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速生刺參的選育方法.pdf

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速生 刺參 選育 方法
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摘要
申請專利號:

CN200710015124.7

申請日:

20070708

公開號:

CN101091458A

公開日:

20071226

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A01K61/00,A01D61/00 主分類號: A01K61/00,A01D61/00
申請人: 李成林
發明人: 李成林,胡煒
地址: 266002山東省青島市市南區貴州路47號
優先權: CN200710015124A
專利代理機構: 青島聯智專利商標事務所有限公司 代理人: 楊秉利
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法律狀態
申請(專利)號:

CN200710015124.7

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明提供一種速生刺參的選育方法,其選育方法的技術工藝流程為:本土不同地域親參篩選→親參分池人工培育→育肥待產→待產用水二次過濾→產卵、排精→不同容器收集精、卵→→受精卵孵化→孵化幼體選優→小、中、大耳幼體培育→樽形幼體→投放附著基質→稚參培育→進行生長發育情況的比較研究→選育出F1代速生刺參品系優勢組合→進入養成比較試驗研究→選擇優勢性狀群體→自交固定其遺傳性狀。通過經典的選育方法和現代生物技術相結合進行刺參的良種選育,獲得優良目的性狀好、抗病能力強的速生刺參的品種。

權利要求書

1、一種速生刺參的選育方法,其特征在于:選育方法的技術工藝流程為:本土不同地域親參篩選→親參分池人工培育→育肥待產→待產用水二次過濾→產卵、排精→不同容器收集精、卵→→受精卵孵化→孵化幼體選優→小、中、大耳幼體培育→樽形幼體→投放附著基質→稚參培育→進行生長發育情況的比較研究→選育出F1代速生刺參品系優勢組合→進入養成比較試驗研究→選擇優勢性狀群體→自交固定其遺傳性狀。2、按照權利要求1所述的速生刺參的選育方法,其特征在于:本發明選育方法的具體措施為:采用具有本土區域優勢的群體選育、育成雜交、結合標記輔助選育的技術路線,從本土不同地域采集野生群體或者選擇不同表型特征的養殖群體;根據選育目的,分別從不同群體中選擇生長快、品質優的個體作為親本,通過群體內交配繁育F1代;利用不同群體內選擇的親本,通過群體間種內雜交產生F1代,利用2F1自群繁育,固定遺傳性,育成新品系,增加育種效率;對F1代苗種在不同生長發育期進行人工選擇,留取目的性狀好、抗病力強的個體繼續培育,作為進一步選育的親本,經過諸代選育,提高和固定刺參生長快的優勢經濟性狀。3、按照權利要求1或2所述的速生刺參的選育方法,其特征在于:利用微衛星、AFLP、RAPD中的一種分子標記,對不同群體進行分析,篩選群體特有的分子標記,作為選育過程中群體判別的標記;利用上述標記手段,在子代篩選與生長、抗逆和耐高溫等目的性狀相關的分子標記,用于標記輔助選育。4、按照權利要求1或2所述的速生刺參的選育方法,其特征在于:選育方法的具體步驟為:(1)親參蓄養在水溫達到16℃-18℃時,親參基本成熟,此時是親參采捕的最佳時機,應選擇青島刺參和煙臺刺參或威海刺參,體重在200g/頭以上,體長大于20cm,無傷殘病害,無排內臟,性腺飽滿;親參運回后,要人工蓄養,培育水溫為16.5-18℃,培育密度以20頭/m為宜,每天早晚各換水一次,換水溫差不大于0.5℃;(2)采苗種參一般需要7-10天的暫養促熟,即可采卵,采卵前先陰干1-2小時,再用海水流動刺激30分鐘,不同產地親參分不同容器分別待產,采卵用水為砂濾好的海水,水溫為20-21.5℃;當親參開始排放精卵時要有專人觀察,分別撈取雄參和雌參,再分不同容器分別盛放使其繼續排放,記錄好產地,注意撈時動作要輕,以免影響產卵數量;由于刺參的卵為沉性卵,所以在產卵過程中要不斷攪動箱內水體或微充氣,以免卵因缺氧而影響其發育;產卵的同時還要及時加入精液,低倍鏡觀察每個卵子周圍有2-3個精子即可;(3)孵化采卵授精后進入孵化階段,孵化過程中微量充氣,并每隔30-60分鐘攪動孵化用水使卵處于懸浮狀態,孵化環境條件要求為水溫19-22℃,鹽度29-32,PH值7.8-8.5,光照500-1000lx,溶解氧5mg/l以上;(4)刺參幼體培育當胚胎發育到小耳幼體時要進行選育,用NX-79尼龍絲網拖選或用虹吸管虹吸選育,選幼后的幼體密度一般控制在0.3-0.6個/ml,餌料投喂堅持少投勤投的原則,在生產中要注意通過鏡檢幼體胃的飽滿度而加以適當調節,一般胃區內有一半餌料即可;培育水溫控制在19.5-22℃,換水前后的水溫溫差不要超過0.5℃;光照為500-1500lx;幼體適宜的海水鹽度為26.5-32.7;(5)幼體附著當大耳幼體出現五觸手原基后或幼體20%-30%發育至樽形幼體時,即可投放波紋板等附著基,在投放前應對波紋板進行消毒處理;附著前幾天仍需繼續投喂單胞藻,一般4-7天后可適當投喂鼠尾藻磨碎液;當全部附著后,投喂鼠尾藻磨碎液和人工配合餌料;投放波紋板后每天連續充氣,日換水兩次,每次1/2,同時5-7天倒池一次,夏季高溫期間不超過28℃;刺參苗培育至體長1.5厘米即可轉入中間育成或用于養成、放流;養殖過程中也要區分不同雜交選育組合分區養成,觀察生長速度及活動情況,做好記錄,采取樣本,利用微衛星、AFLP、RAPD中的一種分子標記,對不同群體進行分析,篩選群體特有的分子標記,作為選育過程中群體判別的標記,選取性狀好的群體繼續進行子一代的自交,固定其遺傳性狀,最終達到雜交選育優良品種的目的。

說明書

?速生刺參的選育方法

技術領域

本發明屬于水產苗種選育技術,具體說是一種速生刺參的選育方 法。

背景技術

目前,我國用于增養殖的刺參苗種均為未經選育的野生種群后 代,生長緩慢,個體差異大、抗逆性差、成活率低、病害頻繁發生。 自2003年以來,刺參養殖已不同程度的發生“爛嘴”、“吐臟”、“搖 頭”、“白化”、“腐皮”、“老頭參”等“刺參綜合病癥”,不同程度的 波及并危害到各海參養殖主產區,尤其是近二年,病害頻發,損失慘 重,每年損失達十余億元。究其原因,主要是苗種繁育及養殖生產上 具有極大的隨意性,不斷的近親繁殖導致了種質退化,性狀不穩定, 病害頻發。現在也有選擇國外刺參品種與本地刺參品種利用傳統方式 進行雜交刺參的選育方法,這種選育方法沒有采用科學的現代生物技 術,缺少針對性、目的性,最終導致選育的刺參特性不理想,尤其是 對保護本國生物品種的種質資源非常不利,易造成本土刺參種質資源 的破壞,目前,我國遭受外來物種生物入侵事件頻繁發生,并造成了 極大的經濟損失。因此,人們迫切地希望能夠有一種科學合理的速生 刺參的選育方法,以解決上述問題。

發明內容

本發明的目的是針對現有的技術存在的不足,提供一種速生刺參 的選育方法,通過經典的選育方法和現代生物技術相結合進行本土刺 參的良種選育,以獲得優良目的性狀好、抗病能力強的速生刺參的品 種(品系)。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的:一種速生刺參的選育 方法,其特征在于:選育方法的技術工藝流程為:

本發明選育方法的進一步的技術措施為:采用具有本土區域優勢 的群體選育、育成雜交、結合標記輔助選育的技術路線,從本土不同 地域采集野生群體或者選擇不同表型特征的養殖群體;根據選育目 的,分別從不同群體中選擇生長快、品質優的個體作為親本,通過群 體內交配繁育F1代;利用不同群體內選擇的親本,通過群體間種內 雜交產生F1代,利用2F1自群繁育,固定遺傳性,育成新品系,增 加育種效率;對F1代苗種在不同生長發育期進行人工選擇,留取目 的性狀好、抗病力強的個體繼續培育,作為進一步選育的親本,經過 諸代選育,提高和固定刺參生長快的優勢經濟性狀。

本發明選育方法再進一步的技術措施為:利用微衛星、AFLP、RAPD 中的一種分子標記,對不同群體進行分析,篩選群體特有的分子標記, 作為選育過程中群體判別的標記;利用上述標記手段,在子代篩選與 生長、抗逆和耐高溫等目的性狀相關的分子標記,用于標記輔助選育。

本發明選育方法的具體步驟為:

(1)親參蓄養

在水溫達到16℃-18℃時,親參基本成熟,此時是親參采捕的最 佳時機,應選擇青島刺參和煙臺刺參或威海刺參,體重在200g/頭以 上,體長大于20cm,無傷殘病害,無排內臟,性腺飽滿;親參運回 后,要人工蓄養,培育水溫為16.5-18℃,培育密度以20頭/m3為宜, 每天早晚各換水一次,換水溫差不大于0.5℃;

(2)采苗

種參一般需要7-10天的暫養促熟,即可采卵,采卵前先陰干1-2 小時,再用海水流動刺激30分鐘,不同產地親參分不同容器分別待 產,采卵用水為砂濾好的海水,水溫為20-21.5℃;當親參開始排 放精卵時要有專人觀察,分別撈取雄參和雌參,再分不同容器分別盛 放使其繼續排放,記錄好產地,注意撈時動作要輕,以免影響產卵數 量;由于刺參的卵為沉性卵,所以在產卵過程中要不斷攪動箱內水體 或微充氣,以免卵因缺氧而影響其發育;產卵的同時還要及時加入精 液,低倍鏡觀察每個卵子周圍有2-3個精子即可;

(3)孵化

采卵授精后進入孵化階段,孵化過程中微量充氣,并每隔30-60 分鐘攪動孵化用水使卵處于懸浮狀態,孵化環境條件要求為水溫19 -22℃,鹽度29-32,PH值7.8-8.5,光照500-1000lx,溶解氧5mg /l以上;

(4)刺參幼體培育

當胚胎發育到小耳幼體時要進行選育,用NX-79尼龍絲網拖選或 用虹吸管虹吸選育,選幼后的幼體密度一般控制在0.3-0.6個/ml, 餌料投喂堅持少投勤投的原則,在生產中要注意通過鏡檢幼體胃的飽 滿度而加以適當調節,一般胃區內有一半餌料即可;培育水溫控制在 19.5-22℃,換水前后的水溫溫差不要超過0.5℃;光照為500 -1500lx;幼體適宜的海水鹽度為26.5-32.7;

(5)幼體附著

當大耳幼體出現五觸手原基后或幼體20%-30%發育至樽形幼體 時,即可投放波紋板等附著基,在投放前應對波紋板進行消毒處理; 附著前幾天仍需繼續投喂單胞藻,一般4-7天后可適當投喂鼠尾藻磨 碎液;當全部附著后,投喂鼠尾藻磨碎液和人工配合餌料;投放波紋 板后每天連續充氣,日換水兩次,每次1/2,同時5-7天倒池一次, 夏季高溫期間不超過28℃;刺參苗培育至體長1.5厘米即可轉入中 間育成或用于養成、放流;養殖過程中也要區分不同雜交選育組合分 區養成,觀察生長速度及活動情況,做好記錄,采取樣本,利用微衛 星、AFLP、RAPD中的一種分子標記,對不同群體進行分析,篩選群 體特有的分子標記,作為選育過程中群體判別的標記,選取性狀好的 群體繼續進行子一代的自交,固定其遺傳性狀,最終達到雜交選育優 良品種的目的。

本發明與現有技術相比具有以下優點和積極效果:

1、本發明采用本土具有區域優勢的群體選育、育成雜交、結合 標記輔助選育的技術路線,從本土不同地域采集野生群體或者選擇不 同表型特征的養殖群體進行選育、雜交,獲得優良目的性狀好、抗病 能力強的速生刺參的品種。根據每年的試驗結果證明,選育出煙臺刺 參與青島刺參的雜交參苗比未經選育的參苗生長速度提高3-7倍,生 長適溫比未選育擴大1-2℃,培育及養殖周期縮短1/3-1/2,并且 選育的參苗活力強、攝食好、體壁厚、不易發生病害,各項性狀指標 均優于傳統的自交參苗。

2、本發明針對區域資源增殖、池塘和圍堰等多種模式刺參養殖 的需要,通過經典的選育方法和現代生物技術相結合進行刺參的良種 選育,針對性和目的性強,運用現代生物遺存育種技術方法,獲得速 生刺參的品種(品系),構建刺參育種技術體系。雜交刺參可優化我國 本土刺參物種性狀,防止外來生物物種入侵,避免因過度無序繁育而 導致種質退化、產量降低、質量下降及由此而產生的病害頻發導致育 苗及養殖的嚴重虧損,解決了刺參養殖產業參苗的“瓶頸”問題,推 進刺參苗種繁育及養殖業的健康持續發展,持續提升經濟、社會和環 境效益。

附圖說明

圖1為本發明刺參的良種選育技術路線圖。

具體實施方式

本發明的速生刺參選育方法的技術工藝流程為:

本發明采用圖1所示的選育技術路線,下面結合具體實施例對本 發明作進一步詳細說明,具體步驟為:

(1)親參蓄養

在水溫達到16℃-18℃時,親參基本成熟,此時是親參采捕的最 佳時機,應選擇青島刺參和煙臺刺參或威海刺參,體重在200g/頭以 上,體長大于20cm,無傷殘病害,無排內臟,性腺飽滿(性腺指數 大于10%為好)。親參運回后,要人工蓄養,培育水溫為16-18℃,培 育密度以20頭/m3為宜,親參每日按其體重的4%分早晚兩次投喂鼠尾 藻磨碎液或人工配合飼料,上午投30%,下午投70%。每天早晚各換 水一次,每次換水量為1/3-1/2量程,換水溫差不大于0.5℃,(由 于不同產地親參采捕前水溫各不相同,因此在蓄養期間換水時應調控 水溫,使其逐漸達到一致,以達到同時排放精卵的目的)。

(2)采苗

種參一般經3-7天的暫養促熟,即可采卵,采卵前先陰干1-2小 時,再用海水流動刺激30分鐘,不同產地親參分不同容器分別放入 待產,采卵用水為砂濾好的海水,水溫為20-21.5℃。當親參開始 排放精卵時要有專人觀察,分別撈取雄參和雌參,再分不同容器分別 盛放使其繼續排放,記錄好產地,注意撈時動作要輕,以免影響產卵 數量。由于刺參的卵為沉性卵,所以在產卵過程中要不斷攪動池(箱) 內水體或微充氣,以免卵因缺氧而影響其發育。產卵后及時加入精液, 精液不可加入太多,低倍鏡觀察每個卵子周圍有2-3個精子即可。如 果精子濃度過高,要及時洗去。整個過程要嚴格區分不同產地的親參, 不可弄混,撈取親參及盛放親參的工具和容器不可混用,做到專池專 用,操作人員也要嚴格要求,當換池操作時要消毒雙手,以免將相同 產地的刺參精卵混合授精,達不到雜交選育的目的。

(3)孵化

采苗后進入孵化階段,孵化過程中微量充氣,并每隔30-60分鐘 攪動孵化用水使卵處于懸浮狀態。孵化環境條件要求為水溫20-22℃, 鹽度29-32,PH值7.8-8.5,光照500-1000lx,溶解氧5mg/l以上。

(4)刺參幼體培育

當胚胎發育到小耳幼體時要進行選育,用NX-7?9尼龍絲網拖選或 用虹吸管虹吸選育,選幼后的幼體密度一般控制在0.3-0.6個/ml。 餌料投喂堅持少投勤投的原則,單細胞藻類的適宜投喂量分別為小耳 幼體1萬cell/ml,中耳幼體1.5萬cell/ml,大耳幼體2萬cell/ml。 在生產中要注意通過鏡檢幼體胃的飽滿度而加以適當調節,一般胃區 內有一半餌料即可。培育中應將水溫控制在21℃左右最佳,而且換 水前后的水溫溫差不要超過0.5℃;光照適宜強度應在500-1500lx; 幼體適宜的海水鹽度為28-32.7;海參幼體對pH值的適應范圍較廣, 只有pH低于6.0或超過9.0時幼體才會出現不適應現象。幼體培育 一般每天換水兩次,早晚各一次,每次換水量為1/3,后期為1/2。

(5)幼體附著

當大耳幼體出現五觸手原基后或幼體20%-30%發育至樽形幼體 時,是投放附著基的最佳時機。一般幼體浮游7-9天即可發育到樽形 幼體,此時即可投放波紋板等附著基,在投放前應對波紋板進行消毒 處理。附著前幾天仍需繼續投喂單胞藻,一般3-5天后可適當投喂鼠 尾藻磨碎液。當全部附著后,投喂鼠尾藻磨碎液和人工配合餌料,投 喂量一般為20ppm,視情況而定。投放波紋板后每天也要連續充 氣,每天換水兩次,每次1/2,同時5-7天倒池一次。夏季高溫期 間水溫不超過28℃。后期要注意搞好池子的清底和倒池,并視情況 進行篩選,分期出池,以利個體小的迅速生長。另外要定時監測水質 理化因子的變化情況,認真觀察參苗的攝食、活動及生長情況,發現 問題及時處理。一般刺參苗培育至體長約1.5厘米即可轉入中間育成 或用于養成、放流。養殖過程中也要區分不同雜交選育組合分區養成, 觀察生長速度及活動情況,做好記錄。采取樣本,利用微衛星、AFLP、 RAPD等分子標記,對不同群體進行分析,篩選群體特有的分子標記, 作為選育過程中群體判別的標記,選取性狀好的群體繼續進行子一代 (即F1代)的自交,固定其遺傳性狀,最終達到雜交選育優良品種 的目的。種內雜交選育優勢以青島刺參與煙臺刺參的雜交優勢最明 顯。

當然,上述說明并非是對本發明的限制,本發明并不限于上述舉 例,本技術領域的普通技術人員,在本發明的實質范圍內,作出的變 化、改型、添加或替換,都應屬于本發明的保護范圍。

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