100)即為增效(下同)。(據我們代理的其它申請文件中,是以增效系數大于120為增效..........)

上述試驗結果表明,本發明農用殺菌劑懸浮劑拌種處理罹赤霉病的小麥種子,不僅可以有效防治赤霉病菌引起的芽腐和苗枯,而且在試驗劑量處理的范圍內(10~1000gai井岡霉素與7.5~60gai腈菌唑/100kg種子)均對防治赤霉病菌引起的苗枯有極好的增效作用,增效系數遠遠大于100,增效作用極為顯著。雖然井岡霉素單劑對紋枯病有一定的防效,但對白粉病和銹病基本無效;腈菌唑單劑則對苗期赤霉病、紋枯病、白粉病和銹病均有較好防效,并與井岡霉素混用表現明顯的增效作用。

V.本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥赤霉病的增效作用及降低毒素作用

按照井岡霉素與腈菌唑的重量比1:50、1:20、1:3、1:2、1:1.5、1:1、2:1、5:1、5:1.5、50:3、10:1、10:1.5、50:2.5、50:1.5、和50:1,分別制備含量以重量計20%(1:50、1:20、1:3、1:2、1:1.5、1:1、2:1、5:1、5:1.5)和40%(10:1、10:1.5、50:3、50:2.5、50:1.5、50:1)的本發明農用殺菌劑懸浮劑實驗用樣品。樣品制備方法是腈菌唑和井岡霉素原藥按照上述重量比混合后,加入含以重量計5%乙二醇和丙二醇混合溶劑(體積比1:1)、2%甘油、1.0%NNO-1分散劑、1%有機硅消泡劑、3%十二烷基硫酸鈉和少量水的溶液中,最后用水補充至100%,經砂磨機粉碎至90%的藥劑顆粒直徑≦5m。

設計每畝使用不同劑量的本發明農用殺菌劑懸浮劑,同時根據該農用殺菌劑中的單劑用量設計了相應的單劑處理。2013年4月在江蘇省白馬湖農場進行田間防治赤霉病的試驗篩選,小麥品種為淮麥22,在小麥揚花初期各藥劑樣品對水噴施處理,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。各處理重復3個小區,每小區面積50平方米。同時設50%多菌靈可濕性粉劑每畝用80克處理作為對照藥劑。按照農業部頒發的殺菌劑田間藥效試驗準則行業標準規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病發生情況,根據各處理防治赤霉病的實際效果,計算組合物的增效作用。按Abbott(1925)方法計算組合物的理論防效〔E=X+(100-X)Y/100,其中E為理論防效,X為井岡霉素單劑防效,Y為腈菌唑單劑防效〕及增效系數(組合物應用的實際防效除以理論防效乘以100)。

毒素測定方法:在蠟熟期各處理5點取樣200麥穗,室內脫粒,烘干后隨機取樣30克麥粒粉碎。按Goswami和Kistler方法,取5克面粉置于離心管中,加入20mL的乙腈:水(體積比84:16)提取液,渦旋機混勻,在搖床上震蕩24小時,以5000rpm離心10min,移取2mL上清液加到Eppendorf離心管中,N氣吹干,在溫度-20℃保藏。檢測時,加入100LTMS衍生化試劑(TMSI:TMCS=100:1),混勻10min,加入1mL超純水,震蕩分層,吸取上清液加到GC進樣瓶中,用裝有電子捕獲監測器的氣相色譜(GC-ECD)進行毒素含量檢測。

麥粒感染菌量測定方法:取2g用于毒素檢測的面粉置于50mL離心管中,加入20%CTAB病菌DNA抽提緩沖液,再加入50μL蛋白酶K和30μLRNA酶,充分混勻,65℃孵化3小時后,10000rpm離心10min,20mL上清全部轉至50mL離心管中,再加入等體積苯酚:氯仿:異戊醇(25:24:1)劇烈震蕩,10000rpmL離心5min,取10mL上清液加入冷的1/10體積3molL-1醋酸鈉和2倍體積無水乙醇,在溫度-20℃下沉淀24小時,以10000rpm離心10min,得到的沉淀物用20mL以體積計70%乙醇水溶液洗脫2次,晾干,再加入50μLTE緩沖溶液溶解,在溫度-20℃下保存該DNA模板。根據DON合成關鍵基因Tri5設計引物,采用實時定量PCR擴增樣品中的DNA,并計算每克小麥樣品中Tri5DNA含量(gDNA/g小麥),計算組合物各處理對菌體毒素合成能力的抑制作用,其結果見表7。

表7:本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥赤霉病的增效作用及減少DON毒素污染試驗結果

本發明農用殺菌劑田間篩選及試驗結果表明,本發明農用殺菌劑懸浮劑在小麥揚花初期至灌漿期噴施,在每畝使用井岡霉素有效成分1~120g和腈菌唑有效成分3~25克的混劑時,不僅均對赤霉病的防治具有顯著增效作用(增效系數大于100)。而且本發明農用殺菌劑懸浮劑應用后,對降低谷物的DON污染水平具有顯著增效作用,可以減少DON含量85%以上,將毒素污染水平控制在1mgDON/kg谷物以下的安全水平。同時對感染麥粒的病菌定量分析結果也再次表明,井岡霉素具有抑制菌體毒素合成能力,而腈菌唑則沒有這種作用。多菌靈單獨處理雖然對赤霉病有67.5%的防效,但谷物毒素污染水平仍有4.4mg/kg谷物,比空白對照僅下降58.5%。

VI.本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥病害的增效作用及減少毒素作用

本發明采用本研究試驗IV和V的試驗樣品制備方法,進一步設計了使用本發明農用殺菌劑的處理劑量,同時根據所述農用殺菌劑中井岡霉素和腈菌唑的用量設計了單劑處理。田間試驗于2013年在江蘇新洋農場進行。在淮麥22號小麥揚花初期對水噴施處理,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。各處理重復3次,每小區面積50平方米。同時設50%多菌靈懸浮劑每畝用80mL作為對照藥劑處理。按照農業部有關殺菌劑田間藥效試驗準則行業標準規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數、防治效果和上述Abbott(1925)方法計算對赤霉病防治的增效作用,毒素檢測方法與上述研究V的方法相同,試驗結果見表8。

表8:本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥病害及減少谷物毒素污染試驗結果

表8田間應用結果表明,本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥赤霉病每畝用井岡霉素1~100克有效成分、腈菌唑每畝用3~25克有效成分不僅對小麥赤霉病、葉枯病、白粉病和銹病具有極好的防治效果,遠好于常用多菌靈(經檢測試驗地病原菌群體中對多菌靈表現抗藥性的病菌占37.7%),而且對包括抗藥性赤霉病菌引起的赤霉病具有極其顯著的增效防治作用,其結果與同年在白馬湖農場的田間試驗結果類似。其中以每畝用井岡霉素5~50克、腈菌唑用5~10克的效果不僅與更高劑量的防效差異不大,可以將DON毒素污染控制在安全范圍以內,而且用藥量少,成本低,利于環境保護,效益更好。特別值得注意的是,所有殺菌劑處理的谷物千粒重均明顯高于對照,尤其是井岡霉素與腈菌唑組合物處理,千粒重增加10%以上,增產作用更加顯著。

VII.本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治大麥赤霉病的增效作用和減少毒素污染的作用

根據本發明農用殺菌劑懸浮劑在田間防治赤霉病及兼治其他病害的良好結果,本發明人設計了利于減量使用農藥和降低成本的份量比例,制備了井岡霉素和腈菌唑不同含量的農用殺菌劑可濕性粉劑。其制備方法為:按照腈菌唑與井岡霉素原藥重量比混合后,加入以重量計30%凹凸棒土載體、1.0%NNO-1分散劑、3%拉開粉濕潤劑、2%十二烷基苯磺酸鈉表面活性劑,最后加填充物輕質碳酸鈣至100%,經砂磨機粉碎和過300目篩。分別制備含量為20%(1:3、1:2、1:1.5、1:1)和60%(4:1、10:3、10:1)的所述可濕性粉劑樣品。

按每畝用所述可濕性粉劑中的單劑用量,同時設計井岡霉素和腈菌唑的單劑處理及常用多酮可濕性粉劑對照用藥。2014年在大麥揚花初期對水噴施處理,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。各處理重復3次,每小區面積50平方米。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查大麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數和和防治效果。同時按研究內容Abbott(1925)方法,計算混劑防治大麥赤霉病的增效作用。蠟熟期每處理5點隨機取麥穗各150穗,帶回室內脫粒,按研究內容V的方法檢測并計算麥粒毒素含量。藥劑處理劑量、防效和增效作用及對毒素含量的影響試驗結果列于表9中。

表9:本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治大麥病害試驗結果

該田間應用表明,腈菌唑單劑處理對大麥赤霉病、葉枯病、白粉病和銹病均有較好防效,而井岡霉素單劑除了對赤霉病有較低防效以外,對其他病害基本沒有效果。但是,在每畝使用含有井岡霉素3~50gai和腈菌唑3~20gai的農用殺菌劑時,對赤霉病、葉枯病、白粉病和銹病的防效大幅度提高,防治效果達到80%~90%以上,優于對照常用藥劑多酮的效果,增效作用顯著。尤其以每畝用井岡霉素有效成分5~50克、腈菌唑用5~20克,可大幅度降低腈菌唑化學殺菌劑的用量,減輕農藥的環境壓力,降低麥粒的毒素污染。

VIII.本發明農用殺菌劑可濕性粉劑桶混防治小麥病害及減少毒素污染試驗

采用從市場上購買的浙江省桐廬匯豐生物化工有限公司64%井岡霉素A可溶性粉劑及由美國陶氏益農公司生產的40%腈菌唑可濕性粉劑。根據實驗設計所需要的井岡霉素和腈菌唑使用有效成分劑量,分別稱取兩種藥劑,先將井岡霉素對一半水稀釋后再加入腈菌唑,攪拌,再加入另一半水,混勻后噴霧。在小麥揚花初期噴施第一次藥,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。試驗于2014年4月在江蘇省新洋農場進行,小麥品種淮麥33,各處理重復3次,每小區面積50平方米。設多酮懸浮劑為對照藥劑處理。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數和和防治效果。增效作用及毒素檢測與上述研究相同,處理劑量及防效見表10。

表10:井岡霉素與腈菌唑可濕性粉劑桶混防治小麥病害試驗結果

上述研究結果表明,井岡霉素單劑與腈菌唑單劑在應用時臨時桶混后噴施,每畝用井岡霉素3~100克有效成分、腈菌唑每畝用3~15克有效成分的各處理防治赤霉病的效果與制備成的混劑在大、小麥上的應用效果相當,并對小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病也具有明顯的協同增效作用,防治效果好于多酮。特別是對小麥赤霉病具有顯著的增效作用,并與其他實例結果類似,表現在試驗劑量范圍內,隨腈菌唑劑量降低而增效作用加大。其中,每畝使用井岡霉素5~50克與腈菌唑5~15克有效成分均可達到防治赤霉病和兼治葉枯病、白粉病、銹病和減少DON毒素污染的理想結果。

總之,在本發明中所述的麥類赤霉病是小麥赤霉病和大麥赤霉病,由包括多菌靈抗性鐮刀菌的鐮刀菌屬病原真菌(Fusariumspp.)引起的麥類作物芽腐、苗枯、穗腐或枯穗。

上述研究結果表明,每畝使用含有1~150克井岡霉素和1~25克腈菌唑有效成分的組合物,在小麥播前種子處理(包衣或拌種)防治麥類赤霉病具有顯著增效作用,同時還兼治麥類白粉病、銹病和紋枯病;在小麥抽穗、揚花至灌漿期對水噴施,不僅對大、小麥赤霉病的防治具有增效作用,而且還具有降低DON毒素污染水平、增加千粒重和兼治白粉病、銹病和葉枯病的作用。

[有益效果]

本發明的有益效果是:

與常規殺菌劑相比,本發明的殺菌劑組合物具有以下優點:1、與應用單劑相比,該組合物用于防治麥類赤霉病具有明顯的增效作用,可顯著提高防治赤霉病的效果,提高人類防控麥類作物赤霉病的能力;2、可以顯著降低谷物DON毒素的污染水平;3、可以減少用藥量、降低成本、減少環境污染和農藥殘留;4、降低了殺菌劑選擇壓,可延緩小麥病原真菌對腈菌唑的抗藥性,并可防治對多菌靈產生抗藥性的麥類赤霉病;5、具有延長井岡霉素的持效期、減少用藥次數、兼治麥類白粉病、銹病、葉枯病和紋枯病,減少農藥使用的用工成本的優點;6、井岡霉素為選擇性強的無公害微生物源農藥,與腈菌唑混用,大幅度降低了化學農藥的使用劑量,對環境友好。

【具體實施方式】

通過下述實施例將能夠更好地理解本發明。

實施例1:42%本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥病害試驗

試驗時間與地點:2015年4月,江蘇新洋農場

試驗材料:小麥,品種:淮麥33號。

試驗方法:

樣品制備方法:腈菌唑與井岡霉素原藥按照重量比1:20、1:6、5:16、5:2和6:1混合,再按照本申請說明書描述的研究V方法,加工得到42%不同配比的本發明農用殺菌劑懸浮劑試驗樣品。每畝使用25毫升、50毫升、100毫升組合物制劑。小麥揚花初期兌水噴施,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。同時使用可濕性粉劑單劑的相應劑量和噴清水為對照,多菌靈作為對照藥劑,各處理重復2次,每小區面積100平方米。

按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況下,計算病情指數和和防治效果及對赤霉病的增效作用和對毒素污染控制的效果,其結果列于表11中。

表11:42%本發明農用殺菌劑懸浮劑防治小麥病害試驗結果

上述田間應用結果表明,使用0.5~36g井岡霉素和3~20克腈菌唑具有良好的小麥病害防治效果。防治赤霉病的增效系數111.6~136.1,增效作用顯著。但是,每畝應用3~15克井岡霉素和6~20克腈菌唑時,顯著降低毒素污染水平,增效作用極為明顯,防治赤霉病的效果均在80%以上,并可有效兼治小麥白粉病、銹病和葉枯病。這些結果還表明,采用0.5~36克井岡霉素和3~20克腈菌唑/畝時,谷物中的DON毒素含量較對照下降90%左右,比用井岡霉素或腈菌唑單獨處理,減毒效果也極顯著。

實施例2:64%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治小麥病害試驗

試驗時間與地點:2015年4月,江蘇沿江地區農科所(如皋)

試驗材料:小麥。品種:揚麥4號.

試驗方法:按照腈菌唑與井岡霉素原藥重量比1:1混合,按照本申請說明書描述的研究VII的方法制備得到64%可濕性粉劑試驗樣品。每畝分別使用井岡霉素和腈菌唑有效成分含量4~20克的本發明農用殺菌劑可濕性粉劑。在揚麥4號小麥揚花初期對水噴施,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量45公斤。使用20%單劑可濕性粉劑在混合使用中的劑量和噴清水為對照,設50%多酮可濕性粉劑60克/畝為對照藥劑。各處理重復3次,每小區面積50平方米。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數和和防治效果。收獲前隨機取樣脫粒,測定千粒重。粒重增加百分率=(處理千粒重-對照千粒重)/對照千粒重×100。結果見表12。

表12:64%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治小麥病害試驗結果

上述田間應用結果表明,每畝使用井岡霉素和腈菌唑1:1份量比的組合物有效含量各4~20克對小麥赤霉病、葉枯病、白粉病和銹病均有很好的防治效果,但以使用井岡霉素和腈菌唑各4~16克有效成分效果最佳。組合物處理能夠增加千粒重9.7%~11.8%,增產作用明顯。

實施例3:15%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治小麥病害及降低毒素污染試驗

試驗時間與地點:2015年4月,江蘇沿江地區農科所(如皋),試驗安排在實例2的相同田塊。

試驗材料:小麥。品種:揚麥4號。

試驗方法:按照腈菌唑與井岡霉素原藥重量比1:1混合后,加入以重量計10%高嶺土載體、2%木質素磺酸鈉助劑、2%羧甲基纖維素、1%烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯與2%聚乙烯醇,最后添加輕質碳酸鈣載體至100%,經砂磨機粉碎和過300目篩,制備含量為15%的本發明農用殺菌劑可濕性粉劑實驗用樣品。每畝分別使用井岡霉素和腈菌唑有效成分含量20、15、6克的組合物可濕性粉劑。在揚麥4號小麥揚花初期對水噴施,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量45公斤。使用15%單劑可濕性粉劑在混合使用中的劑量和噴清水為對照,設50%多酮可濕性粉劑60克/畝為對照藥劑。各處理重復3次,每小區面積50平方米。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數和和防治效果。收獲前隨機取樣脫粒,測定千粒重。粒重增加百分率=(處理千粒重-對照千粒重)/對照千粒重×100。試驗結果列于表13中。

表13:15%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治小麥病害試驗結果

上述試驗結果表明,本發明農用殺菌劑防治赤霉病的增效作用及增產作用顯著。這種作用與使用劑量有關,而與加工制劑的含量及助劑沒有顯著性關系。

實施例4:30%本發明農用殺菌劑水分散粒劑防治小麥病害及降低毒素污染的效果

試驗時間與地點:2015年4月,江蘇白馬湖農場

試驗材料:小麥。品種:華麥4號.

試驗方法:按照井岡霉素與腈菌唑重量比5:1加工得到30%的本發明農用殺菌劑水分散粒劑。其加工方法如下:39.1重量份64%井岡霉素(有效成分25份)、5.2重量份96.2%腈菌唑原藥(有效成分5份)、30重量份硫酸銨、17.2重量份輕質碳酸鈣、2.5份烷基酚聚氧乙烯醚、2.5份十二烷基苯磺酸鈉與3.5份脂肪酸聚氧乙烯酯,粉碎,過篩、造粒。

每畝用400、200、100、60克組合物制劑,在小麥揚花初期對水噴施,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。使用20%單劑可濕性粉劑100克/畝、50%多菌靈WP80克/畝和噴清水為對照,各處理重復3次,每小區面積50平方米。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數和和防治效果。試驗結果列于表14中。

表14:30%本發明農用殺菌劑水分散粒劑防治小麥病害試驗結果

上述田間應用效果表明,每畝按5份井岡霉素和1份腈菌唑組合物水分散粒劑的18~120克有效成分噴施,對小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病均有良好防治效果,顯著高于目前常用的多菌靈。

實施例5:32%本發明農用殺菌劑水乳劑防治小麥病害試驗

試驗時間與地點:2015年4月,江蘇白馬湖農場

試驗材料:小麥。品種:華麥4號。

試驗方法:32%本發明農用殺菌劑水乳劑制備方法如下:將原藥腈菌唑制成懸浮劑,加入環氧乙烷-環氧丙烷嵌段共聚物非離子型乳化劑攪拌成均勻油相;另外將井岡霉素水溶液、乙二醇防凍劑和1%苯甲酸混合為水相。在高速攪拌下將所述水相逐步加入上述油相中,制備得到32%井岡霉素與腈菌唑(重量比1:3)的水包油型水乳劑。

每畝用組合物水乳劑100、50、25、12.5毫升制劑,在小麥揚花初期對水噴施,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。使用20%單劑可濕性粉劑100克/畝、50%多菌靈WP80克/畝和噴清水為對照,各處理重復3次,每小區面積50平方米。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病發生情況,計算病情指數和和防治效果。試驗結果列于表15中。

表15:32%本發明農用殺菌劑水乳劑防治小麥病害試驗結果

上述田間應用結果表明,每畝使用井岡霉素與腈菌唑組合物有效成分8~32克對小麥赤霉病、白粉病、銹病和葉枯病的防治效果顯著高于多菌靈,每畝使用該組合物有效成分4克防治這些小麥病害也有一定的效果。

實施例6:45%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治小麥病害及降低毒素污染試驗

試驗時間與地點:2015年4月,江蘇沿江地區農科所(如皋)

試驗材料:小麥。品種:揚麥4號。

試驗方法:按照本申請說明書描述的研究VII的方法制備得到井岡霉素與腈菌唑重量比為2:1的45%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑試驗樣品,委托江蘇省沿江地區農科所進行田間試驗。每畝分別使用50、40、30和20克組合物可濕性粉劑制劑。在小麥揚花初期對水噴施,間隔5天噴施第二次藥,每畝噴水量50公斤。采用20%井岡霉素和腈菌唑單劑可濕性粉劑,按使用混劑中的單劑劑量及40克多菌靈有效成分作對照藥劑處理,并噴清水為空白對照,各處理重復3次,每小區面積50平方米。按照殺菌劑田間藥效試驗準則規定的相應方法,在乳熟期調查小麥赤霉病和白粉病發生情況,計算病情指數和和防治效果。

收獲時各處理5點取樣共200穗,脫粒后將樣品送南京農業大學檢測毒素含量。毒素檢測方法如上所述。試驗結果列于表16中。

表16:45%本發明農用殺菌劑可濕性粉劑防治小麥病害的效果

從上述田間應用實施例1~6的實驗結果可以看出,基于發現井岡霉素能夠抑制赤霉病菌致病因子DON毒素生物合成的作用,采用本發明農用殺菌劑可濕性粉劑處理麥種及在田間噴施,對小麥赤霉病的防治具有顯著的協同增效作用。同時,對麥類作物白粉病、銹病、葉枯病和紋枯病也有理想的防治效果。此外,發明人采用其中一些組合的井岡霉素和腈菌唑組合物在江蘇沿江地區農科所、江蘇新洋農場和白馬湖農場等地進行了3年試驗示范,均表現了對大、小麥赤霉病有很好防效,并有效兼治白粉病、葉枯病和銹病。本發明不僅解決了我國目前面臨的小麥赤霉病菌因多菌靈抗性而難以防控的重大難題,而且也能克服DON毒素污染小麥所導致的食品安全問題。與現有技術中常規的殺菌劑相比,本發明的殺菌組合物與農用殺菌劑能夠大大降低鐮刀菌DON毒素對谷物的污染,還因為具有協同增效作用,可以大幅度減少化學農藥用量和用藥成本,對于減少環境污染、治理抗藥性麥類真菌病害、保障食品安全具有很好的應用前景。

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本文標題:一種防治麥類赤霉病的含腈菌唑農藥組合物及其用途.pdf
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