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一種防治家蠶微粒子病的藥物組合物及其應用.pdf

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一種 防治 家蠶 微粒子 藥物 組合 及其 應用
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摘要
申請專利號:

CN201410099689.8

申請日:

20140318

公開號:

CN103828841B

公開日:

20150930

當前法律狀態:

有效性:

有效

法律詳情:
IPC分類號: A01N59/26,A01P1/00,A01P3/00,A01P5/00,A01N47/18,A01N41/10 主分類號: A01N59/26,A01P1/00,A01P3/00,A01P5/00,A01N47/18,A01N41/10
申請人: 華南農業大學
發明人: 劉吉平
地址: 510642 廣東省廣州市天河區五山路483號
優先權: CN201410099689A
專利代理機構: 廣州粵高專利商標代理有限公司 代理人: 林麗明
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法律狀態
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CN201410099689.8

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法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種防治家蠶微粒子病的藥物組合物及其應用。所述組合物含有阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉。本發明一方面利用阿苯達唑對寄生蟲的驅殺作用機理,使藥物在宿主家蠶體內代謝形成藥物的內環境,致使寄生蟲家蠶微孢子蟲無法存活和繁殖,對家蠶微粒子病具有較好的防治效果;另一方面,通過結合利用氟苯尼考具有抗菌譜廣,可以有效地治療家蠶體內包括各種革蘭氏陽性病原菌所致的細菌性腸胃病、革蘭氏陰性菌所致的細菌性敗血病,減少由于添食阿苯達唑溶液可能帶來的潛在細菌病的問題;同時利用磷酸三鈉有助溶和協同增效作用,可加速釋放阿苯達唑和氟苯尼考達到目的濃度,提高治療效果。將本發明藥物喂食家蠶,可以提高家蠶的攝食量和對阿苯達唑的吸收率,從而實現利用較低濃度的阿苯達唑就可以起到防治家蠶微粒子病和家蠶細菌病的作用,降低用藥成本。

權利要求書

1.一種藥物組合物,其特征在于,所述藥物組合物包括以下含量的組分:100~400?mg/L阿苯達唑、20~200?μg/L?氟苯尼考和50~400mg/L磷酸三鈉。2.根據權利要求1所述的藥物組合物,其特征在于,所述藥物組合物包括以下含量的組分:300?mg/L阿苯達唑、200?μg/L氟苯尼考和300mg/L磷酸三鈉。3.權利要求1或2所述藥物組合物的制備方法,其特征在于,按權利要求1或2所述配方稱取阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉,將阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉充分溶于冷開水中,即得藥物。4.權利要求1或2所述的藥物組合物的應用,其特征在于,應用于防治家蠶微粒子病。5.根據權利要求4所述的藥物組合物的應用,其特征在于,所述應用的具體方法為:將所述藥物組合物通過添食或噴布桑樹上的方式給藥,給藥的時間為家蠶四齡起蠶開始,連續9~11日,直至家蠶上蔟,每日添食1~2次。

說明書

技術領域

本發明涉及家蠶微粒子病防治技術領域,具體涉及一種防治家蠶微粒子病的藥物組合物及其應用。

背景技術

微孢子蟲(Microsporidia)是一類專性細胞內寄生的單細胞真核生物,由家蠶微孢子蟲感染引發的家蠶微粒子病導致蠶業生產上的毀滅性病害。調研發現,家蠶原種因感染微孢子蟲而超出國家法定的標準(簡稱“超毒”)而淘汰的比例逐年增加的趨勢相對明顯。大體上,每生產1萬張原種,就要因檢測出微粒子病而淘汰近1000張,而剩余的帶毒合格的和無毒合格的基本各占50%,直接經濟損失達上千萬元。微粒子病成為蠶種生產中蠶病防治的重點。

目前對于家蠶飼養中所發生的家蠶微粒子病,尚無十分有效的防治手段和藥物。現有的治療家蠶微粒子病的藥物主要為農藥或化學藥品,如以農藥多菌靈為主成分的防微靈等,治療效果并不十分顯著,且在用藥過程中對蠶體的正常生長和發育有不同程度的影響,也造成養蠶環境的污染及蠶體內的藥物殘留,對人體健康也有一定的危害。因此,為了家蠶微粒子病治療藥物的更新換代,通過對更多更高效、廣譜、使用安全的化學材料、獸藥以及人類使用各種治療寄生蟲病的藥物的不斷篩選,期望獲得具有顯著防治作用的家蠶微粒子病新藥物以滿足蠶桑生產的需要。

阿苯達唑為一高效低毒的廣譜驅蟲藥。臨床可用于驅蛔蟲、蟯蟲、絳蟲、鞭蟲、鉤蟲、糞圓線蟲等。在體內代謝為亞砜類或砜類后,抑制寄生蟲對葡萄糖的吸收,導致蟲體糖原耗竭,或抑制延胡索酸還原酶系統,阻礙ATP的產生,使寄生蟲無法存活和繁殖。楊瓊等在廣東蠶業發表的“家蠶微粒子病治療藥物的研究I.藥物篩選”中公開了阿苯達唑對家蠶微粒子病的防治效果較為理想,但是,楊瓊等僅僅公開了500mg/L的阿苯達唑對家蠶微粒子病的治療效果為95.8%,感染率為4.12%。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的不足,提供一種防治家蠶微粒子病的藥物組合物。

本發明的另一個目的在于提供一種防治家蠶微粒子病的藥物組合物的制備方法。

本發明的另一個目的在于提供一種防治家蠶微粒子病的藥物組合物的應用。

本發明的目的通過下述技術方案予以實現:

一種藥物組合物,所述藥物組合物包括以下含量的組分:100~400?mg/L阿苯達唑、20~200?μg/L?氟苯尼考和50~400mg/L磷酸三鈉。

優選地,所述藥物組合物包括以下含量的組分:300?mg/L阿苯達唑、200?μg/L氟苯尼考和300mg/L磷酸三鈉。

?一種如上所述藥物組合物的制備方法,包括如下步驟:按如上所述配方稱取阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉,將阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉充分溶于冷開水中,即得藥物。為了使藥物混合的比較充分,優選地制備方式為:按如上所述配方稱取阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉,三者混合后,加入少量水,充分研碎后再加水余量的水。

一種如上所述藥物組合物的應用,具體應用于防治家蠶微粒子病。

優選地,所述應用的具體方法為:將所述藥物組合物通過添食或噴布桑樹上的方式給藥,給藥的時間為家蠶四齡起蠶開始,連續9~11日,直至家蠶上蔟,每日添食1~2次。

添食給藥的方式主要用于實驗室防治研究,噴布桑樹上的方式給藥主要是用于大田防治。噴布桑樹的優選操作為:桑樹在家蠶5齡眠前或熟蠶前2~3天內噴藥1次;柞蠶上山(樹)后遇雨7d內噴藥1次,噴藥量以葉面布滿霧滴、葉尖和葉緣有少量藥液滴下為止(柞蠶換樹后再次遇雨需再噴1次)。

與現有技術相比,本發明具有如下有益效果:

本發明利用阿苯達唑對寄生蟲的驅殺作用機理,采用添食給藥途徑,使藥物在宿主家蠶體內代謝形成藥物的內環境,致使寄生蟲無法存活和繁殖,對家蠶微粒子病具有較好的防治效果,且其不會對養蠶環境產生污染,對家蠶的正常生長不會照成影響,對人類身體健康不會造成危害。

更重要的是本發明通過將阿苯達唑、氟苯尼考和磷酸三鈉組合在一起喂食,結合利用氟苯尼考具有抗菌譜廣,可以有效地治療家蠶體內包括各種革蘭氏陽性病原菌所致的細菌性腸胃病、革蘭氏陰性菌所致的細菌性敗血病,減少由于添食阿苯達唑溶液可能帶來的潛在細菌病的問題,同時利用磷酸三鈉有助溶和協同增效作用,可加速釋放阿苯達唑和氟苯尼考達到目的濃度,提高家蠶的攝食量和對阿苯達唑的吸收率,從而,可以實現利用較低濃度的阿苯達唑就可以起到防治家蠶微粒子病的作用,降低用藥成本。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作出進一步地詳細闡述,所述實施例只用于解釋本發明,并非用于限定本發明的范圍。下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明,均為常規方法;所使用的材料、試劑等,如無特殊說明,為可從商業途徑得到的試劑和材料。

一、生物材料

家蠶(Bombyx?mori)品種:高白A?、高白B、皓月*高白A(有斑A)、皓月*高白B(無斑B),由蘇州大學貢成良教授提供。

家蠶微孢子蟲(Nosema?bombycis),又稱家蠶微粒子孢子,簡稱N.b,由華南農業大學亞熱帶蠶病防控實驗室經常規的桑葉添食繼代繁殖獲得,也可以采用本領域其他實驗室或者研究院所提供的家蠶微孢子蟲。

二、供試藥品

阿苯達唑(商品名腸蟲清)。“腸蟲清”(阿苯達唑片),購自中美天津史克制藥有限公司。

實施例1

一種藥物組合物,所述藥物組合物包括以下含量的組分:300mg/L阿苯達唑、200?μg/L氟苯尼考和300mg/L磷酸三鈉。

藥物的制備方法:10?L冷開水中加入阿苯達唑3g、氟苯尼考2mg和磷酸三鈉3g,充分混勻即得藥物。或者,即將阿苯達唑3g、氟苯尼考2mg和磷酸三鈉3g充分混勻后,加入少量冷開水,充分研碎后,再加水余量冷開水,混勻后即得藥物。

實施例2

一種藥物組合物,所述藥物組合物包括以下含量的組分:100mg/L阿苯達唑、100?μg/L氟苯尼考和100mg/L磷酸三鈉。

藥物的制備方法:10?L冷開水中加入阿苯達唑1g、氟苯尼考1mg和磷酸三鈉1g,充分混勻即得藥物。或者,即將阿苯達唑1g、氟苯尼考1mg和磷酸三鈉1g充分混勻后,加入少量冷開水,充分研碎后,再加水余量冷開水,混勻后即得藥物。

實施例3

一種藥物組合物,所述藥物組合物包括以下含量的組分:400mg/L阿苯達唑、50?μg/L氟苯尼考和400mg/L磷酸三鈉。

藥物的制備方法:10?L冷開水中加入阿苯達唑4g、氟苯尼考0.5mg和磷酸三鈉4g,充分混勻即得藥物。或者,即將阿苯達唑4g、氟苯尼考0.5mg和磷酸三鈉4g充分混勻后,加入少量冷開水,充分研碎后,再加水余量冷開水,混勻后即得藥物。

實施例4

將實施例1所述藥物組合應用于防治家蠶微孢子病,具體步驟如下:

S1.攻毒處理:用1×105粒/mL濃度的家蠶微孢子蟲N.b液涂抹在桑葉上,然后給試驗蠶添毒約6小時。

S2.藥物處理:將實施例1所述的藥物組合物的藥液浸泡桑葉,待晾干后喂蠶。

S3.對照組處理:分別設置2個對照組,水處理組1為沒有添食N.b孢子、也沒有添食本發明藥物組合物的對照組;水處理組2為添食105粒/mL家蠶微孢子蟲N.b孢子、無添食本發明藥物組合物的對照組。

S4.治療效果調查:將N.b孢子添毒、本發明藥物組合物處理以及對照處理的試驗蠶飼養至上蔟結繭,蠶蛾羽化后5~6天烘殺,逐蛾鏡檢,調查各區的微孢子蟲感染率,并分別算出治療指數。飼養期間每天記錄家蠶的生長情況,記錄死蠶或病蠶條數、結繭數、羽化數、死蛹數、雙宮繭、總繭量和繭層量等。

治療指數=[1-(試驗區感染率÷對照區感染率)]?×100。另外,根據樣品在640倍顯微鏡下鏡檢時每個視野內微粒子孢子的密度,標出各區的感染程度。

S5.試驗結果

本實施例藥物組合物治療家蠶微粒子病試驗結果如表1~3所示。

表1??四齡起蠶添食105粒/ml?N.b孢子后每天的生長情況(總數)

?表2??蠶繭收集情況

?

表3??實施例1所述藥物組合物治療家蠶微粒子病效果調查

對比例1

本實施例主要調查不同濃度的阿苯達唑溶液(商品名“腸蟲清”)對家蠶微孢子蟲的治療效果,實驗組共設五個濃度(2000mg/L、1000mg/L、500mg/L、200mg/L和100mg/L);水處理組1為沒有添食孢子,也沒有用添食腸蟲清的對照組;水處理組2為添食105粒/mL微粒子孢子、但沒有添食腸蟲清的對照組。具體步驟如下:

S1.攻毒處理:用1×105粒/mL濃度的家蠶微孢子蟲N.b液涂抹在桑葉上,然后給試驗蠶添毒約6小時。

S2.藥物處理:將“腸蟲清”原液分別稀釋成100mg/L、200mg/L、500mg/L、1000?mg/L、2000mg/L濃度,將不同濃度的藥液分別浸泡桑葉,待晾干后喂蠶。

S3.對照組處理:分別設置2個對照組,水處理組1為沒有添食N.b孢子、也沒有添食本發明藥物組合物的對照組;水處理組2為添食105粒/mL家蠶微孢子蟲N.b孢子、無添食本發明藥物組合物的對照組。

S4.治療效果調查:將N.b孢子添毒、本發明藥物組合物處理以及對照處理的試驗蠶飼養至上蔟結繭,蠶蛾羽化后5~6天烘殺,逐蛾鏡檢,調查各區的微孢子蟲感染率,并分別算出治療指數。飼養期間每天記錄家蠶的生長情況,記錄死蠶或病蠶條數、結繭數、羽化數、死蛹數、雙宮繭、總繭量和繭層量等。

治療指數=[1-(試驗區感染率÷對照區感染率)]?×100。另外,根據樣品在640倍顯微鏡下鏡檢時每個視野內微粒子孢子的密度,標出各區的感染程度。

????S5.試驗結果

“腸蟲清”治療家蠶微粒子病試驗結果如表4~6所示。

表4??四齡起蠶添食105粒/ml?N.b孢子后每天的生長情況(總數)

表5??蠶繭收集情況

表6?對比例1所述藥物治療家蠶微粒子病效果調查

由表4~6的實驗數據可知,適當濃度的“腸蟲清”溶液對家蠶微粒子病可以起到一定的治療效果,且其對家蠶的正常生長不會造成影響。其中,水處理組l家蠶的發病率為0%,說明正常飼養的家蠶無感染微孢子蟲。當用105粒/ml孢子添食家蠶,用2000mg/L?“腸蟲清”溶液處理后,與對照組2相比,實驗組家蠶的發病率為0%,治療效果最佳,達到100%;當添食的“腸蟲清”溶液為l000mg/L時,實驗組家蠶的發病率與對照組相比,也比較低,其中有斑A為0%,其余三個品種發病率為2~4.5%,效果比較明顯。當添食“腸蟲清”溶液濃度為500mg/L時,其治療效果與l000mg/L相當,也有明顯的效果。當“腸蟲清”溶液濃度降低為200mg/L和100mg/L時,微粒子病發病率大大提高,分別為14.58%和25.53%。水處理組2的發病率最高為42.22%。以上結果說明“腸蟲清”治療家蠶微粒子病有一定的療效,當濃度高于500mg/L時可以起到明顯的治療效果,低于500mg/L時,治療作用減弱。

綜合實施例1和對比例1的結果來看,本發明通過將阿苯達唑和氟苯尼考以及磷酸三鈉組合在一起喂食,可以提高家蠶的攝食量和對阿苯達唑的吸收率,從而,可以實現利用較低濃度的阿苯達唑就可以起到防治家蠶微粒子病的作用,降低用藥成本。

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